自家无乳链球菌乳房炎疫苗使用效果评价

蒋业慧，谭世新，翟卫爽，李红燕，刘华，杨学云

（1.新疆天山畜牧生物工程股份有限公司，昌吉 831100；2.新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐 830000）

自家无乳链球菌乳房炎疫苗使用效果评价

蒋业慧1，谭世新1，翟卫爽1，李红燕1，刘华1，杨学云2

（1.新疆天山畜牧生物工程股份有限公司，昌吉 831100；2.新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐 830000）

本研究采集某奶牛场全群泌乳牛的奶样，经美国加利福尼亚隐性乳房炎测试法（CMT）检测后，对阳性奶样进行细菌培养并鉴定出该场隐性乳房炎的主要致病菌，制作自家乳房炎疫苗。通过病原菌检测、隐性乳房炎发病率及体细胞数的变化趋势分析，评估自家乳房炎疫苗的使用效果，以供参考。

乳房炎疫苗；隐性乳房炎；无乳链球菌；体细胞数

奶牛乳房炎是乳房组织因受到微生物入侵、物理或化学损伤而引起的一种炎症反应，是病原微生物、环境因素、管理因素、奶牛自身及遗传因素等综合作用的结果[1,2]。由于乳房炎的致病菌种类繁多且不断变异，同时新耐药菌株又不断出现[3]，有条件的规模化牧场可以考虑制备自家乳房炎疫苗。自家苗的制备可有效提高疫苗使用效果，使用疫苗后应定时随机采集乳样进行病原菌检测，以对牧场所流行的乳房炎致病菌种类进行动态监测，同时对疫苗使用效果进行评估[4]。本研究对某奶牛场主要乳房炎致病菌进行了鉴定[5]，制作了自家乳房炎疫苗，并对全群泌乳牛进行了免疫接种，通过病原菌检测、隐性乳房炎发病率及体细胞数的变化趋势分析，评估自家乳房炎疫苗的使用效果，为牧场奶牛乳房炎的防控提供了有力保障。

1 材料与方法

1.1 样品采集

2016年6月2日，采集某奶牛场全群泌乳牛的奶样置于10mL离心管，详细记录牛号，共收集有效奶样213份。

1.2 隐性乳房炎检测

采用CMT对每份奶样进行隐性乳房炎检测，具体结果判定标准见表1。隐性乳房炎诊断液由新疆畜牧科学院兽医研究所提供。

表1 CMT的判定标准

表2 全群免疫前隐性乳房炎发病率与病原菌检出率

表3 免疫前后隐性乳房炎发病率与病原菌检出率比较

1.3 病原菌分离鉴定

将隐性乳房炎阳性奶样送至实验室进行病原菌检测与分离鉴定。

1.4 自家疫苗的制备

参考相关文献[6]制作自家疫苗：取主要致病菌的纯化培养液（每毫升含活菌数10亿～100亿），加入0.5%福尔马林，37℃ 16～24h灭活，做无菌试验检测后分装备用[6]。自家疫苗由新疆畜牧科学院兽医研究所研制。

1.5 免疫程序

2016年6月12日，采用自家乳房炎疫苗对产后30d的全群泌乳牛进行群体免疫，肌肉注射2mL/头，首次免疫后间隔2个月，于2016年8月4日，加强免疫一次。

1.6 免疫效果监测

在免疫前（2016年6月2日）和第二次免疫30d后（2016年9月18日），采集全群泌乳牛的奶样送至实验室做病原菌检测，结合每月奶牛生产性能测定（DHI）的牛奶中体细胞数及隐性乳房炎发病率变化趋势对自家疫苗的免疫效果进行评价。

2 结果与分析

2.1 免疫前检测结果

由表2可知，对213份泌乳牛奶样进行隐性乳房炎检测，其中92份奶样显示为隐性乳房炎阳性，阳性率为43%。将92份隐性乳房炎阳性奶样全部接种培养，分离的病原菌主要有无乳链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，且检出率分别为13.62%、3.76%、3.76%。由病原菌检测结果可知无乳链球菌是乳房炎的主要致病菌。为此制作了无乳链球菌乳房炎疫苗，并对全群泌乳牛进行免疫接种。

2.2 免疫结果检测

2.2.1 免疫前后比较

因干奶期、奶样污染、检测数据异常等原因，最终统计了81头泌奶牛的有效检测数据。由表3可知，隐性乳房炎的发病率由49.4%下降到12.4%，无乳链球菌的检出率由13.6%下降到0；金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的检出率无显著变化。由表4可知，经过两次无乳链球菌乳房炎疫苗免疫后，隐性乳房炎的转阴率达到85%。结果表明，该疫苗对无乳链球菌乳房炎具有一定的预防及治疗作用，但对环境致病菌引发的隐性乳房炎无积极作用。

表4 两次免疫后隐性乳房炎及无乳链球菌转阴率

2.2.2 免疫前后体细胞数变化情况

以上述81头泌乳牛为调查对象，对其中部分牛只的体细胞数变化情况进行了统计，由表5可知，第一次免疫前后，31%牛的体细胞数有所降低；加强免疫前后，38%牛的体细胞数有所降低；加强免疫后与未免疫前相比，52%牛的体细胞数有所降低。由此可知，81头泌乳牛在经过两次无乳链球菌乳房炎疫苗免疫后，平均体细胞数有明显降低。也说明无乳链球菌乳房炎疫苗的使用效果较为显著，加强对无乳链球菌引起的乳房炎有一定的预防作用，且加强免疫后免疫效果有显著提升。

表5 免疫前后体细胞数变化情况

3 讨论

奶牛乳房炎的致病菌呈现多样性，据报道[7]，引起此病的主要致病菌为金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌，且约占整个奶牛乳房炎病例的90%～95%，与该奶牛场乳房炎的主要致病菌种类一致。目前，防治乳房炎最有效的方法是在改善环境卫生和挤奶程序的基础上，结合药物治疗与疫苗免疫的综合防控手段。

由于乳房炎致病原种类多的特点，比起单联疫苗，多联疫苗更受到牧场的青睐[8]。但金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为环境性致病菌[9]，若牛场有严格的消毒与饲养流程，可不对此两种病原进行免疫。该奶牛场乳房炎的主要致病菌除环境菌外，主要是无乳链球菌，考虑单联疫苗更具有针对性，免疫效果比多联苗更佳，所以采用的疫苗是自制的无乳链球菌疫苗。通过一年的免疫效果监测可知，自制无乳链球菌疫苗在防治乳房炎中有显著效果，可在该场推广使用。

[1] 赵兴绪.兽医产科学(第3版)[M].北京:农业出版社,2002:458-459.

[2] 李勇,葛秀国,窦忠英.奶牛隐性乳房炎研究进展[J].黄牛杂志,2003,29(1):38-41.

[3] 姚伟,于学武,曹波,等.辽宁地区奶牛乳房炎细菌性病原学鉴定及大肠杆菌药敏试验[J].中国畜牧兽医,2016,43(11):3080-3084.

[4] 蒋业慧,王爱芳, 翟卫爽,等. 奶牛乳房炎综合防控研究现状[J].新疆畜牧业,2016,2:27-30.

[5] 薛永康,王新庄,闫跃飞,等.奶牛乳房炎诊断方法研究进展[J].湖北畜牧兽医,2016,8(37):15-19.

[6] 陆有飞,高永锐,吴远松.畜禽自家疫苗的制备与应用[J].广西畜牧兽医,2008,11:58-60.

[7] 黄瑛,尹晓敏,李丽好,等.奶牛临床型乳房炎病原菌的分离与鉴定[J].中国畜牧兽医,2007,34(12):74-76.

[8] 林锋强,潘杭君,胡松华.奶牛乳房炎疫苗研究进展[J].中国奶牛,2002,1:40-43.

[9] 李宏胜,郁杰,李新圃,等.奶牛乳房炎病原菌区系分布及发病规律研究进展[J].动物医学进展,2005,26(6):146-149.

Evaluation of the Effects on Self-developed Mastitis Vaccine Against Streptococcus agalactiae

JIANG Ye-hui1, TAN Shi-xin1, ZHAI Wei-shuang1, LI Hong-yan1, LIU Hua1, YANG Xue-yun2
(1.Xinjiang Tianshan Animal Husbandry Bio-engineering co., LTD, Changji 831100;2.Research Institute of Veterinary Medicine, Xinjiang Academy of Animal Sciences, Urumqi 830000)

In order to clarify the pathogen of mastitis in dairy cattle, the milk samples of the whole group of dairy cows were collected, and the recessive mastitis test was performed with the California recessive mastitis test (CMT).To determine the main pathogens in the farm of mastitis and make their own mastitis vaccine, positive milk samples were cultured and the advantages of pathogenic bacteria species were identified. Through the changes of pathogenic bacteria and somatic cell count and the recessive mastitis, the effects of mastitis vaccine were evaluated.

Mastitis vaccine; Recessive mastitis;Streptococcus agalactiae; Somatic cells count

S858.23

A

1004-4264（2017）12-0034-03

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.12.009

2017-03-06

蒋业慧（1986-），女，汉族，硕士，研究方向为预防兽医学。

杨学云（1978-），男，宁夏中卫人，助理研究员，从事动物微生物学与免疫学研究工作。