定氮法测定鹿心中的蛋白质含量

2017-12-25倪亚娜秦俭

中国卫生产业 2017年30期

关键词：含氮通则法测定

倪亚娜，秦俭

1.白城市食品药品检验所，吉林白城 13700；2.吉林白城市食品化妆品稽查分局，吉林白城 137000

定氮法测定鹿心中的蛋白质含量

倪亚娜1，秦俭2

1.白城市食品药品检验所，吉林白城 13700；2.吉林白城市食品化妆品稽查分局，吉林白城 137000

目的采用氮测定法测定鹿心的蛋白质含量。方法采用《中国药典》2015年版四部通则0704氮测定法中第一法（常量法）或第三法（定氮仪法）测定。结果《中国药典》2015年版四部通则0704氮测定法中第三法（定氮仪法）测定消解，与第一法含量无差别。结论鉴于各大药厂存在无消解仪、自动蒸馏仪及滴定仪的现象，故仍采用第一法进行测定。

鹿心；定氮；消解；蒸馏

鹿心具有调节人体新陈代谢、促进改善各种生理机能、养心气、安心脏、止汗化痰、抑制兴奋、活血通窍、化瘀止痛、对心脏病、心肌缺血、心绞痛，心动过速、心动过缓、脑动脉硬化，有较好效果。同时鹿心具有增强心肌收缩力、减低心肌耗氧量，对失眠盗汗，内脏积水引起心跳、心慌等症具有显著效果。同时作为多家药企生产的心脑康胶囊的主要原料。

1 仪器与方法

1.1 仪器及试剂

1.1.1 仪器 BSA 224S电热套；凯氏烧瓶（500 mL）；冷凝管；锥形瓶（500 mL）；滴定管（25 mL）；量筒（50 mL，100 mL）；NKD6280电位法凯氏定氮仪

1.1.2 试剂硫酸钾（分析纯）、硫酸铜（分析纯）、硫酸（分析纯）、硫酸铵（分析纯）、磷酸二氢铵（分析纯）、氢氧化钠、锌粒

1.2 消解条件考察

1.2.1 氮测定法《中国药典》2015年版四部通则0704第一法）[1]。

1.2.2 取样量考察以药材中蛋白质为考察对象进行含量测定。分别取本品粉末0.10、0.25、0.50、1.00 g，精密称定，照氮测定法[2]《中国药典》（2015年版四部）通则0704第一法)测定，根据硫酸滴定液（0.05 mol/L）消耗量，确定取样量。见表2。

表1 已知含量9.98%（g/g）的鹿心不同取样量消耗滴定液数量

根据上述滴定液消耗数量，控制滴定体积25 mL以下，确定取样量0.25 g。

1.3 样品中含量测定

分别精密称取11个批次梅花鹿、马鹿样品，按含量测定的方法进行测定。结果见表2。

表2 样品含量测定结果

1.3.1 氮测定法《中国药典》（2015年版四部）通则0704第三法。

1.3.2 取样量考察以药材中蛋白质为考察对象进行含量测定。分别取本品粉末0.1、0.2、0.3、0.5 g（含氮量9.98%），精密称定，照氮测定法(《中国药典》（2015年版四部）通则0704第三法测定，根据硫酸滴定液（0.05 mol/L）消耗量，确定取样量。见表3。

表3 不同取样量鹿心消耗滴定液数量

根据上述含量测定结果，控制滴定体积25 mL以下，确定取样量0.25 g。

1.3.3 样品中含量测定分别精密称取11个批次公鹿的样品及7个批次母鹿样品，按含量测定的方法进行测定。结果见表4。

表4 样品含量测定结果

结果表明：氮测定法的第一法和第三法在测定结果比较中无差异。所以使用第一法和第三法都可以。

1.4 方法验证

1.4.1 线性关系考察精密称取供试品粉末0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 g，照氮测定法(《中国药典》（2015年版四部）通则0704第一法测定，以取样量为横坐标，消耗滴定液体积值为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明供试品取样量在0.1～1.0 g范围内呈现良好线性关系。回归方程为Y=65.37X-0.099 3，r=0.999 9。见表5。

表5 线性关系考察结果(已知含量9.98%)

1.4.2 准确度 ①以磷酸二氢铵为基准物质的精密度考察。取已知含量的鹿心药材粉末0.25 g（含氮量9.98%以干品计算，水分5.4%），共取6份，精密加入磷酸二氢铵（含氮量12.17%）试剂适量，平行6份，按以上“供试品溶液的制备”项制备并测定，分别计算回收率，结果表明平均回收率为95.2%，RSD为0.56%。见表6。

表6 回收率试验结果

②以硫酸铵为基准物质的精密度考察。取已知含量的鹿心药材粉末0.25 g（含氮量9.98%以干品计算，水分5.4%），共取6份，精密加入硫酸铵（含氮量21.21%）试剂适量，平行6份，按以上“供试品溶液的制备”项制备并测定，分别计算回收率，结果表明平均回收率为95.50%，RSD为0.01%。见表7。