单核细胞及中性粒细胞/淋巴细胞比值与中晚期肿瘤的相关性

罗蒙++++++孙勤国

[摘要] 目的 探讨中性粒细胞淋巴细胞比值（NLR）、单核细胞计数（MONO）与中晚期肿瘤的关系。 方法 回顾性分析2015年1月～2016年1月武汉市第三医院住院患者193例的临床资料，分为肿瘤组（102例）和非肿瘤对照组（91例），同时按照KPS评分标准将肿瘤组分为病情稳定组（53例）和病情重危组（49例），并分析单核细胞及中性粒细胞/淋巴细胞比值与中晚期肿瘤的相关性。 结果 肿瘤组的MONO和NLR水平显著高于对照组（P < 0.01）；病情稳定组的NLR水平低于重危组（P < 0.05），而两者的MONO值差异无统计学意义（P > 0.05）。高水平的MONO值及NLR是肿瘤发生的危险因素[OR = 0.072，95%CI = 0.012～0.43，P = 0.004；OR = 0.389，95%CI = 10.212～0.712，P = 0.002]。NLR、MONO值预测肿瘤发生的ROC曲线下面积分别为0.787、0.629。 结论 MONO及NLR增高与肿瘤发生显著相关。

[关键词] 单核细胞；中性粒细胞淋巴细胞比值；中晚期肿瘤

[中图分类号] R512.62 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）11（b）-0092-05

[Abstract] Objective To investigate the relationship between neutrophil lymphocyte ratio （NLR）， monocyte （MONO） count and advanced tumor. Methods Clinical data of 193 hospitalized patients in Wuhan Third Hospital from January 2015 to January 2016 were retrospectively analyzed， and they were divided into cancer group （102 cases） and non-tumor control group （91 cases）， at the same time， the tumor group was divided into stable condition group （53 cases） andcritically ill group （49 cases） according to KPS score. The relationship between monocyte and neutrophil/lymphocyte ratio and advanced tumor was analyzed. Results The levels of MONO and NLR in the tumor group were significantly higher than those in the control group （P < 0.01）. The NLR level in the stable group was lower than that in the severe risk group （P < 0.05）， there was no significant difference in MONO between the two groups （P > 0.05）. High levels of MONO and NLR were the risk factors for tumorigenesis [OR = 0.072， 95%CI = 0.012-0.43， P = 0.004； OR = 0.389， 95%CI = 10.212-0.712， P = 0.002]， the area of ROC curve of NLR， MONO values in prediction of tumorigenesis were 0.787， 0.629. Conclusion The increase of MONO and NLR is significantly correlated with tumorigenesis.

[Key words] Mono-nuclear cell； Neutrophil lymphocyte ratio； Advanced cancer

惡性肿瘤与炎症的关系十分密切，许多肿瘤在早期即可出现炎性反应，部分肿瘤在慢性炎症基础上发展而来，炎症参与着肿瘤发生的始终。同时，肿瘤可引起更高级别的炎症变化，影响疾病进展和预后，所以肿瘤与炎症两者是相互交联、共同发展的过程。中性粒细胞/淋巴细胞比值是系统炎性反应的评价指标，NLR升高反映机体炎性反应激活和抗肿瘤免疫能力低下。恶性肿瘤患者多出现NLR水平升高，且异常升高的NLR已经证实是多种肿瘤患者预后不良的独立危险因素[1]。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞，单核细胞在抑制患者的抗肿瘤免疫力和促进肿瘤发生方面均有重要价值，单核细胞计数是恶性肿瘤患者预后差的因素之一[2]。近年来，在临床中发现中晚期肿瘤患者的单核细胞、中性粒细胞/淋巴细胞比值升高。本研究对武汉大学附属同仁医院（武汉市第三医院）（以下简称“我院”）193例肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析，旨在探讨中性粒细胞淋巴细胞比值（NLR）、单核细胞计数（MONO）与中晚期肿瘤的关联性，现将研究结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年1月～2016年1月在我院住院的193例患者的病历资料，分为肿瘤组102例和非肿瘤对照组91例，其中肿瘤组包括胆囊癌6例，结肠癌5例，卵巢癌3例，膀胱癌1例，前列腺癌3例，乳腺癌5例，肾癌2例，食管癌3例，胃癌16例，胰腺癌2例，肺癌46例，腹膜癌1例，肝癌5例，颌下腺癌1例，直肠癌3例。同时按照KPS评分标准将肿瘤组分为病情稳定组53例和重危组49例。非肿瘤患者来自我院入院体检的正常人。收集患者的血常规，将白细胞计数（WBC）、MONO、嗜酸性粒细胞计数（EO）、中性粒细胞计数（N）、淋巴细胞计数（L）、NLR，逐项输入Excel表格中。endprint

1.2 方法

①通过物理诊断、影像学检查、病理活检等确诊为肿瘤中晚期患者；②所有患者均未行放化疗；③有多次血常规结果的采用入院第一次检查结果；④按照Karnofsky（卡氏，KPS，百分法）功能状态评分标准[3]，将KPS评分在70分以上的患者纳入病情稳定组，KPS评分在0～20分的患者纳入重危组；⑤排除标准：急性感染性疾病、血液系统肿瘤。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，符合正态分布计量资料的均数用均数±标准差表示，两组间比较采用Student-t检验；不符合正态分布的改用中位数（四分位数间距）[M（P25，P75）]表示，两组间比较采用非参数检验（Mann-Whitney）。计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；采用多变量Logistic回归分析肿瘤发生的危险因素，并用ROC曲线分析NLR、MONO值对肿瘤发生的预测价值，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病情稳定组、重危组、对照组的MONO、NLR水平的比较

三组MONO水平差异有统计学意义（P = 0.000）；重危组MONO水平显著高于稳定组与对照组（P = 0.025，P < 0.01）；病情稳定组、重危组MONO水平与对照组比较，差异无统计学意义（P = 0.064）。三组NLR比较，差异有统计学意义（P < 0.01）；病情稳定组、重危组与对照组的MONO、NLR水平比较差异有统计学意义（P < 0.05），病情稳定组与重危组的MONO比较差异无统计学意义（P > 0.05），而两者的NLR比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 病情稳定组、重危组、对照组中MONO、NLR高表达情况

病情稳定组与重危组、稳定组与对照组、重危组与对照组MONO表达水平比较，差异均有统计学意义（χ2=0.825、9.425、16.348，P=0.396、0.003、0.000）。病情稳定组与重危组、稳定组与对照组、重危组与对照组NLR表达水平比较，差异均有统计学意义（χ2=6.977、3.441、68.030，P = 0.01、0.000、0.000）。通过ROC曲线得出NLR约为3.66时敏感性和特异性最高，以3.66为标准将NLR分为两组。结果显示肿瘤组的NLR、MONO表达水平显著高于对照组（P < 0.01），其中重危组NLR水平高于稳定组（P < 0.05），而两者的MONO水平之间差异无统计学意义（P > 0.05）。见表2。

2.3 多因素Logistic回归分析

以是否发生肿瘤为因变量，以WBC、EO、MONO、N、L、NLR为自变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示MONO值、NLR是肿瘤发生的危险因素（P < 0.01）。见表3。

2.4 MONO、NLR的ROC曲线分析

NLR最佳诊断Cut-off值为3.66，诊断的敏感度与特异度分别是58.8%和96.7%，诊断价值较高。MONO最佳诊断Cut-off值为0.605，诊断的敏感度与特异度分别是30.4%和93.4%。见表4、图1。

3 讨论

近年来，随着人们对肿瘤发生发展规律认识的不断深化及对其分子及免疫机制的探索的不断拓展，越来越多的证据表明，全身炎性反应与肿瘤进展、侵袭的关系密切[4]。肿瘤引发的炎性反应程度可通过C反应蛋白、白蛋白及二者构成的格拉斯哥评分等多种指标评估[5]，而中性粒细胞/淋巴细胞比值是近几年才被广泛研究的炎症指标。研究证实，肿瘤间质可通过趋化因子（白细胞介素-8等）招募中性粒细胞和淋巴细胞、成纤维细胞等多种细胞共同组成肿瘤微环境，为肿瘤增殖和浸润扩散创造条件。其中，中性粒细胞和淋巴细胞是构成肿瘤微环境的主要细胞成分。中性粒细胞可通过释放促肿瘤因子、参与调节肿瘤细胞生长与调亡信号通路等途径促进肿瘤浸润转移：淋巴细胞尤其是CD4+、CD8+细胞共同参与执行肿瘤免疫，构建免疫屏障并杀伤肿瘤细胞，淋巴细胞下降反映机体抗肿瘤免疫能力下降[6]。NLR升高是中性粒细胞升高和淋巴细胞下降协同作用所致，N升高可促进肿瘤组织浸润转移，L下降往往提示肿瘤免疫应答受抑制[7]。外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）是机体炎性反应的评价指标，又能体现机体免疫状态，已被认为是影响肿瘤患者预后的独立因素之一。多项研究证实外周血中NLR已经成为多种恶性肿瘤的预后指标。NLR升高可明显缩短癌症患者总生存时间（OS）和无进展生存时间（PFS）[8-11]。在NLR数值方面，有研究表明胰腺导管腺癌术前外周血NLR≥3.22的患者1年、3年、5年的无疾病生存时间（DFS）和OS均显著低于其他组别（NLR<1.83组、1.83≤NLR<2.39组、2.39≤NFR<3.22）[12]。提示NLR数值越高肿瘤患者分期越晚，预后越差[13]。但并非所有的研究结果都提示NLR越高，肿瘤治疗后的预后越差。日本学者Kinoshita等[14]对150例肝癌患者进行的前瞻性研究表明，NLR并不能作为预测肝癌预后的独立指标[14]。因此在临床中NLR是一种简单易测的指标，反映炎症激活因子中性粒细胞和免疫调节因子淋己细胞之间的平衡状态。可用于医学多个疾病的诊断、治疗及预后判断，但是应该结合其他临床指标，如肿瘤标志物，提高预测的准确性。

单核细胞是机体重要的杀伤肿瘤细胞的免疫细胞，是树突状细胞（DC）和巨噬细胞的前体细胞。外周血中单核细胞移行到组织后聚集并浸润到实体肿瘤组织的巨噬细胞被称为肿瘤相关巨噬细胞（TAM），在一些趋化因子的作用下，TAM 可诱导肿瘤复发，选择性杀伤或阻断外周血单核细胞向肿瘤组织的迁徙[15]。人类外周血单核细胞根据是否表达CD16主要分为CD14+CD16-和CD14+CD16+两个亚群。表达CD16的单核细胞又可细分为CD14+CD16+和CD14+CD16+两个亚群。研究发现单核细胞各亚群在细胞因子的分泌、抗原递呈、迁移、体外诱导分化的CD功能等方面都不相同。这些结果提示不同表型的单核细胞可能在肿瘤免疫中的作用也不相同。有研究发现晚期胃癌患者外周血中CD14+CD16+单核细胞比例增加到40%以上，但这群单核细胞增加的机制以及与肿瘤发生风险的相关性等方面的研究仍无报道[16]。单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）是免疫细胞产生的关键趋化因子之一，在乳腺肿瘤及肿瘤细胞中过度表达。具有促炎作用的CD14+CD16+单核细胞在乳腺癌患者外周血升高，升高的CD14+CD16+这群单核细胞可以迁移到肿瘤组织局部，发挥重要的免疫调节作用。升高的CD14+CD16+单核细胞与肿瘤大小和肿瘤病理分期呈负相关。外周血CD14+CD16+单核细胞的水平作为乳腺癌早期诊断的指标具有一定的灵敏度和特异性，将来有可能成为肿瘤早期诊断的有用指标。同时MCP-1在恶性骨肿瘤中高表达，在转移性骨肿瘤表达更显著。MCP-1在骨肿瘤中可能具有趋化炎症细胞在肿瘤中的浸润；诱导新生血管生成；促进肿瘤细胞生长；促进肿瘤侵袭和转移；抑制抗肿瘤免疫应答，参与调节肿瘤免疫耐受；激活破骨细胞参与骨质破坏等几个方面的生物学作用[17]。CD14即脂多糖（LPS）受体，最初是一种存在于单核细胞、吞噬细胞等细胞表面的白细胞分化抗原，Toll样受体（TLRs）是一类介导天然免疫的跨膜信号传递受体家族，在细胞活化信號的转导中起重要作用。TLR4是TLRs家族中受体之一，是LPS信号转导通路中至关重要的受体，存在于单核吞噬细胞表面，主要功能是识别LPS或LPS-CD14复合物，它在介导LPS引起的单核一吞噬细胞的活化和释放多种前炎症因子中起重要作用。CD14的表达与肿瘤的进展无关，而TLR4有可能反映肿瘤的变化，在CD14处于稳定状态下，TLR4的表达上调有可能预测肿瘤患者病情恶化[18]。肿瘤经过放疗后外周血髓系细胞主要是单核细胞，单核细胞向放疗部位迁徙并聚集，从而促进肿瘤局部血管新生，诱导肿瘤复发。临床研究表明结肠癌、食管癌、胃癌患者外周血单核细胞CD24表达上调，且与肿瘤分化程度呈正相关，在食管癌外周血单核细胞表达可反映肿瘤恶性程度[19]。食管癌患者外周血单核细胞比例是淋巴结转移的独立危险因素，并与肿瘤浸润程度呈正相关[20]。肺癌患者全身及局部都存在较高水平的外周血单核细胞表达IL-10，IL-10在肺癌的恶化进程方面可能发挥着重要作用[21]。目前在单核细胞与肿瘤预后方面的研究较少，需要进一步研究证实两者的相关性。endprint

本组研究结果显示，中晚期肿瘤患者的MONO和NLR水平显著高于对照组（P < 0.01），与目前认为MONO、NLR能促进肿瘤发生、发展、转移的研究相吻合。病情稳定组的NLR值明显小于重危组（P < 0.05），而两者的MONO值比较差异无统计学意义（P > 0.05），提示NLR升高是肿瘤预后不良的危险因素。Logistic回归属于概率型非线性回归，具有判别和预测功能。多因素Logistic回归分析显示MONO与NLR是肿瘤发生的危险因素（OR = 0.072，95%CI = 0.012～0.43，P = 0.004；OR = 0.389，95%CI = 10.212～0.712，P = 0.002）。MONO水平的OR值小于0.1，与肿瘤的发生关联很强，NLR水平的OR值>0.3，与肿瘤的发生有很强的关联，是肿瘤的独立危险因素。ROC曲线分析显示，NLR在肿瘤发生的ROC曲线下的面积为0.787，在肿瘤中有较高的应用价值，最佳诊断Cut-off值为3.66，即认为如果NLR>3.66时可能预示是肿瘤患者。MONO值ROC曲线下的面积为0.629，与肿瘤的发生有一定关系，虽然在肿瘤中的诊断价值较NLR低，但单核细胞计数升高仍预示肿瘤预后不良。

综上所述，NLR、MONO高表达与肿瘤关系密切，作为一种便捷、经济的检测指标，在临床应用有较高的价值。

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