饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼生长性能和体成分的影响

叶 乐，胡 静，赵 旺，王 雨，吴开畅

( 1.中国水产科学研究院 南海水产研究所，热带水产研究开发中心，海南 三亚 572018；2.农业部南海渔业资源开发利用重点实验室，广东 广州 510300 )

饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼生长性能和体成分的影响

叶 乐1,2，胡 静1,2，赵 旺1,2，王 雨1,2，吴开畅1,2

( 1.中国水产科学研究院 南海水产研究所，热带水产研究开发中心，海南 三亚 572018；2.农业部南海渔业资源开发利用重点实验室，广东 广州 510300 )

为确定眼斑双锯鱼幼鱼人工配合饲料中合适蛋白水平，试验研究了饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼生长、饲料转化率和体成分的影响。养殖试验在循环水系统中进行，初始体质量为(0.085±0.002) g的幼鱼随机分配到6个处理组(每组3个平行，每个平行40尾)，分别投喂蛋白水平38.11%、40.91%、44.16%、47.21%、50.02%和53.16% 的人工饲料，试验持续56 d。不同蛋白水平饲料对眼斑双锯鱼幼鱼质量增加率、特定生长率、饲料系数、蛋白质效率以及全鱼的体成分等均有显著影响。饲料蛋白水平为38.11%～50.02%时，随着饲料蛋白水平的增加，眼斑双锯鱼幼鱼的质量增加率和特定生长率呈增加的趋势，饲料蛋白水平为53.16%时略有下降。经回归分析，当饲料蛋白水平为51.8%时，质量增加率最大；蛋白水平为51.1%时，特定生长率最大。饲料系数也随着饲料蛋白水平增加而呈现先降后升的趋势，饲料系数谷值出现在蛋白水平为47.21% 试验组，而蛋白质效率则相反。经回归分析，当饲料蛋白水平为47.5%时，饲料系数最小；饲料蛋白水平为47.8%时，蛋白质效率最大。全鱼粗蛋白随饲料蛋白水平升高呈增加趋势，但到一定水平后维持该水平不再增加，而粗脂肪则随饲料蛋白水平升高呈先降后升的趋势。综合生长、饲料转化率和体成分等指标，本试验条件下眼斑双锯鱼幼鱼适宜的饲料蛋白水平为47.5%～51.8%。

眼斑双锯鱼；幼鱼；蛋白水平；生长；体成分

眼斑双锯鱼(Amphiprionocellaris)属雀鲷科，海葵鱼亚科，双锯鱼属。海葵鱼亚科的鱼类统称为小丑鱼或海葵鱼，其共同的特点是能与海葵互利共生，是代表性的珊瑚礁观赏鱼类，常年销量稳居海水观赏鱼首位。随着海水观赏鱼产业的兴起，小丑鱼工厂化培育越来越为人们所重视。有关小丑鱼繁殖生物学方面的研究也成为热点，涉及亲鱼培育、胚胎和仔鱼发育等[1-4]，尽管如此，仔幼鱼营养需求方面的研究还比较匮乏，仅见仔鱼饵料品种选择和利用研究[5-8]。在小丑鱼培育过程中，饲料成本无疑占据了较大的成本份额。目前，幼鱼在完成变态后，主要使用新鲜鱼虾肉和市售海水观赏鱼成品鱼饲料投喂。使用新鲜鱼虾糜不仅价格高而且易污染水质，而市售海水观赏鱼成品鱼饲料价格昂贵，也不一定能满足幼鱼的生长需要和适口性，不适宜在产业化应用，因此，研制经济适用的幼鱼人工配合饲料对小丑鱼繁殖产业化具有重要的意义。

饲料中不恰当的营养配比不仅影响鱼类生长，还会导致鱼类行为和生理异常，降低对不良环境和疾病的抵抗能力[9]。蛋白质需求量研究在水产动物营养学研究中是最基本的一个环节。若饲料中蛋白质含量不足，将导致鱼类生长速度和饲料转化率降低[10-12]；反之，饲料中蛋白质含量过高，过多的蛋白质将分解仅作为能量使用，增加饲料成本，同时会加重鱼体代谢负担，并使鱼体排放更多的氨氮，导致水体质量下降[13-14]。此外，不合适的营养还会导致鱼类行为和生理异常，降低对不良环境和疾病的抵抗能力[9]。目前，海水鱼蛋白质营养需求的研究基本都是针对经济食用鱼类，如波纹短须石首鱼 (Umbrinacirrosa)[15]、漠斑牙鲆 (Paralichthyslethostigma)[16]、银鲳(Pampusargenteus)[17]、半滑舌鳎 (Cynoglossussemilaevis)[18]、大菱鲆(Scophthalmusmaximus)[19]、圆斑星鲽 (Veraspervariegatus)[20]等，而对观赏性海水鱼类研究较少，特别是对小丑鱼蛋白质营养需求方面的研究尚未见报道，仅见叶乐等[21]进行由鲜虾肉、鱿鱼肉和面粉等为主要原料的配合饲料初步研究，但未确定各营养要素的需求量，且鲜肉作为主要原材料比较昂贵。本试验采用蛋白质梯度法，通过研究饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼生长性能和饲料利用率的影响，以获得生长指标和饲料利用率最大时配合饲料中最佳蛋白水平，为小丑鱼人工养殖的配合饲料研制开发提供基础资料和理论依据，促进小丑鱼人工养殖产业化生产的发展。

1 材料与方法

1.1 试验设计和试验饲料

以鱼粉和豆粕为主要饲料蛋白源，以卵磷脂、鱼油和豆油为主要脂肪源，用玉米淀粉平衡能量，设计6个蛋白水平饲料，蛋白含量分别为38.11%，40.91%，44.16%，47.21%，50.02%，53.16%。各组饲料脂肪水平保持一致。将原料粉碎过0.2 mm筛后用鼓型混合机混合，以小型颗粒机冷制粒(粒径1.0 mm)，晾晒至水分约为10.00%。制成的饲料置于冰箱中-20 ℃保存待用。饲料原料和营养组成见表1。

1.2 试验鱼和养殖管理

试验鱼为自繁殖同批次幼鱼，初始体质量(0.085±0.002) g。选取体质健康、规格一致的个体进行试验。共6个处理组，每个处理组设3个重复，每个重复40尾鱼，共720尾。用基础饲料进行7 d驯养，待试验鱼正常摄食后开始试验。

表1 试验饲料原料和营养成分 %

注：(1) 复合维生素：维生素A，900000 IU/g；维生素D，250000 IU/g；维生素K3，60 IU/g；维生素E，50 IU/g；维生素B1，320 mg/g；维生素B2，1090 mg/g； 维生素B5，2000 mg/g； 维生素B6，500 mg/g；维生素B12，116 mg/g；维生素C，5000 mg/g；烟酸，40 mg/g；叶酸，5 mg/g；泛酸钙，20 mg/g；肌醇，150 mg/g；生物素，0.2 mg/g. (2) 无机盐混合物(g/100 g): 硫酸镁，3.0；氯化钾，0.7；碘化钾，0.015；硫酸锌，0.14；硫酸锰，0.03；氯化铜，0.05；氯化钴，0.005；硫酸亚铁，0.15；磷酸二氢钾，45.0；氯化钙，28.0. 饲料能量蛋白质以23.64 MJ/kg、脂肪以39.54 MJ/kg、糖以17.15 MJ/kg计算.

1.3 样品采集与分析

试验结束后称量每个水族箱试验鱼(饥饿24 h)总体质量。每个平行随机取10尾鱼用于测定体长、体质量和内脏质量，其余全鱼样品用于测定体成分。

水分测定用105 ℃烘箱干燥恒定质量法；粗蛋白测定为凯氏定氮法(总氮×6.25)；粗脂肪测定用索氏乙醚抽提法；灰分测定用马福炉灼烧法(550 ℃)；糖测定用3,5-二硝基水杨酸法[22-23]。

1.4 统计分析方法

成活率/%=Nt/N0×100%

质量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%

特定生长率/%·d-1=(lnmt-lnm0)/t×100%

日摄食率/%=m1/[(m0+mt+md)×t/2]×100%

饲料系数=m1/(mt-m0)

蛋白质效率=(mt-m0)/m2

肝体指数/%=m3/mt×100%

脏体指数/%=m4/mt×100%

式中，Nt为试验结束存活鱼数量(尾)；N0为试验开始鱼数量(尾)；mt为试验结束体质量(g)；m0为试验开始体质量(g)；md为试验死亡鱼体质量(g)；Lt为试验结束体长(cm)；m1为摄入饲料量(干质量)(g)；m2为蛋白质摄入量(g)，t为试验时间(d)；m3为肝质量(g)；m4为内脏质量(g)。

试验结果用 SPSS 19.0进行单因素方差分析，组间差异运用Duncan′s多重比较分析，P<0.05为差异显著。以质量增加率、特定生长率、饲料系数和蛋白质效率为指标进行二次曲线回归分析。

2 结果与分析

2.1 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼生长和饲料利用的影响

在养殖试验期间，眼斑双锯鱼幼鱼未患病，摄食和生长正常，均具有较高的成活率，各试验组间成活率差异不显著(P>0.05)，饲料蛋白水平对其生长的影响见表2。由表2可知，随着饲料蛋白水平由38.11%增至50.02%，眼斑双锯鱼幼鱼质量增加率和特定生长率均逐渐增加，而饲料蛋白水平53.16%时，眼斑双锯鱼幼鱼质量增加率和特定生长率均呈下降趋势。随着饲料蛋白水平增加，蛋白质效率呈先升后降的趋势，峰值出现在蛋白水平47.21%处理组，而饲料系数随蛋白水平增加呈先降后升的趋势，谷值出现在蛋白水平47.21%处理组。日摄食率在饲料蛋白水平38.11%时达最低，其余试验组间无显著差异(P>0.05)。对质量增加率与蛋白质进行回归分析，得出二次方程y=-0.8666x2+89.63x-1856.9(r2=0.7367)，求出当x=51.8时，质量增加率最大(图1)。对特定生长率与蛋白质进行回归分析，得出二次方程y=-0.0029x2+0.2965x-4.4102 (r2=0.802)，求出当x=51.1时，特定生长率最大(图2)。对饲料系数与蛋白质进行回归分析，得出二次方程y=0.0142x2-1.349x+34.6(r2=0.6792)，求出当x=47.5时，饲料系数最小(图3)。对蛋白质效率与蛋白质进行回归分析，得出二次方程y=-0.0043x2+0.4113x-8.6411(r2= 0.5991)，求出当x=47.8时，蛋白质效率最高(图4)。

2.2 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼体成分的影响

饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼体成分影响见表3。饲料蛋白质水平对幼鱼、全鱼水分和灰分无显著影响(P>0.05)；全鱼粗蛋白随饲料蛋白水平升高呈现先升后平稳的趋势；全鱼粗脂肪随饲料蛋白水平升高呈现先降后升的趋势。饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼肥满度、脏体指数、肝体指数无显著影响(P>0.05)(表4)。

表2 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼生长性能的影响(平均值±标准差)

注：同行数据后上标不同英文字母表示差异显著(P<0.05)，下同.

图1 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼质量增加率的影响

图2 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼特定生长率的影响

图3饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼饲料系数的影响

图4饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼蛋白质效率的影响

表3 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼体成分影响(平均值±标准差) %

3 讨 论

3.1 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼生长和饲料利用的影响

试验结果显示，随着饲料蛋白水平由38.11%增至50.02%，眼斑双锯鱼幼鱼质量增加率和特定生长率均逐渐增加，表明一定范围内饲料蛋白水平的增加可以促进幼鱼的生长，这与大部分鱼类试验结果一致，如波纹短须石首鱼[15]、漠斑牙鲆[16]、银鲳[17]、半滑舌鳎[18]、大菱鲆[19]和圆斑星鲽[20]等。试验结果还显示，随着饲料蛋白水平继续增至53.16%时，眼斑双锯鱼幼鱼质量增加率和特定生长率反而下降，虽然未达到显著差异，也表现出过高的饲料蛋白水平对幼鱼生长有副作用的趋势，饲料蛋白水平与幼鱼生长回归曲线符合二次曲线模型，造成这一结果可能的原因是，蛋白质摄入过量造成体内自由氨基酸累积过量，导致蛋白质中毒或者氮排泄代谢耗能大于多摄取的蛋白能量而造成生长率不升反降[24]。过高的饲料蛋白水平抑制生长现象在一些海水经济鱼类中也有发现，如波斯鲟(Acipenserpersicus)投喂蛋白水平50%的饲料时生长显著低于投喂蛋白水平为40%的饲料[25]，棕点石斑鱼(Epinephelusfuscoguttatus) 与鞍带石斑鱼(E.lanceolatus) 杂交种特定生长率随饲料蛋白水平增加而增加，但当饲料蛋白水平达55%时特定生长率又降低[26]；而与一些鱼类如花鲈(Lateolabraxjaponicus)[27]、星斑川鲽 (Platichthysstellatus)[28]和卵形鲳鲹(Trachinotusovatus)幼鱼[29]等不同，这些鱼类在高蛋白水平下仍维持较高生长水平而不下降，其饲料蛋白水平与幼鱼生长符合折线模型。根据生长指标质量增加率和特定生长率的分析结果，眼斑双锯鱼幼鱼适宜蛋白水平为51.1%～51.8%。

试验结果还表明，投喂低蛋白水平(38.11%)饲料时，眼斑双锯鱼摄食率显著高于其他蛋白水平试验组, 说明幼鱼在饲料蛋白水平低的时候通过增加摄食量以满足蛋白质的需要。这与星斑川鲽[28]和乌苏拟鲿(Pseudobagrusussuriensis)[30]研究结果类似。同样，波纹短须石首鱼饲料高蛋白水平组(53%和59%)日摄食率显著低于低蛋白水平组(35%)，饲料利用效率随饲料蛋白水平增加而提升[15]；圆斑星鲽饲料系数随蛋白水平增加而降低[20]。不同的是本试验随着饲料蛋白水平的增加, 饲料系数先降后升，而蛋白质效率先升后降，即饲料利用效率和蛋白质转化效率在蛋白水平47.21%试验组达最高后随蛋白水平继续增加而下降。与银鲳类似，低蛋白水平(35%)饲料系数显著低于高蛋白水平组，蛋白水平过高(55%)，蛋白质效率下降[17]。表明一定程度提高饲料蛋白水平可以提升饲料利用效率和蛋白质转化效率，但过高的蛋白水平反而导致饲料利用效率和蛋白质转化效率下降，尽管此时生长速度可能仍持续加快。根据饲料利用效率和蛋白转化效率指标，回归得出眼斑双锯鱼幼鱼适宜蛋白水平为47.5%～47.8%，比生长指标得出的适宜蛋白水平低，说明综合考量生长和饲料利用效率指标确定最适饲料蛋白水平会更为客观。综合生长和饲料利用指标，眼斑双锯鱼幼鱼适宜饲料蛋白水平为47.5%～51.8%，与目前所知其他肉食性海水鱼类蛋白质需要量基本一致(通常为45%～55%)，如卵形鲳鲹适宜的饲料蛋白质需要量为45.75%[29]，波纹短须石首鱼饲料最适蛋白水平为51.4%[15]，漠斑牙鲆[16]脂肪水平10%时最适蛋白水平50%，银鲳最适蛋白水平为 49%[17]，圆斑星鲽脂肪水平8%时最适蛋白水平50%[20]，半滑舌鳎最适蛋白水平为55%[18]，大菱鲆最适蛋白水平为55%，此时生长最快，饲料利用效率和能量利用效率最高[19]。

3.2 饲料蛋白水平对眼斑双锯鱼幼鱼体成分的影响

许多研究认为，随饲料蛋白水平增加，体成分中粗蛋白质量分数一般呈增加趋势，而粗脂肪质量分数呈下降趋势[20, 25, 31]。但是也有研究表明，随饲料蛋白水平增加而增加，波纹短须石首鱼体成分亦无显著差异[15]；还有研究表明，南亚野鲮(Labeorohita)体成分中粗蛋白和粗脂肪质量分数均随饲料蛋白水平增加而增加[32]。可见，体成分变化可能存在种类和个体差异，也可能存在养殖环境和试验条件与方法等差异的影响。本试验结果与以上结果有所不同，随饲料蛋白水平增加，体成分中粗蛋白质量分数呈增加趋势，但到一定水平后维持该水平不再增加，而粗脂肪质量分数呈先降后升的趋势。可能的原因是随着摄入蛋白增加，有更多蛋白质可用于鱼体的组织修复和新的组织形成[33]，此时表现出粗蛋白质量分数增加，但摄入过量蛋白质超出机体组织需要时，多余蛋白质不再用于组织构建而可能转化为脂肪在体内储存，此时表现出粗蛋白质量分数稳定而粗脂肪质量分数增加。作为鱼体营养状态指标的肥满度、肝体指数和脏体指数，饲料蛋白水平对其影响不显著，与乌苏拟鲿研究结果一致[30]，波斯鲟肝体指数在各蛋白水平试验组间亦无显著差异[25]，而圆斑星鲽肝体指数和脏体指数随着饲料蛋白水平的增加呈现下降的趋势，而肥满度无显著差异[20]。

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EffectsofDietaryProteinLevelsonGrowthPerformanceandBodyCompositioninJuvenileFalseClownFish,Amphiprionocellaris

YE Le1,2，HU Jing1,2，ZHAO Wang1,2，WANG Yu1,2，WU Kaichang1,2

( 1.Tropical Fisheries Research and Development Center, South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Sanya 572018, China; 2.Key Laboratory of South China Sea Fishery Resource Exploitation & Utilization, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510300, China )

An 8-week feeding trial was conducted to investigate the effects of different protein levels in diet on growth performance, body composition of juvenile false clown fishAmphiprionocellaris. The fish with initial body weight(0.085±0.002) g were randomly divided into six treatments with triplicate groups, and fed diets containing 38.11%, 40.91%, 44.16%, 47.21%, 50.02% or 53.16% protein in a circulating sea water system. The weight gain (WG) and specific growth rate (SGR) increased with protein level from 38.11% to 50.02% and decreased in the fish fed the diet containing 53.16% protein level. Regression analysis indicated that the maximal WG was found at 51.8% protein level and the maximal SGR was found at 51.1% protein level. Moreover, with the increase in protein level, feed conversion ratio (FCR) showed a trend of decline after rising first. The minimal FCR appeared at 47.21% protein level, and the trend of protein efficiency ratio (PER) was just the opposite. Regression analysis revealed that the minimum FCR was found at 47.5% protein level and the maximal PER was found at 47.8% protein level. Whole-body protein content increased as dietary protein level increasing，without increased at a certain high level. Whole-body crude fat decreased first and then increased with the increasing dietary protein level. Considering indicators such as growth, feed efficiency and body composition, the suitable dietary protein level of the juvenile false clown fish should be 47.5% to 51.8% under this experimental condition.

Amphiprionocellaris; juvenile; dietary protein level; growth performance; body composition

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.001

S965.8

A

1003-1111(2017)01-0001-07

2015-12-02；

2016-03-11.

海南省重点科技计划项目(ZDXM20130051)；海南省应用技术研发与示范推广专项(ZDXM2014131)；三亚市科技成果转化项目(2013CZ11)；国家(省)重点科技项目三亚市配套资金资助项目(2010PT06，2014PT01).

叶乐(1974—)，男，副研究员，博士；研究方向：海水养殖和生理生态学.E-mail: yele2008@163.com. 通讯作者：吴开畅(1959—)，男，研究员；研究方向：水产养殖.E-mail: wukaichang@163.com.