盐酸副玫瑰苯胺法测定亚硫酸盐残留量的改进研究

李雪+王琳

摘 要：通过对二氧化硫吸收剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）、三乙醇胺和甲醛的对比及盐酸副玫瑰苯胺法的影响因素研究，得到了一种无汞吸收盐酸副玫瑰苯胺法的最优检测条件，为食品中亚硫酸盐监督管理和现场检测提供参考和借鉴。

关键词：亚硫酸盐 盐酸副玫瑰苯胺法 吸光度

引言

滥用食品添加剂已成为食品安全的突出问题[1、2]，因亚硫酸盐具有良好的漂白、防腐、抗氧化、抑制细菌生长、控制酶促褐变等作用[3、4]，被允许作为食品添加剂广泛应用于食品工业中。通常情况下该物质以焦亚硫酸钾、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠等形式添加于食品中，或采用硫磺熏蒸的方式用于食品处理。但亚硫酸盐具有一定的毒性，过量摄入会造成红细胞、血红蛋白减少，损害胃肠和肝脏健康[ 5 ]。最新的研究发现，哮喘病患者食用含有亚硫酸盐的食品或饮料时，可能会像吸入了二氧化硫气体一样会诱发过敏性疾病[ 6 ]，这就迫切需要研究食品中亚硫酸盐残留量的快速检测技术。

目前，食品检测中亚硫酸盐的快速检测多依据现有的GB/T 5009.34-2003《食品中亚硫酸盐的测定》中盐酸副玫瑰苯胺法。该方法操作简单、灵敏度高，但因使用了剧毒的四氯汞钠作为二氧化硫吸收液，易对环境造成汞污染且检测时间较长，不太符合食品快速检测的要求。本文通过对二氧化硫具有吸收作用的EDTA-2Na、三乙醇胺、甲醛的对比研究[ 7 - 9 ]及其应用于盐酸副玫瑰苯胺法中影响因素的研究，得到一种无汞吸收盐酸副玫瑰苯胺法的最优检测方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

二氧化硫标准溶液100mg/L；去离子水；甲醛：质量分数37%～40%；浓盐酸：质量分数36%～38%；氢氧化钠、盐酸副玫瑰苯胺、EDTA-2Na、三乙醇胺等，均为分析纯；分光光度计：U-5100 HITACHI。

1.2 试剂配制

100g/L甲醛溶液：取10mL甲醛溶液（37%～40%）用去离子水定容到100mL，临用时用水将甲醛吸收液稀释成所需浓度；配制50g/L的EDTA-2Na和三乙醇胺溶液；氢氧化钠配制成浓度分别为0.5mol/L、1mol/L、1.5mol/L、2mol/L、3mol/L、4mol/L、5mol/L的溶液备用；按照GB/T 5009.34-2003中的方法配制盐酸副玫瑰苯胺溶液备用。

2 实验方法

取待测溶液2mL于离心管中，加入80μ二氧化硫吸收溶液摇匀，后加入0.1mL氢氧化钠溶液摇匀，最后加入0.1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液摇匀，反应后用分光光度计测量溶液吸光度。

3 二氧化硫吸收液的选择

将100g/L甲醛溶液用去离子水稀释到50g/L，二氧化硫标准溶液100mg/L用去离子水稀释成5mg/L的二氧化硫使用液。分别取5mg/L的二氧化硫使用液2mL于3个离心管中，分别加入80μ二氧化硫吸收液50g/L甲醛溶液、50g/L的EDTA-2Na和三乙醇胺溶液摇匀，然后加入0.1mL氢氧化钠溶液摇匀，最后加入0.1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液摇匀，反应一定时间后用分光光度计测量溶液的吸光度。

从表1可以看出，用甲醛作为二氧化硫吸收液时，加入氢氧化钠和显色剂后溶液吸光度变化迅速，且5分钟后吸光度比较稳定、变化很小。因此，实验应选取甲醛溶液作为二氧化硫吸收剂，反应时间为5分钟。

4 用甲醛做二氧化硫吸收液，盐酸副玫瑰苯胺法测定二氧化硫浓度的实验中溶液吸光度影响因素研究。

4.1 氢氧化钠浓度对溶液吸光度的影响

分别取5mg/L的二氧化硫使用液2mL于7个离心管中，每管加入80μ 50g/L的甲醛溶液，摇匀后分别加入0.5mol/L、1mol/L、1.5mol/L、2mol/L、3mol/L、4mol/L、5mol/L的氢氧化钠溶液0.1mL，摇匀，最后加入0.1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液摇匀，反应5分钟后用分光光度计测量溶液吸光度。

从图1可以看出，溶液吸光度在开始阶段随着氢氧化钠浓度的增加而增加，当氢氧化钠浓度增加到2mol/L后继续增加氢氧化钠溶液吸光度变化很小，当氢氧化钠溶液浓度增加到3mol/L后溶液吸光度随着氢氧化钠浓度的增加急剧下降。因此，实验选择氢氧化钠浓度为2mol/L。

4.2 吸收液甲醛濃度对溶液吸光度的影响

将100g/L甲醛溶液用去离子水分别稀释成5g/L、10g/L、25g/L、50g/L、80g/L、100g/L的甲醛使用液备用。分别取5mg/L的二氧化硫使用液2mL于6个离心管中，分别加入80μ上述甲醛使用液，摇匀后加入2mol/L的氢氧化钠溶液0.1mL摇匀，最后加入0.1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液摇匀，反应5分钟后用分光光度计测量溶液吸光度。

从图2可以看出，溶液吸光度于开始阶段随着甲醛溶液浓度的增加而增加，甲醛溶液浓度增加到25g/L后溶液吸光度随着甲醛浓度的增加而缓慢下降。因此，实验时选择浓度为25g/L左右的甲醛溶液较好。

4.3 溶液吸光度与二氧化硫浓度的关系

将100mg/L的二氧化硫标准溶液用去离子水分别稀释成1mg/L、2.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L的二氧化硫使用液备用。分别取上述二氧化硫使用液2mL于6个离心管中，均加入25g/L的甲醛使用液80μ，摇匀后加入2mol/L的氢氧化钠溶液0.1mL摇匀，最后加入0.1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液摇匀，反应5分钟后用分光光度计测量溶液吸光度。endprint

从图3可以看出，溶液吸光度随溶液中二氧化硫浓度的增加而增加，且线性拟合度很好。

5 结论

实验表明，甲醛溶液作为二氧化硫吸收剂时加入氢氧化钠和显色剂后溶液吸光度升高较快，且反应5分钟后吸光度变化很小，比较稳定。

甲醛吸收液浓度为25g/L、氢氧化钠溶液浓度为2mol/L时，加入盐酸副玫瑰苯胺溶液后溶液吸光度升高较快，反应5分钟后吸光度较稳定，且溶液吸光度随着二氧化硫浓度的增加线性拟合度很好。

参考文献：

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