抗-HCV-IgG 抗体及血清HCV RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值*

王伟 葛亮 居朝霞

抗-HCV-IgG 抗体及血清HCV RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值*

王伟 葛亮 居朝霞

目的 探讨抗-HCV-IgG抗体与血清HCV RNA应用于丙型肝炎诊断中的临床价值。方法 选择2014年10月～2016年10月检验科收集的114例丙型肝炎待查者的血清标本，采用酶联免疫吸附法（ELISA）对抗-HCV-IgG抗体进行检测，同时采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）对HCV RNA载量进行检测。统计所有标本抗-HCV-IgG抗体、HCV RNA检测结果。结果 采用ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率为25.44%（29/114）；采用荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率为27.19%（31/114）。31例HCV RNA阳性标本中抗-HCV-IgG阳性标本有26例，符合率为83.87%（26/31）。ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率与荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率的差异无统计学意义（P＞0.05）。伴随HCV RNA病毒载量的不断增多，抗-HCV-IgG阳性抗体检出率明显提高；不同HCV RNA病毒载量的相邻区间的抗-HCV-IgG阳性抗体检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 ELISA检测抗-HCV-IgG抗体和荧光定量PCR检测HCV RNA应用于丙型肝炎诊断均具有一定的临床价值，血清HCV RNA病毒载量是判断HCV感染的重要依据，能够有效反映病毒活动性及复制程度，然而单一的抗-HCV-IgG抗体、HCV RNA检测尚存在局限性，易出现漏诊，两者联合检测可显著提高丙型肝炎检出率，做到早诊断、早治疗，提高临床疗效。

抗-HCV-IgG抗体 HCV RNA 丙型肝炎 诊断 临床价值

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引发的病毒性肝炎疾病，会导致机体肝脏慢性炎症坏死及纤维化，最终造成肝硬化或癌变，对患者生命健康造成严重威胁，所以需尽早诊断和治疗[1]。近年来随着检验技术的不断发展，丙型肝炎检查方法已逐渐完善[2]。目前对丙型肝炎主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）及聚合酶链反应（PCR），前者用于检测血清中HCV核心抗体，后者用于监测HCV RNA[3，4]。为探究抗-HCV-IgG 抗体以及血清HCV RNA在诊断丙型肝炎中的价值，本研究对收治的丙型肝炎患者的血清标本，采用ELISA法对抗-HCV-IgG 抗体进行检测，并采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测HCV RNA载量，为临床丙型肝炎诊断提供依据。

资料与方法

1 一般资料 选择2014年10月～2016年10月检验科收集的114例丙型肝炎待查者的血清标本，其中男60例，女54例；年龄25～75岁，平均年龄（54.27±5.44）岁。所有患者均通过2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会联合肝病学修订的《病毒性肝炎防治方案》标准确诊为丙型肝炎。排除标准：其他类型的病毒性肝炎者；存在可能造成肝功能异常的疾病者。

2 方法

2.1 标本采集：取患者清晨空腹静脉血3 ml，室温环境下静置20 min后待其自然凝固，然后1500 r/min离心10 min，取上层血清，转移至离心管，用于检测HCV RNA，剩余血清用于检测抗-HCVIgG，均置于-20℃冰箱内待测。

2.2 检测方法：采用ELISA法检测血清中HCV抗体，在微孔板条预包被基因表达的HCV抗原，与血清中抗-HCV-IgG抗体反应，然后加入辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG的酶标记抗体与其结合，最后用3，3'，5，5'-四甲基联苯胺作用显色。采用实时荧光定量PCR检测HCV RNA，试剂盒最低检出量为250 IU/mL，线性范围在（1.0×103～1.0×107）IU/mL，均严格根据试剂盒说明书操作。

3 统计学处理 应用SPSS 20.0 软件对数据进行统计分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

结 果

1 抗-HCV-IgG抗体与HCV RNA检测结果对比 采用ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率为25.44%（29/114）；采用荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率为27.19%（31/114）。31例HCV RNA阳性标本中抗-HCV-IgG阳性的标本有26例，符合率为83.87%（26/31）。ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率与荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率的差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 抗-HCV-IgG抗体与HCV RNA检测结果比较（n）

2 各个区间HCV RNA病毒载量与抗-HCV-IgG检出结果对比见表2。伴随HCV RNA病毒载量的不断增多，抗-HCV-IgG阳性抗体检出率明显提高；不同HCV RNA病毒载量的相邻区间的抗-HCVIgG阳性抗体检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表2 各个区间HCV RNA病毒载量与抗-HCV-IgG检出结果对比

讨 论

丙型肝炎病毒主要经血液传播，患者在感染初期通常无明显症状，部分患者甚至无症状产生，而病情进一步发展后会逐渐引发肝硬化甚至肝癌，造成患者死亡，因此早期精确诊断对于疾病治疗具有重要意义[5]。目前临床对丙型肝炎的诊断，除患者所表现出的症状、体征及肝功能检查外，血清病毒学检测是确诊丙型肝炎的重要依据[6]。绝大部分丙型肝炎患者的体内存在抗-HCVIgG，所以抗-HCV-IgG阳性能够作为HCV感染的标志，而HCV RNA阳性能够作为HCV感染直接判断依据，是反映HCV复制和传染性的直接指标，且对评估治疗丙型肝炎患者的疗效也具有重要价值[7]。因为丙型肝炎患者体内HCV RNA相比抗-HCV出现更早，所以HCV RNA能够作为早期筛查诊断的标准[8]。目前临床诊断HCV感染通常是检测抗-HCV-IgG及HCV RNA，相关研究表明，若单纯凭借抗-HCV-IgG进行诊断易发生较高的误诊率，会耽误最佳治疗时机[9]。

本研究对丙型肝炎患者的抗-HCV-IgG及HCV RNA阳性率进行检测，结果显示，采用ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率与采用荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率分别为25.44%和27.19%，差异无统计学意义（P＞0.05）。HCV RNA阳性标本中抗-HCV-IgG阳性的标本有26例，符合率为83.87%。且伴随HCV RNA病毒载量的不断增多，抗-HCV-IgG阳性抗体检出率明显提高；不同HCV RNA病毒载量的相邻区间的抗-HCV-IgG阳性抗体检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。表明抗-HCV-IgG抗体检测在HCV RNA浓度较高的标本中更易被检测出。本研究中出现3例抗-HCVIgG阳性且HCV RNA阴性患者，分析其原因可能有以下几点：①此类患者过往存在HCV感染史，但在检测时体内并无HCV，机体处于恢复期，所以HCV RNA检测结果为阴性；但抗-HCV-IgG抗体却一直存在于患者体内[10]。②在检测时患者正处于丙型肝炎晚期，体内HCV RNA水平较低，难以被检测出，机体内病毒水平的降低与肝细胞被显著消耗及纤维化相关[11]。③实验操作误差所致。因此抗-HCV-IgG阳性且HCV RNA阴性结果并不具有准确性，需要进一步随访。此外，本研究中有5例抗-HCV-IgG阴性且HCV RNA阳性患者。其原因可能为丙型肝炎患者自身机体免疫力下降，或由于病毒复制不活跃，从而抗体产生量较少；也可能是患者正处于HCV感染的窗口期，因为机体在感染后通常在6～12周后才会形成抗-HCV抗体。所以当抗-HCV-IgG为阴性时并不能表示未感染[12，13]。采用FQ-PCR检测HCV RNA载量的灵敏度及特异度较高，且发生污染的概率较低，所以用于临床诊断具有较大意义。但FQPCR检测阴性无法完全排除患者感染HCV，所以临床应结合抗-HCV-IgG检测更具有准确性[14，15]。

ELISA检测抗-HCV-IgG抗体和荧光定量PCR检测HCV RNA应用于丙型肝炎诊断均具有一定的临床价值，血清HCV RNA病毒载量是判断HCV感染的重要依据，能够有效反映病毒活动性及复制程度，然而单一的抗-HCV-IgG抗体、HCV RNA检测尚存在局限性，易出现漏诊现象，两者联合检测可显著提高丙型肝炎检出率，做到早诊断、早治疗，为提高临床疗效提供价值。

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2 史咏梅，冯子力，伍碧梅，等.出入境人员丙型肝炎病毒感染者miRNA-122表达变化研究[J].检验医学与临床，2016，13（6）：738-740.

3 任宪辉，姚冬杰，张洋.丙型肝炎患者HCV-RNA感染与血清自身抗体的相关性分析[J].国外医学（医学地理分册），2016，37（2）：131-133.

4 Costantino A，Spada E，Equestre M，et al.Naturally occurring mutations associated with resistance to HCV NS5B polymerase and NS3 protease inhibitors in treatment-na?ve patients with chronic hepatitis C[J].Virology journal，2015，12（1）：186.

5 周琳，吴琼海，沈伟伟，等.浙江省台州市新报告成年HIV感染者中HCV合并感染研究[J].中华流行病学杂志，2015，36（8）：862-866.

6 王江南，陈秀荣，李健.ELISA法检测抗-HCV-IgG抗体以及FQ-PCR检测血清HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值[J].广东医学，2015，36（24）：3797-3801.

7 吴青，徐万洲，李艳.湖北某三甲医院就诊患者血清HCV大样本流行病学调查[J].中国感染控制杂志，2016，15（2）：106-107.126.

8 Walker DR，Pedrosa MC，Manthena SR，et al.Early View of the Effectiveness of New Direct-Acting Antiviral （DAA）Regimens in Patients with Hepatitis C Virus （HCV）.[J].Advances in therapy，2015，32（11）：1117-1127.

9 陕柏峰，张剑英，张柳明，等.双抗原夹心法检测抗丙型肝炎病毒抗体的应用研究[J].山西医药杂志，2016，45（16）：1940-1941.

10 刘鹏，陈红，徐炜.间接免疫荧光法检测丙型肝炎抗体阳性献血者血清自身抗体谱出现特征[J].实验与检验医学，2016，34（3）：360-362.

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13 刘冰，曾赤佳.抗-HCV、HCV-cAg 及 HCV RNA 联合检测在吸毒人员筛查的临床意义[J].国际检验医学杂志，2017，38（2）：271-272.

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15 聂静敏，胡凤玉，许敏，等.丙型肝炎患者抗病毒治疗后外周血单个核细胞内病毒 RNA 的检测及其与疗效的关系[J].中华传染病学杂志，2016，34（3）：156-159.?

Anti-HCV-RNA Antibody and Serum HCV-RNA in the Diagnosis of Hepatitis C

WANG Wei，GE Liang，JU Zhaoxia. Department of Clinical Laboratory, Jiangsu Provincial Lenter for Disease Control and Prevention, nanjing Jiangsu,210028

Objective To investigate the clinical value of anti-HCV-IgG antibody and serum HCV-RNA in the diagnosis of hepatitis C. Methods The serum samples of 114 patients with hepatitis C were collected from October 2014 to October 2016，the anti-HCV-RNA antibody was detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA），and the HCV-RNA load was detected by fluorescence quantitative polymerase chain reaction （PCR）.Statistics of all specimens of anti-HCV-RNA antibody，HCV-RNA data. Results The positive rate of anti-HCV-IgG was 25.44% （29/114）by ELISA.The positive rate of HCV-RNA was 27.19% （31/114）by fluorescence quantitative PCR. anti-HCV-IgG positive specimens of 26 cases were detected from 31 cases of HCV-RNA positive specimens，the coincidence rate of 83.87% （26/31）.There was no significant difference in detection positive rate between anti-HCV-IgG antibody by ELISA and HCV-RNA by fluorescence quantitative PCR （P＞ 0.05）. With the increase of HCV-RNA viral load，the detection rate of anti-HCVIgG positive antibody was significantly increased. There was no significant difference in the detection rate of anti-HCV-IgG antibody positive in the adjacent region of different HCV-RNA viral load （P＞ 0.05）.Conclusion ELISA to detect anti-HCV-RNA antibody and fluorescence quantitative PCR detection of HCV-RNA in the diagnosis of hepatitis C have a certain clinical value，serum HCV-RNA viral load is an important basis for judging the infection of hepatitis C virus，which can But a single anti-HCV-RNA antibody，HCV-RNA detection is still limited，prone to misdiagnosis phenomenon，the combination of the two can significantly improve the detection rate of hepatitis C virus infection，Do early diagnosis，early treatment，to provide value for improving clinical efficacy.

Anti-HCV-IgG antibody HCV-RNA Hepatitis C Diagnosis Clinical value

R512.6+3 R446.11

A

1671-2587（2017）06-0602-04

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.06.021

*本课题受无锡市医院管理中心科研项目（No.YGZXH14010）资助

210028 江苏省疾病预防控制中心检验科（王伟）；江苏省中西医结合医院检验科（葛亮）；江苏省无锡市第五人民医院传染科（居朝霞）

王伟（1986–），女，江苏南京人，主管技师，学士，主要从事免疫学工作，（E-mail）wer09w@163.com。