乙肝血清标志物联合HBV DNA检测在HBV感染诊断中的应用研究

韩峰，郑正茂

（上饶市第二人民医院，江西 上饶 334000）

--临床研究--

乙肝血清标志物联合HBV DNA检测在HBV感染诊断中的应用研究

韩峰，郑正茂

（上饶市第二人民医院，江西 上饶 334000）

目的探讨乙肝血清标志物联合乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)DNA检测在HBV感染诊断中应用价值。方法 选择乙肝患者142例，均采集空腹静脉血进行检测，根据HBV水平分为A、B、C组，观察并记录HBV DNA和HBV血清标志物（包括抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc、HBsAg）的含量。结果A组HBV DNA阳性率为96.77%（30/31），B组HBV DNA阳性率为60.42%（29/60），C组HBV DNA阳性率为5.88%（3/51），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）；与C组比较，A组和B组HBV DNA定量结果明显提高，差异有统计学意义（P＜0.05）；HBV DNA检出符合率为73.94%（105/142），HBsAg检出符合率为72.54%（103/142），两者比较差异无统计学意义。结论 对HBV感染患者实施乙肝血清标志物联合HBV DNA检测，能起到互补作用，提高诊断准确率，为临床治疗HBV感染提供可靠的参考依据。

血清标志物；乙肝病毒；HBV DNA

乙肝是临床常见的一种传染性疾病，据统计，慢性乙型肝炎病毒感染者在全球范围内约有2.4亿人，其中死于HBV感染相关并发症的人数高达78万，对人类健康造成严重的威胁[1]。HBV DNA定量检测和HBV血清学标志物检测是目前判断和诊断HBV传染性及传染程度的常用手段。血清学标志物检测方法简单快速，在大批量的乙肝病毒筛查中应用较为广泛，但却无法反映HBV DNA复制情况[2]。HBV DNA定量检测能直接反映HBV是否存在、监测HBV DNA复制情况，在诊断乙肝的突变株方面具有明显的优势，同时能帮助临床预测不同时期乙肝的感染[3]。本研究选择本院门诊接诊的部分乙肝患者为研究对象，分析乙肝血清标志物联合HBV DNA检测在HBV感染诊断中应用价值。现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2015年3月～2016年8月在本院门诊就诊的乙肝患者142例，其中男92例，女50例；年龄10～73岁，平均年龄（38.65±4.88）岁。根据HBV水平分为3组，其中HBsAg、抗HBc阳性、HBeAg为A组（31例）；HBsAg、抗HBc阳性、抗HBe阳性为B组（60例）；抗-HBe、抗-HBs、抗-HBc阳性，抗-HBc、抗-HBs阳性，抗-HBc、抗-HBe阳性，抗-HBs阳性，抗-HBc阳性，全阴性以及HBsAg等为C组（51例）。

1.2 方法 采集所有患者空腹静脉血，将其进行3 h的静置，离心，取血清，随后保存在-20℃环境下待测。选用上海博耀生物科技有限公司提供的乙型肝炎血清标志物ELISA定性试剂盒进行检测，严格按照其说明书进行操作和判断结果。在100μL DNA浓缩液中加入100μL血清，混匀后，离心弃上清。将20μL HBV DNA提取液加入管底沉淀中，将其充分混匀后。进行10 min的恒温煮沸，离心取上清备用；将标准品和处理后的样品各2μL加入PCR反应管，离心30 s后，将其放置于仪器样品槽，并对其反应参数进行相应设置，读取荧光值。

1.3 观察指标 观察并记录HBV DNA和HBV血清标志物（包括抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc、HBsAg）的含量。HBV DNA定量检测的判断标准：HBV DNA浓度＜5.0 lg copies/mL为阴性，≥5.0 lg copies/mL为阳性。血清学标志物定量检测的判断标准：抗-HBe浓度＜0.3 PEIU/mL为阴性，≥0.3 PEIU/mL为阳性；抗-HBs浓度＜10.0 mIU/mL为阴性，≥10.0 mIU/mL为阳性；HBeAg浓度＜0.2 ng/mL为阴性，≥0.2 ng/mL为阳性；抗-HBc浓度＜0.9 PEIU/mL为阴性，≥0.9 PEIU/mL为阳性；HBsAg浓度＜0.5 PEIU/mL为阴性，≥0.5 PEIU/mL为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0统计学软件，计量资料采用“±s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，组间率（%）的比较采用Χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV DNA结果 A组HBV DNA阳性率为96.77%（30/31），B组HBV DNA阳性率为60.42%（29/60），C组HBV DNA阳性率为5.88%（3/51），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。与C组比较，A组和B组HBV DNA定量结果明显提高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 HBV DNA定量结果对比（±s，lg copies/mL）

表1 HBV DNA定量结果对比（±s，lg copies/mL）

注：与C组比较，aP＜0.05

组别A组B组C组例数3160 51 HBV DNA定量结果7.28±1.41a 4.39±1.38a 3.56±1.64

2.2 血清标志物和HBV DNA阳性率相比 在62例HBV DNA阳性标本中，检出HBsAg 59例，占95.16%；检出HBeAg 29例，占46.77%。两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。HBV DNA检出符合率为73.94%（105/142），HBsAg检出符合率为72.54%（103/142），两者比较差异无统计学意义，见表2。

表2 血清标志物和HBV DNA阳性率相比[n（%）]

2.3 HBV DNA在不同血清学模式下的测定结果 HBV DNA含量为2.7～5.0 lg copies/mL时，B组所占比例最高为59.26%；5.0～7.0 lg copies/mL时，以A组居多，占61.54%，其次为B组，占38.46%；＞7.0 lg copies/mL时，主要以A组多见，占85.71%，见表3。

表3 血清标志物和HBV DNA阳性率相比[n（%）]

3 讨论

医学研究显示，在机体受到HBV感染时会产生免疫杀伤的作用，HBV感染程度及其转归情况与免疫功能水平高低有密切联系，当机体免疫功能较差时，HBV DNA会出现复制，且呈持续性的分泌HBeAg；当患者病情好转或免疫功能较好时，HBV则不会复制，抗-HBe呈阳性，HBeAg呈阴性[4-5]。HBV DNA能准确、直接反映HBV的复制情况，而乙肝血清学标志物（抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc、HBsAg）则能较好反映出机体受到HBV感染时的免疫功能状态[6]。因而，临床将HBV DNA分子生物学检测和乙肝血清学标志物检测作为诊断HBV感染的重要手段。目前，临床常采用ELISA法对乙肝血清学标志物实施检测，具有价廉、快速、简便等优势，能有效判定患者是否受到HBV感染，但难以动态、及时的显示HBV传染性及复制情况[7]。HBV DNA目前常以荧光定量PCR予以检测，能有效避免乙肝血清学标志物出现的弊端。

本研究结果显示，A组HBV DNA阳性率为96.77%（30/31），B组HBV DNA阳性率为60.42%（29/60），C组HBV DNA阳性率为5.88%（3/51），可见HBV在HBeAg阳性患者体内的复制较为频繁，具有较好的传染性。在62例HBV DNA阳性标本中，检出HBsAg 59例（95.16%），检出HBeAg 29例（46.77%），表明HBV DNA阳性者大多携带HBsAg。HBsAg和HBV DNA检出符合率之间无明显的差异，表明HBV DNA含量与HBsAg值之间有一定的联系。HBV DNA在不同血清学模式下的测定结果显示，当HBV DNA含量＞7.0 lg copies/mL时，A组所占比例远高于其他两组，表明HBeAg水平与HBV DNA含量呈正相关。临床可通过对HBeAg检测，间接判断HBV传染和复制情况。本研究中，HBV DNA含量为5.0～7.0 lg copies/mL时，以A组居多，占61.54%，分析原因可能与HBV变异株有关。临床研究显示，HBV复制在患者体内HBV DNA含量＞5.0 lg copies/mL时最为活跃，当体内HBV DNA含量＜5.0 lg copies/mL时的患者感染状态较低[8]。因而，临床可在实施乙肝血清学标志物检测的同时定量检测HBV DNA，利于判断患者体内病毒复制情况。此外，HBV DNA定量检测在对乙肝患者抗病毒的诊治中能对血清学转换起到预测作用，有效判断外显型和隐匿性HBV的传染性、复制活跃程度及其药物疗效。

综上所述，对HBV感染患者实施乙肝血清标志物联合HBV DNA检测，能起到互补作用，提高诊断准确率，能为临床治疗HBV感染提供可靠的参考依据。

[1] 王海宁,李万顺,孙巨军.乙肝病毒血清标志物、外周血T淋巴细胞HBV-DNA的相关性分析[J].现代检验医学杂志,2016,31(4):113-116.

[2] 李惠军,吴斌,李彩东.HBV感染者HBV血清标志物水平与HBV DNA及肝功能的相关性[J].国际检验医学杂志,2016,37(6):784-786.

[3] 温小云,方先松,邱芳.乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA临床检验分析的应用价值探讨[J].当代医学,2016,22(3):63-64.

[4] 黄粱镔,张雄,龙欣,等.两种方法定量检测HBV异常血清标志物与血清HBV DNA水平的关系[J].浙江临床医学,2015,17(4):629-630.

[5] 张宝,李世龙,田珊红,等.河北唐山地区乙肝患者血清标志物七项与乙型肝炎病毒DNA定量的对比研究[J].医学综述,2014,20(20):3793-3796.

[6] 朱珉之,杭双熊,申红玉.乙肝病毒携带产妇血清标志物模式与血清及乳汁HBV-DNA相关性研究[J].海南医学,2014,25(13):1958-1960.

[7] 蒋莉,陈春华,濮翔科.分析HBsAg与抗-HBs双阳患者血清模式与HBV DNA载量的临床意义[J].当代医学,2016,22(17):4-45.

[8] 胡静,卢本亮,梁冰,等.乙肝病毒血清标志物与HBV-DNA定量同步检测的应用价值[J].江苏医药,2013,39(2):225-226.

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.34.023