山西省部分牛场牛病毒性腹泻和牛传染性鼻气管炎血清抗体检测与分析

李 颖,顾盼盼,梁 睿,宁 艳,孙 杰,雷宇平,马海利

(1. 山西农业大学动物科技学院,山西太谷 030801;2. 山西省动物疫病预防控制中心,山西太原 030027)

山西省部分牛场牛病毒性腹泻和牛传染性鼻气管炎血清抗体检测与分析

李 颖1,顾盼盼1,梁 睿1,宁 艳2,孙 杰2,雷宇平2,马海利1

(1. 山西农业大学动物科技学院,山西太谷 030801;2. 山西省动物疫病预防控制中心,山西太原 030027)

为了解牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(BHV-1)在山西省的感染及分布情况,采用ELISA方法,对2014-2016年采自山西省11个市养殖场(户)的900份牛血清样品进行了BVDV及BHV-1抗体检测.结果显示:采集血清养殖场(户)的BVDV、BHV-1血清抗体阳性率分别为56.57%、40.33%,群阳性率分别为71.21%、59.09%;quot;BVDV+ BHV-1quot;血清抗体阳性率为31.56%,群阳性率为46.97%;大同、朔州、忻州、阳泉、晋中、长治和临汾7个市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均大于50%,大同、忻州、太原、阳泉和临汾5个市养殖场(户)的BHV-1血清抗体阳性率均大于50%,而运城市的BVDV和BHV-1血清抗体均为阴性.结果表明,除运城市外,山西省其他市均存在BVDV和BHV-1感染的养殖场(户).

牛病毒性腹泻;牛传染性鼻气管炎;酶联免疫吸附试验;抗体;检测

牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrheavirus,BVDV)引起的一种牛高度接触性传染病,以腹泻、流产、黏膜溃烂等为主要特征[1],1946年首次在美国奶牛中被发现和报道,现已广泛分布于世界各地.随着我国养牛业的发展、国外品种的引入[2],我国养牛业较发达地区均存在BVDV感染,且感染率有不断上升趋势.

牛传染性鼻气管炎(Infective bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛疱疹病毒I型(Bovine herpesvirus-1,BHV-1)引发的一种牛接触性传染病,以鼻气管炎、结膜炎、生殖道炎、脑膜炎、乳房炎等为特征[3],1955年在美国首次被报道.目前,本病除在澳大利亚、丹麦、芬兰、挪威、瑞典、瑞士已被根除外[4],在全球其他国家均有不同程度流行,且感染率较高.1980年我国首次从新西兰进口的奶牛中发现该病[5].随后血清学调查显示,我国大部分省市的各种牛群中均存在BHV-1感染,且感染率有逐年上升趋势[6].

随着我国养牛业的不断发展,BVDV和BHV-1感染率不断增高,且两种病毒的混合感染率亦在增加.BVDV和BHV-1感染给我国养牛业造成了巨大经济损失.为了掌握BVD和IBR在山西省的存在、分布及流行情况,利用ELISA方法,对山西省11个市的牛血清样品进行了BVD及IBR抗体检测,从而为山西省制定BVD和IBR防控措施提供依据.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 待检牛血清.2014-2016年在大同、朔州、忻州、吕梁、太原、晋中、阳泉、长治、晋城、临汾、运城11个市的规模化养殖场(户),每年每市采集2个养殖场(户),共采集900份牛血清.采血牛均未接种过BVD和IBR疫苗.

1.1.2 ELISA检测试剂盒.牛病毒性腹泻病毒抗体检测试剂盒和牛传染性鼻气管炎病毒gB抗体检测试剂盒:均购自北京爱德士元亨生物科技有限公司.

1.1.3 主要仪器及设备.酶标仪:购自美国伯腾仪器有限公司;恒温培养箱:购自哈尔滨东联电子技术开发有限公司;其他器材和试剂:由山西农业大学动物科技学院动物传染病学实验室提供.

1.2 方法

1.2.1 抗体检测.按照牛传染性鼻气管炎病毒gB抗体检测试剂盒和牛病毒性腹泻病毒抗体检测试剂盒说明书检测.

1.2.2 结果判定与标准.BVDV血清抗体结果判定与标准:当及0.150时,说明实验结果有效,计算S/P值.S/P=(样品S/Plt;0.20为阴性,0.20≤S/Plt;0.30为可疑,S/P≥0.3为阳性.BHV-1血清抗体结果判定与标准:当≥0.500及阻断率gt;80%时,说明实验结果有效,计算阻断率.阻断率样品A450)阻断率lt;45%为阴性,45%≤阻断率lt;55%为可疑,阻断率≥55%为阳性.

2 结果

2.1 血清抗体总体检测

2014-2016年采集牛血清养殖场(户)的BVDV与BHV-1抗体阳性率分别为56.67%、40.33%,且quot;BVDV+ BHV-1quot;血清抗体均为阳性的占31.56% ;除运城市外,其他10个市养殖场(户)的牛血清中均有BVDV、BHV-1阳性抗体被检出,其中大同、朔州、忻州、阳泉、晋中、长治和临汾7个市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均大于50%,大同、忻州、太原、阳泉和临汾5个市养殖场(户)的BHV-1血清抗体阳性率均大于50%(表1). 2014-2016年采集牛血清养殖场(户)的BVDV、BHV-1血清抗体群阳性率分别为71.21%、59.09%,且quot;BVDV+ BHV-1quot;血清抗体群阳性率为46.97%(表2).检测结果表明,除运城市外,山西省其他市被调查牛群中均有不同程度的BVDV和BHV-1感染.

2.2 2014年血清抗体检测

2014年山西省大同、朔州、阳泉、晋中、长治、临汾和晋城7个市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均大于50%,且大同、长治、临汾3个市的BVDV血清抗体阳性率均为100%,而运城市和太原市的BVDV血清抗体为阴性;大同、朔州、阳泉和临汾4个市养殖场(户)的BHV-1血清抗体阳性率均大于50%,且临汾市的quot;BVDV+BHV-1quot;血清抗体阳性率达100%,而运城市和长治市的BHV-1血清抗体均为阴性(表3).

表1 2014-2016年山西省11个市牛养殖场(户)BVDV与BHV-1血清抗体检测结果

表2 2014-2016年山西省11个市牛养殖场(户)BVDV与BHV-1血清抗体阳性群统计

表3 2014年山西省11个市牛养殖场(户)BVDV与BHV-1血清抗体检测结果

2.3 2015年血清抗体检测

2015年忻州、太原、阳泉和临汾4个市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均大于50%,且忻州市的阳性率为100%,而运城市的为阴性;忻州、太原和阳泉3个市养殖场(户)的BHV-1血清抗体阳性率均大于50%,且太原市的阳性率达100%;忻州市和太原市养殖场(户)的quot;BVDV+BHV-1quot;血清抗体阳性率均大于50%,而大同、晋中、临汾和运城4个市养殖场(户)的BHV-1血清抗体均为阴性(表4).

表4 2015年山西省11个市牛养殖场(户)BVDV与BHV-1血清抗体检测结果

2.4 2016年血清抗体检测

2016年大同、朔州、忻州、阳泉、晋中、吕梁、长治、临汾和晋城9个市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均大于50%,且晋中、长治、临汾3个市的阳性率均为100%,而运城市的为阴性;大同、忻州、阳泉、晋中、长治和临汾6个市养殖场(户)的BHV-1血清抗体阳性率均大于50%,且长治市的阳性率达100%;忻州、阳泉、晋中、长治和临汾5个市养殖场(户)的quot;BVDV+ BHV-1quot;血清抗体阳性率均大于50%,而太原、晋城和运城3个市的BHV-1血清抗体均为阴性(表5).

表5 2016年山西省11个市牛养殖场(户)BVDV与BHV-1血清抗体检测结果

3 讨论

近年来,随着山西省养殖业结构调整和养牛业不断发展,奶牛和黄牛的养殖数量不断增加,牛传染性疾病也在不断增多,对山西省养牛业健康发展构成的威胁不断加大.本次调查发现,2014-2016年山西省11个市所调查养殖场(户)的BVDV和BHV-1血清抗体平均阳性率分别为56.67%和40.33%.该结果低于山西省之前的报道.如:2013年张改文等[7]报道太原市460头奶牛BVD抗体平均阳性率为63.5%;2010年王永艳等[8]调查的山西省雁门关地区IBR血清抗体平均阳性检出率为49.60%.但与山西省省周边省份的报道结果差异不明显.如:1998年邱昌庆等[9]报道山东、河北和河南等省份牛场BVD血清平均阳性率为46%～65%;2013年童钦等[10]报道内蒙古3个地区BVD血清阳性率为58.35%.2011年邹世颖等[11]调查的BHV-1血清阳性率为山东省46%、河北省28%、河南省86%、内蒙古自治区58%、新疆自治区68%、北京市40%.由于每年采集的养殖场数量及血清样品数量有限,也未进行采样设计,因此检测结果并不能真实反映该地区的实际情况,导致出现与其他报道结果的差异.

除运城市外,山西省其他10个市均有BVDV、BHV-1抗体阳性牛和阳性群被检出.这表明山西省大多数市存在BVDV和BHV-1感染的养殖场(户).其中,大同、朔州、忻州、阳泉、晋中、长治和临汾7个市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均大于50%,大同、忻州、太原、阳泉和临汾5个市的BHV-1血清抗体阳性率均大于50%.造成山西省各市养殖场(户)BVDV和BHV-1感染率差异的主要原因可能有3个方面:第一,山西省养牛业大部分为规模化养殖,且BVDV和BHV-1多呈隐性感染如果有1头牛被感染,就可能波及整个牛群.第二,山西省各市的气候状况存在差异.气候环境和饲养管理水平不同,牛的抗病能力就会有差异.第三,持续感染牛(Persistently infected,PI)呈带毒状态,会不断向外排毒[12].这是造成牛群内BVDV和BHV-1难以根除的重要原因.

2014、2015和2016年山西省11个市养殖场(户)的BVDV抗体平均阳性率分别为61.33%、41.00%和67.67%,BHV-1抗体平均阳性率分别为42.67%、31.67%和46.67%,且每年各市养殖场(户)阳性率的变化趋势也不同.这可能与每年的牛血清来源不同有关.虽然每年采血的市区相同,但采样牛场有所不同.

每年各市养殖场(户)的BVDV血清抗体阳性率均比BHV-1血清抗体阳性率高,且BVDV和 BHV-1血清抗体均为阳性的占31.56%.这说明所调查养殖场(户)的BVDV和BHV-1混合或继发感染率较高.其原因可能是牛感染BVDV后机体抵抗力下降,从而引起BHV-1的混合或继发感染[13].

4 结论

综上所述,山西省大部分市存在BVDV和BHV-1感染的牛养殖场(户),且不同市养殖场(户)的感染率也不相同.因此,要保障养牛业的健康和持续发展,需要通过检疫来防止引进隐性感染牛,通过监测来清除持续感染牛,通过疫苗免疫来降低牛易感性,通过消毒来防止疫病传播.

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(责任编辑:朱迪国)

Serum Antibody Detection and Analysis on BVD and IBR in Some Farms of Shanxi Province

Li Ying1,Gu Panpan1,Liang Rui1,Ning Yan2,Sun Jie2,Lei Yuping2,Ma Haili1
(1. College of Animal Science Technology,Shanxi Agricultural University,Taigu,Shanxi 030801;2. Shanxi Animal Disease Prevention and Control Center,Taiyuan,Shanxi 030027)

To investigate the infection and distribution of Bovine viral diarrhea virus(BVDV)and Bovine herpesvirus-1(BHV-1)in Shanxi Province,the antibody of BVDV and BHV-1 was detected by ELISA towards 900 bovine serum samples collected from the large-scaled farms (households)in 11 cities of Shanxi Province from 2014 to 2016. Results showed that the positive rates of serum antibody of BVDV and BHV-1 were 56.57% and 40.33%,the group positive rates were 71.21% and 59.09%,respectively. The positive rates of serum antibody against quot;BVDV+BHV-1quot;was 31.56%,and the positive rate of herd level was 46.97%. The positive percentage of serum antibody against BVDV was over 50% in the farms(households)in 7 cities of Datong,Shuozhou,Xinzhou,Yangquan,Jinzhong,Changzhi and Linfen. The positive percentage of serum antibody against BHV-1 was over 50% in the farms(households)in 5 cities of Datong,Xinzhou,Taiyuan,Yangquan and Linfen,while the serum antibodies against BVDV and BHV-1 were both negative in Yuncheng city. The results showed that there were farms(households)with BVDV and BHV-1 infections in all of the cities of Shanxi Procince,except for Yuncheng City.

BVD;IBR;ELISA;antibody;detection

S851.3

A

1005-944X(2017)12-0015-06

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.12.004

山西省科技攻关资助项目(20130311028-1)

马海利