2014－2016年安徽省滁州市儿童医院临床分离菌耐药性监测

徐添天， 谢瑞玉

2014－2016年安徽省滁州市儿童医院临床分离菌耐药性监测

徐添天， 谢瑞玉

目的了解安徽省滁州市儿童医院2014年1月－2016年12月常见病原菌的临床分布及耐药情况。方法回顾性分析2014年1月－2016年12月从各类临床标本中分离菌的分布及耐药性。结果3年间共分离细菌1 057株，其中革兰阳性菌479株（45.3%）； 革兰阴性菌578株（54.7%）。排名前5位的细菌分别是：大肠埃希菌（19.6%）、金黄色葡萄球菌（15.9%）、克雷伯菌属（14.4%）、凝固酶阴性葡萄球菌（12.6%）和肺炎链球菌（9.1%）。肺炎链球菌对青霉素均敏感。葡萄球菌属中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为29.8%和74.4%。葡萄球菌属对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素均敏感。肠球菌属中屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌产超广谱β内酰胺酶菌株的检出率分别为50.2%、32.4%和83.3%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类最敏感，485株肠杆菌科细菌检出12株（2.5%）耐碳青霉烯类的肠杆菌科细菌。铜绿假单胞菌和不动杆菌属对碳青霉烯类最敏感。结论近3年临床分离菌以革兰阴性菌为主，细菌耐药情况较为严峻，应加强对其耐药性监测。

儿童； 耐药性； 抗菌药物 ； 超广谱β内酰胺酶

近年来，细菌耐药问题已成为医疗领域共同关注的公共卫生问题之一。由于细菌的耐药性存在地域差异，及时了解本地区临床分离细菌耐药情况对抗感染治疗具有现实意义。现将安徽省滁州市第一人民医院附属儿童医院2014－2016年分离的1057株细菌分布及其耐药结果进行总结，为临床治疗提供参考依据，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1菌株来源 收集本院附属儿童医院2014年1月－2016年12月的临床分离菌株1 057株（剔除同一患儿同一部位的重复菌株）。

1.1.2试剂和仪器 细菌鉴定和药敏卡购自德国西门子公司，药物纸片购自英国的OXOID公司，E试验条购自法国生物梅里埃公司，药敏试验用的MH琼脂培养基购自郑州安图生物工程股份有限公司，MicroScan WalkAway 96 PLUS购自德国西门子公司。

1.2 方法

1.2.1菌株鉴定及药敏试验 采用MicroScan Walk Away 96 PLUS微生物鉴定仪及配套的检测卡对临床分离株进行鉴定和药敏试验。补充药敏试验（头孢曲松、头孢唑林和厄他培南）采用纸片扩散法，质控菌株为金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212、流感嗜血杆菌ATCC49247和肺炎链球菌ATCC49619。药敏试验结果判断根据CLSI 2015判断标准[1]。

1.2.2甲氧西林耐药葡萄球菌（MRS）和产ESBL

株的检测 MicroScan WalkAway 96 PLUS微生物鉴定仪根据鉴定和药敏结果自动判断MRS和产ESBL的肠杆菌科细菌。

1.2.3肺炎链球菌的青霉素E试验 用苯唑西林纸片测定，当抑菌圈直径≥20 mm时为青霉素敏感的肺炎链球菌；当抑菌圈直径≤19 mm时，用青霉素E试验测其MIC值，按CLSI 2015脑膜炎与非脑膜炎肺炎链球菌的标准，分别判定两者敏感、中介和耐药株。

1.2.4统计分析 实验结果统计分析使用WHONET 5.6软件。

2 结果

2.1 细菌分布

2014－2016年共收集临床非重复菌株1 057株，其中革兰阳性菌479株（45.3%）； 革兰阴性菌578株（54.7%）；住院患者分离株占98.3%，门诊患者分离株占1.7%。菌株主要来源于痰液、血液、尿液和分泌物，分别为755株（71.4%）、155株（14.7%）、76株（7.2%）和26株（2.5%）。痰液标本中分离菌主要为大肠埃希菌166株（22.0%）、金葡菌155株（20.5%）、肺炎克雷伯菌133株（17.6%）和肺炎链球菌94株（12.5%）；血液标本中分离菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌114株（73.5%）、屎肠球菌9株（5.8%）、大肠埃希菌5株（3.2%）和粪肠球菌4株（2.6%）；尿液标本中分离菌主要为大肠埃希菌28株（36.8%）、屎肠球菌26株（34.2%）、粪肠球菌5株（6.6%）和肺炎克雷伯菌3株（3.9%）。主要菌株分布见表1。

表12014 －2016年临床分离菌株的分布Table 1 Distribution of clinical isolates during the period from 2014 to 2016

表1 （续）Table 1（continued）

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率

2.2.1葡萄球菌属 葡萄球菌属中MRSA和MRCNS的检出率分别为29.8%和74.4%。金葡菌中MRSA和MSSA对莫西沙星、达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全敏感，MRSA对其余监测药物的耐药率明显高于MSSA；凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS和MSCNS对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素均敏感，MRCNS对其余监测药物的耐药率明显高于MSCNS。见表2。

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus strains to antimicrobial agents（%）

2.2.2肠球菌属 67株肠球菌属细菌中屎肠球菌41株，占61.2%；粪肠球菌21株，占31.3%；其他肠球菌5株，占7.5%。肠球菌属中未检出耐万古霉素菌株。屎肠球菌对高浓度链霉素、达托霉素、利奈唑胺和万古霉素敏感率均为100%，对氨苄西林、青霉素、红霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、四环素和利福平耐药率均＞90%；粪肠球菌对氨苄西林、青霉素、达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全敏感。药敏结果见表3。

2.2.3肺炎链球菌 共分离肺炎链球菌96株，全部为青霉素敏感株，对左氧氟沙星、利奈唑胺和万古霉素全敏感，对红霉素和克林霉素的耐药率均为95.6%，对甲氧苄啶-磺胺甲唑的耐药率也达82.3%。

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

2.3.1肠杆菌科细菌 大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌中产ESBL菌株的检出率分别为50.2%、32.4%和83.3%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBL株。碳青霉烯类耐药肠杆菌（CRE）定义为对亚胺培南、美罗培南和厄他培南中任一种药物耐药者。本次监测中共检出12株CRE，检出率为2.5%，CRE对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素的敏感率分别为75.0%、58.3%和50.0%，对左氧氟沙星和环丙沙星的敏感率均为58.3%，对甲氧苄啶-磺胺甲唑的敏感率为58.3%，对四环素的敏感率为41.7%。肠杆菌科细菌的药敏结果见表4。2.3.2不发酵糖革兰阴性杆菌 不动杆菌属细菌对亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星和甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感率均为97.1%，对氨基糖苷类抗菌药物的敏感率均大于90%。铜绿假单胞菌除对头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星和妥布霉素的耐药率均＜10%，对哌拉西林的耐药率率为15.6%，对其余所测抗菌药物全敏感。药敏结果见表5。

表3 肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterococcus species to antimicrobial agents（%）

3 讨论

本次监测结果显示，2014－2016年本院共分离出非重复菌株1 057株，其中革兰阳性菌479株（45.3%）； 革兰阴性菌578株（54.7%）。从菌株的分布看，排在前5位的细菌分别是大肠埃希菌（19.6%）、金葡菌（15.9%）、克雷伯菌属（14.4%）、凝固酶阴性葡萄球菌（12.6%）和肺炎链球菌（9.1%）。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是引起儿童肺炎的主要病原菌，其检出率分别为9.1%和0.9%，明显高于滁州市第一人民医院2015年细菌耐药监测的结果[2]，其检出率仅为3.7%和0.7%，同时肺炎链球菌的分离率也高于2015年CHINET的监测数据（1.77%）[3]。

表4 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents（%）

MRSA和MRCNS的检出率分别为29.8%和74.4%，均低于CHINET2015年的监测数据[3]和滁州市第一人民医院2015年的数据[2]。金葡菌中MRSA和MSSA对莫西沙星、达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全敏感，MRSA对其余监测药物的耐药率明显高于MSSA，这与有关研究结果相似[4]。凝固酶阴性葡萄球菌主要来自于新生儿病区的血培养标本，由于新生儿血培养一般都为单瓶送检，虽然本院加强了血培养采集规范，但仍存在培养结果与临床不符的情况，提示应根据患儿临床情况和其他检查综合判断，合理使用抗菌药物。本次监测结果显示，肠球菌属对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全敏感，屎肠球菌对其余监测的抗菌药物的耐药率显著高于粪肠球菌，这与有关研究相同[5]。本次共检出肺炎链球菌96株，对青霉素全敏感，对红霉素和克林霉素的耐药率达95.6%，与有关研究相似[6]，说明肺炎链球菌感染，青霉素能够达到很好的治疗效果。

表5 不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

本院近3年共检出大肠埃希菌207株，其中产ESBL的检出率为50.2%；检出克雷伯菌属152株，其中产ESBL（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）的检出率为32.4%；检出变形杆菌属细菌14株，其中奇异变形杆菌产ESBL的检出率达83.3%。产酶株的耐药率显著高于非产酶株。本次监测结果显示，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍保持着高度敏感，但随着该类药物在临床上的广泛和不合理使用，CRE的检出率也逐年增高，以耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌最为常见[7]。本次监测中共检出肠杆菌科细菌485株，其中CRE的检出率为2.5%，低于有关研究的结果[2-4]。本次CRE检出标本来源为痰液、尿液和分泌物，分别占75.0%（9/12）、16.7%（2/12）和8.3%（1/12）；CRE检出科室分布于儿内三科和新生儿科，分别占83.3%（10/12）和16.7%（2/12）；本次的CRE检出患者年龄小于1个月的占16.7%（2/12）、1个月到1岁的占75.0%（9/12）、大于1岁的占8.3%（1/12）。由于CRE往往呈多重耐药或泛耐药，导致临床无药可用[8]，临床应引起足够的重视。不发酵糖革兰阴性杆菌以铜绿假单胞菌和不动杆菌属检出率最高。本次监测结果显示，铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素全敏感，不动杆菌属细菌对碳青霉烯类抗生素的敏感率也达到97.1%，除哌拉西林外，铜绿假单胞菌和不动杆菌属对其余所检测抗菌药物的敏感率均大于85%，说明不发酵糖革兰阴性杆菌对所检测抗菌药物保持着较高的敏感率。

本次监测结果表明，近3年滁州市儿童医院所分离出的肠杆菌科细菌占总分离菌的45.9%，其中CRE的出现，应引起重视。所以，应加强细菌耐药性监测，了解细菌的耐药变化，指导临床合理选用抗菌药物，以延缓多重耐药和泛耐药菌的产生和传播。

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Surveillance of antimicrobial resistance in the clinical isolates from Children's Hospital of Chuzhou during the period from 2014 to 2016

XU Tiantian, XIE Ruiyu.
（Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First Hospital, Chuzhou Anhui239000, China）

ObjectiveTo investigate the distribution and antibiotic resistance of bacterial isolates from Children's Hospital of Chuzhou during the period from January 2014 through December 2016.MethodsA retrospective analysis was carried out for 1 057 bacterial strains isolated from clinical specimens from January 2014 through December 2016.ResultsOf the 1057 clinical isolates collected, gram positive organisms and gram-negative organisms accounted for 45.3% (479/1057) and 54.7% (578/1057),respectively. The top 5 most frequently isolated microorganisms wereE. coli(19.6%),S. aureus(15.9%),Klebsiellaspp. (14.4%),coagulase negativeStaphylococcus(12.6%) andS. pneumoniae(9.1%). All theS. pneumoniaeisolates were susceptible to penicillin.Prevalence of MRSA was 29.8% amongS. aureusand the prevalence of MRCNS was 74.4% in CNS. AllStaphylococcusstrains were susceptible to daptomycin, linezolid and vancomycin.E. faeciumstrains showed much higher resistance rate to most of the antimicrobial agents tested thanE. faecalis. The prevalence of ESBLs-positive strains was 50.2% inE. coli, 32.4% inKlebsiellaspp.(K. pneumoniaeandK. oxytoca) and 83.3% inP. mirabilis, respectively. TheEnterobacteriaceaestrains were highly sensitive to carbapenems. A total of 12 (2.5%) carbapenem-resistant strains were identified from 485Enterobacteriaceaeisolates.P. aeruginosaandAcinetobacterspp. were highly sensitive to carbapenems.ConclusionGram negative bacteria are still dominant pathogens in clinical practice. It is necessary to strengthen monitoring of antibiotic resistance, which is still a serious issue of great concern.

children; antibiotic resistance; antimicrobialagent; extended-spectrum beta-lactamase

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 06-0663-05

10.16718/j.1009-7708.2017.06.010

安徽省滁州市第一人民医院检验科，安徽滁州 239000。

徐添天（1985—），女，本科，检验师，主要从事临床检验诊断方面的研究。

徐添天，E-mail:45736443@qq.com。

2017-03-07 修回日期：2017-04-05