2016年某院血培养情况及耐药性分析

汤英贤 李玉珍 徐令清 温伟洪 陈凌娟 李介华

2016年某院血培养情况及耐药性分析

汤英贤 李玉珍 徐令清 温伟洪 陈凌娟 李介华

目的了解2016年清远市人民医院血培养常见病原菌分布及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法使用BD BACTECTM FX全自动血培养系统对10 889份临床采集的血液进行培养，阳性标本采用BD Phoenix 100全自动细菌鉴定药敏检测系统进行鉴定及药敏分析，耐药性分析采用WHONET 5.6软件统计。结果10 889份血培养标本中检测阳性为952份，总阳性率8.74%；剔除同一患者多次培养重复分离株，阳性标本为542份，其中革兰阳性菌183株，革兰阴性菌321株，真菌38株。常见的病原菌依次为大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、和铜绿假单胞菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南和复方新诺明的敏感性为100%；耐药性排名前四位的抗生素分别为氨苄西林、哌拉西林、四环素、氨苄西林/舒巴坦；铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性均大于90%；金黄色葡萄球菌对阿莫西林/克拉维酸、利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素的敏感性均为100%，对氨苄西林菌耐药性为100%、青霉素G耐药性为97.9%；粪肠球菌属对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺敏感性为100%。结论该院血培养阳性率及耐药率均比较高，血流感染病原菌以肠杆菌科细菌为主，凝固酶阴性的葡萄球菌占比也比较高，马尔尼菲青霉菌感染应引起重视，临床应高度重视血培养检查，加强抗生素的早期、合理使用，减少耐药菌株的产生。

血培养；病原菌；耐药性

血流感染包括菌血症和败血症，是致病菌或条件致病菌侵入血液中生长繁殖并释放毒素和代谢产物而引起的急性重症感染性疾病，其发病率和致死率均较高[1]。早期及时有效的抗菌治疗，对于降低发病率、病死率具有极为重要的价值。因而进行血培养标本分析及研究其耐药情况，有助于初始治疗时选用恰当的抗生素。血培养是判断患者血流感染的金标准[2]。本研究对清远市人民医院2016年临床采集的10 889份血培养标本中分离的542份菌株进行分析，为临床早期、合理使用抗生素提供依据，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源收集 2016年全年清远市人民医院门诊与住院患者送检的10 889份血培养标本。

1.2 仪器与试剂使用BD BACTECTM FX全自动血培养系统及配套血培养瓶。细菌鉴定药敏采用BD全自动快速生物质谱检测系统IVD MALDI Biotyper和BD Phoenix 100全自动细菌鉴定药敏检测系统及3种独立的鉴定药敏复合板条，即革兰阳性鉴定药敏复合板条、革兰阴性鉴定药敏复合板条和链球菌鉴定药敏复合板条。真菌鉴定采用梅里埃诊断产品（上海）有限公司产品 API20CAux。药敏纸片为英国Oxoid公司产品。培养基选用郑州安图生物工程股份有限公司生产。

1.3 质控菌株大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC29213，铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212均购自卫生部临检中心。

1.4 检查方法参照《血培养检测规范化操作》[3]进行标本的正确采集，成人8～10 ml分别注入美国BD公司配套成人树脂需氧瓶和厌氧瓶，儿童1～3 ml注入儿童树脂培养瓶。放入BD BACTECTM FX全自动血培养系统进行监测。阳性报警后立即取出，分别接种于血平板、巧克力平板和沙保氏平板，若为厌氧瓶报阳分别转种相应平板做需氧和厌氧培养。35 ℃培养24 h后，根据革兰染色结果选用相应的鉴定药敏复合板条进行细菌的鉴定药敏试验。细菌菌谱及耐药性分析采用 WHONET 5.6软件进行处理。

2 结果

2.1 病原菌分布10 889份血培养标本中检测阳性为952份，总阳性率8.74%。剔除同一患者多次培养重复分离株，阳性为 542份菌株，其中革兰阳性菌183株，占33.76%；革兰阴性菌321株，占59.23%；真菌38株，占7.01%，其中马尔尼菲青霉菌占2.58%，专性厌氧菌占0.92%。由表1可以看出，常见的病原菌依次为大肠埃希菌（32.10%）、凝固酶阴性葡萄球菌（11.62%）、金黄色葡萄球菌（9.23%）、肺炎克雷伯菌（9.04%）和铜绿假单胞菌（4.98%）。

表1 542株病原菌的种类及构成比

2.2 革兰阴性菌耐药性分析由表2可知，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南和复方新诺明的敏感性为100%，耐药性排名前四位的抗生素分别为氨苄西林、哌拉西林、四环素、氨苄西林/舒巴坦，铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性均大于90%。

2.3 革兰阳性菌耐药性分析金黄色葡萄球菌对阿莫西林/克拉维酸、利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素的敏感性均为100%，对氨苄西林菌耐药性为100%、青霉素G耐药性为97.9%；凝固酶阴性葡萄球菌对氨苄西林和青霉素G有较高的耐药性，而对利奈唑胺、替考拉宁和万古霉素的敏感性均为100%；肠球菌属对氨苄西林、利奈唑胺、青霉素G、替考拉宁、万古霉素敏感性均为100%。

表2 革兰阴性菌对抗菌药物的耐药性(%)

表3 革兰阳性菌对抗菌药物的耐药性(%)

2.4 真菌耐药性分析见表4。

表4 真菌对抗菌药物的耐药性(%)

3 讨论

血流感染是一种严重的全身感染性疾病，可引起患者发热、弥散性血管内凝血（DIC）、休克等严重后果[4]，如果诊治不及时可威胁患者生命，病死率较高。本研究结果显示，2016年该院血培养分离病原菌以革兰阴性菌为主，分离排名前五位的病原菌分别为大肠埃希菌（32.10%）、凝固酶阴性葡萄球菌（11.62%）、金黄色葡萄球菌（9.23%）、肺炎克雷伯菌（9.04%）和铜绿假单胞菌（4.98%）。血培养病原菌谱与国内的一些监测报道大致相似[5]。凝固酶阴性葡萄球菌的检出率也比较高，此类菌群常常作为污染菌但有时也可成为致病菌，为导管相关性血流感染的病原菌。对于血培养检测出的病原菌是否为真正的致病菌，还需要结合患者具体的临床治疗和病原菌进行综合分析。

根据药敏结果显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南和复方新诺明的敏感性为100%；耐药性排名前四位抗生素分别为氨苄西林、哌拉西林、四环素、氨苄西林/舒巴坦，但随着碳青霉烯类药物的广泛使用，其他标本类别中已发现碳青霉烯类药物耐药的肠杆科细菌。本研究培养出的革兰阳性菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌，而金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的检出率远低于2011年CHINET中国细菌耐药性监测网血培养检出率的 42.5%和68.0%[5]。金黄色葡萄球菌属对阿莫西林/克拉维酸、万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的敏感性为100%，但据报道在日本、美国等已发现对万古霉素耐药的葡萄球菌[6]。对氨苄西林和青霉素G的耐药性均高于95%以上，给临床经验用药提供参考。肠球菌属主要是粪肠球菌，目前还未发现对万古霉素耐药的肠球菌属。

研究中还出现了本市的第1例布鲁菌感染病例，为感染性发热就诊患者，至今已陆续发现本菌感染病例，疾病防控方面应引起重视。布鲁菌是一类人畜共患感染性疾病的病原菌，临床表现为反复发热、关节痛、全身乏力，通过空气传播比接触传播更为重要。目前，厌氧培养技术在临床检验中普遍得到开展，本研究还发现5例专性厌氧菌血流感染病例，其在临床非常普遍，可发生于人体的各个部位，遍及临床各科。据统计[7]，约60%的临床感染均有厌氧菌参与。因此，临床对于感染标本应重视厌氧菌的检出情况，尤其对于疑似为感染而常规细菌培养的阴性病例，应严格进行厌氧菌的分离培养与鉴定。

随着现代医学的快速发展，侵入性治疗等技术的开展和抗菌药物的广泛使用，血流感染率呈不断上升趋势，因此临床应严格按照血培养检测规范化操作执行，加强抗生素的早期、合理使用，减少耐药菌株的产生。

[1] 储新民,孔建新.某三甲医院2010年血培养标本中细菌分布及耐药性分析[J].临床输血与检验,2012,14(3):208-211.

[2] 张能华,周铁丽.232例血培养病原菌分布特点及耐药性分析[J].中国微生态学杂志,2015,27(9):1052-1054.

[3] 徐英春,倪语星,王金良.血培养检测规范化操作[M].上海:上海科学技术出版社,2012.

[4] 田磊,陈中举,李丽.2012年湖北省成人患者血培养分离菌耐药性分析[J].中国感染与化疗杂志,2015,15(6):509-516.

[5] 李光辉,朱德妹,汪复,等.2011年中国CHINET血培养临床分离菌的分布及耐药性[J].中国感染与化疗杂志,2013,13(4):241-247.

[6] 王清涛,陈民钧,张秀珍,等.金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药性研究[J].中华检验医学杂志,2001,24(4):239-240.

[7] 赵敬焕,刘迪,李亭等.血流感染患者的病原菌分析[J].中国感染与化疗杂志,2012,12(5):384-389.

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.11.005

清远市人民医院检验科，广东清远 511500

汤英贤（1984.6-），本科学历，主管检验师。研究方向：主要从事微生物方面研究。E-mail：224841975@qq.com