FUS-200全自动尿沉渣分析仪的性能评价

曹笠,张广波,许关斌

大连市第三人民医院 输血科,辽宁 大连 116033

FUS-200全自动尿沉渣分析仪的性能评价

曹笠,张广波,许关斌

大连市第三人民医院 输血科,辽宁 大连 116033

目的对FUS-200全自动尿沉渣分析仪质量性能进行评价,证实其性能满足临床要求,并达到ISO 15189标准要求.方法按照有关文件规定,对FUS-200全自动尿沉渣分析仪的部分项目进行检测,如精密度、线性范围、携带污染率、稳定性能、阴性符合率、与人工显微镜检查可比性等各项指标.结果FUS-200全自动尿沉渣分析仪的各项指标均在文件规定允许范围内,满足临床需求.结论必须定期对实验室仪器进行性能验证,确保检测结果的准确性.

全自动尿沉渣分析仪;线性范围;性能评价;精密度;稳定性

引言

至20世纪90年代,国际实验室组织互认已初步形成,实验室认可活动也由此变得极为重要[1].为了保证检验质量以及参加ISO15189医学实验室认可,检验科每年必须根据本科室具体条件,用试验去评价检测系统的基本分析性能,至少应包括精密度、准确度、线性范围等[2-4].其中,根据ISO15189 5.3.1要求,实验室设备需具有完整性、有效性和适用性.新仪器使用前应对其精密度、线性范围、携带污染率及准确性等进行评价以确保其性能及要求.对于已使用的仪器设备应按要求进行校准和比对.此外,ISO15189 5.3.11对仪器维修后的验证提出了要求,即当设备脱离本实验室或维修、维护过后,在使用前应对其进行检查,确保其性能满足[5].

目前,尿液有形成分常用的检查方法有传统的显微镜检查法和仪器检查法,前者客观准确,后者操作简单快速,尿液标本不需离心.迪瑞的FUS-200全自动尿沉渣分析仪是影像法与流式细胞术的结合,符合国际NCCLS标准(国际临床检验标准专业委员会)和中国CCCLS标准(中国临床检验标准专业委员会)关于尿液检测标准化的规定.本文依照ISO15189标准,对FUS-200全自动尿沉渣分析仪的部分检测项目的精密度、线性范围、携带污染率、稳定性能、阴性符合率、与人工显微镜检查可比性等各项指标进行系统评价.

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

FUS-200全自动尿沉渣分析仪(长春迪瑞公司)及有效期内配套试剂;普通双目生物显微镜(Olympus);尿沉渣定量计数板;离心机.

1.2 标本来源

收集2013年5月～2013年12月我院住院患者晨尿标本100例,用一次性塑料尿杯收集尿液标本,检测前充分混匀,倒入试管,置于测试架上.

1.3 试验方法

(1)FUS-200全自动尿沉渣分析仪测定过程中严格按照仪器说明书对每份充分混匀的尿液标本进行测定,记录实验结果.

(2)评价方法.精密度测定:高、中、低3种浓度的红细胞悬液标本,连续在FUS-200全自动尿沉渣分析仪上测定20次,计算CV%.

线性测定:分别取含RBC浓度为5578个/μL和WBC浓度为5272个/μL的两份标本,用生理盐水做倍比稀释,仪器检测后结果与理论值做线性回归分析.

携带污染率:分别选取RBC、WBC高值、低值的标本,在仪器上先检测高值标本3次,记录为H1、H2、H3,随后检测低值标本3次,记录为L1、L2、L3,然后按公式:

计算互染率.检测3次,结果取均值.

稳定性观察:新鲜尿液标本要求必须2 h内完成,故对标本做2 h不同时段测定,采集后室温静置,在2 h内不同时段(0、30、60、90、120 min)用FUS-200全自动尿沉渣分析仪测定,观察仪器检测结果的稳定性.

阴性符合率:按CLSI推荐要求将尿液离心后,选取人工计数阴性的尿液标本20份进行仪器检测,计算阴性率.

(3)尿沉渣定量计数板的测定.取均匀混合尿10 mL,1500 r/min离心5 min后用吸管吸去上清液9.8 mL,将剩余的0.2 mL尿沉渣充分混匀,用移液管吸取滴入计数板,稍等片刻,首先用低倍镜观察,用高倍镜计数10大方格内的有形成分(上皮、管形、粘液丝在低配镜下计数),记录实验结果.所有标本均在2 h内完成.结果计算:离心的尿液标本的细胞数(细胞数/μL)=10大方格的细胞数/浓缩倍数.镜检由两名经验丰富的主管检验师进行.

1.4 统计学分析

用quot;Excelquot;软件对所有数据进行数学统计,SPSS 11.5软件进行相关性分析.

2 结果

2.1 仪器性能评价

(1)精密度测定.对FUS-200全自动尿沉渣分析仪的精密度进行检测的结果,见表1.高、中、低3种浓度的红细胞悬液CV值分别为2.49%、5.48%、6.9%,显示仪器测定精密度符合要求.

表1 精密度测定 (N=20次)

(2)线性测定.经测定,RBC的相关系数为0.997,回归方程为y=0.995x+25.67;WBC的相关系数为0.995,回归方程为y=0.815x+20.54,仪器在该检测范围内线性良好.

(3)携带污染率测定.携带污染率测定结果,见表2.红细胞携带污染率为0.4%,白细胞携带污染率为0.54%,均lt;1%.

(4)仪器检测稳定性.仪器稳定性测定结果,见表3.显示仪器检测在2 h时间段内重复性、稳定性良好,同时也反映仪器对标本混匀力度符合要求.

表2 互染率测定(%)

表3 仪器稳定性测定

(5)通过人工计数和仪器检测结果比对,阴性符合率达到100%.

(6)尿沉渣定量计数板镜检法与FUS-200检测RBC、WBC结果比较,RBC的相关系数为0.947,回归方程为y=1.948x+1.71;WBC的相关系数为0.912,回归方程为y=2.45x+0.86.经秩和检验,两者均Pgt;0.05,无统计学意义.

3 讨论

传统尿沉渣显微镜检查简便易行,是临床医学检验工作中识别有形成分的quot;金标准quot;[6-8],但是其操作要求高,费时,重复性差,且不能定量报告结果,不利于临床动态观察[9].

迪瑞FUS-200全自动尿沉渣分析仪是国产的全自动尿液有形成分分析仪,采用流式细胞技术与自动粒子识别系统来分类和定量12大类尿液有形成分,保证尿中有形成分没有重叠,计数准确;采用数字成像技术,每个样本650检测RBC、WBC帧图片,也就是650个视野(过去人工判读观察在10个视野左右,受个人因素影响),大大提高检测容量,容量的加大也就保证最大限度的避免了阳性标本漏检和误检,提高了检测结果的准确性.其定量成分包括:红细胞、白细胞、白细胞团、透明管型、未分类管型、鳞状上皮细胞、细菌、酵母菌、结晶、粘液丝和精子等,并可同时给出直观、清晰的各种有形成分的图像信息.但全自动尿沉渣分析仪只能检测尿液中完整的有形成分[10],无法检测已经破坏的细胞,这就要求尿液标本的新鲜,不可应用存放过久或者被污染的尿液标本.

本文研究显示:该仪器的重复性好,携带污染率低,线性范围广,这与国内大多数研究报道是一致的[11-12],检验前有效的混匀能保证在2 h的检测过程中不受有形成分自然沉降的影响,结果稳定性可靠、无漂移;仪器线性范围广,高值、低值标本无需稀释或浓缩,符合不离心标本直接进行检测的要求.尽管离心标本可以较好的浓缩尿液中的各类有形成分,提高阳性率和各种病理成分的捡出率,但离心过强不可避免会有部分细胞被破坏,离心太轻又不能完全沉淀有形成分,且在结果计算时除以浓缩系数又放大了该部分误差[13-14].专家指出:不离心镜检法直接计数尿中红、白细胞,只要在计数范围达到一定量时,不但不会降低阳性检出率,而且较真实地反映尿中红、白细胞浓度,接近于真实,是检查尿液有形成分的理想方法,但于现实工作中因效率低下和人工误差而不实用.而FUS-200尿沉渣分析仪检测不离心标本时做到对低含量目标也能检出、无漏检、无论大小目标都能识别,很好的解决了这个问题.

需要指出的是,镜检是形态学检查的金标准,仪器分析、识别细胞还存在许多局限性.仪器对各类有形成分的自动识别,是会受各种因素的影响:① 焦距的影响:仪器提供了快捷调焦和标准调焦系统,快捷调焦由操作者手工操作,以便固定当日检测的焦距,却因此易受人为因素的影响,造成仪器识别的准确性因人而异;② 受尿液成份的影响:尿液含多量粘液丝和磷酸盐等多量结晶时,细胞形态模糊不清,仪器的识别的准确性会下降;③ 对高浓度标本:成堆存在的尿液有形成分,使仪器难以识别.

因仪器阴性过筛的可靠性,对阴性结果一般可以直接发出报告.而对尿液有形成分复杂的、仪器不能识别的成分,必须进行必要的人工图像复核,可极大的降低尿有形成分的假阳性率[15],而尿液分析仪的尿常规检查不能取代显微镜尿沉渣检查,在临床尿液检查中,应做到两种检查方法相结合,才能确保诊断的准确率[16].

同时ISO15189认可,以及医院等级达标也对尿沉渣的检查提出了更高的要求,因此建立尿沉渣的质量性能评价是十分必要的,我们不能只满足于全自动尿沉渣分析仪的方便快捷,实验室必须定期对仪器进行精密度、线性范围、携带污染率、稳定性能、阴性符合率等性能验证,并定期进行校准和比对,定期做好室内质控,定期参加室间质评活动,保证实验结果的准确性、精确性.

[1] 医学实验室认可培训教材[M].北京:中国合格评定国家认可委员会,2011.

[2] Tholen DW,Kroll M,Astles JR,et al.Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guidline[M].Wayne:CLSI,2003.

[3] Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (2) Centers for Medicare amp; Medicaid Services (CMS),HHS.Medicare,medicaid, and CLIA programs; laboratory requirements relating to quality systems and certain personnel qualifications. Final rule[J].Fed Regist,2003,68(16):3639-3714.

[4] Sasse EA.How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory:Approved Guideline-Second Edition[M].Wayne:NCCCLS,2000.

[5] CNAS-GL19:2008.医学实验室质量和能力认可准则在临床血液[S].中国合格评定国家认可委员会.

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[16] 赵敏,李新玲.尿沉渣与尿常规在尿液检验中的相关性分析[J].中国实用医药,2012,7(34):79-80.

本文编辑 王婷

Performance Evaluation of FUS-200 Automatic Urine Sediment Analyzer

CAO Li, ZHANG Guangbo, XU Guanbin
Department of Blood Transfusion, The Third People's Hospital of Dalian, Dalian Liaoning 116033, China

ObjectiveIn this study, the quality performance of the FUS-200 automated urine sediment analyzer was evaluated, and its performance was proved to meet the clinical requirements and the ISO 15189 standard.MethodsWe evaluated the performance of FUS-200 automated urine sediment analyzer by precision, linearity, carryover contamination rate, stability, the negative coincidence rate and other indicators according to published standard.ResultsThe results of precision, linearity, carryover contamination rate were all in the allowable range.ConclusionPerformance verification of laboratory instruments must be performed regularly to ensure the accuracy of the test results.

automated urine sediment analyzer; linearity range; performance evaluation; precision; stability

R446.12

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2017.10.023

1674-1633(2017)10-0086-03

2016-12-27

2017-02-26

作者邮箱:593299596@qq.com