电刺激采精器在大额牛种质资源保护上的应用研究

2017-11-22毛翔光朱新培赵家才杨彩云高玉琼何永富

中国草食动物科学 2017年6期

关键词：大额精量精液

毛翔光，朱新培，赵家才，杨彩云，高玉琼，何永富，李雯，张洁

（云南省种畜繁育推广中心，昆明 650212）

电刺激采精器在大额牛种质资源保护上的应用研究

毛翔光，朱新培，赵家才，杨彩云，高玉琼，何永富，李雯，张洁

（云南省种畜繁育推广中心，昆明 650212）

大额牛为我国地方畜禽遗传资源濒危品种，目前仍处于半野生状态。为了进行大额牛种质资源保护，针对大额牛调教假阴道采精较为困难，对电刺激采精和假阴道采精的效果进行了比较研究。结果表明：电刺激法的采精量5.34 mL±2.36 mL，原精活力（56.25±14.20）%，精子密度 7.33亿/mL±3.48亿/mL，解冻活力（35.95±1.04）%，采精成功率97.30%，可利用率64.44%；假阴道法的采精量4.38 mL±1.65 mL，原精活力（55.41±9.78）%，精子密度 14.07亿/mL±5.06亿/mL，解冻活力（36.10±2.29）%，采精成功率88.00%，可利用率78.79%。说明电刺激法的采精成功率高，可有效地应用于大额牛种质资源的保护工作中。

大额牛；电刺激采精器；精液；遗传资源

大额牛（Bos frontalis），又名独龙牛，作为我国半野生半家养的珍稀濒危物种之一，已被列入国家级畜禽遗传资源保护名录。在世界范围内，大额牛主要分布于印度、孟加拉和缅甸，不丹、尼泊尔以及马来半岛上的柬埔寨、泰国、老挝和越南等地亦有少量分布。目前，我国境内的大额牛零星分布于西藏门隅、珞渝地区，云南省较为集中地分布于西部的高黎贡山的独龙江和怒江流域（位于贡山县西北部的高黎贡山与担当力卡山之间，与缅甸接壤，面积为 1 994 km2，海拔 1 170～4 964 m）［1］。是世界上现存的7个牛种之一，不但具有耐粗饲、抗逆性强，产肉性能和肉质好等优良特性，还具有很高的遗传资源价值与经济利用价值。

1 大额牛精液的采集

1.1 大额牛的来源

大额牛从其原产地云南省怒江州贡山县迁地保护区依法引进到云南省种畜繁育推广中心冷冻精液站，饲养方式为人工舍饲，日粮为全混合饲料，夏秋补饲适量青饲料，供给清洁饮水，定期免疫和检疫。经过简单驯化调教后，用电刺激法和假阴道法采集大额牛精液进行冷冻精液制作。

1.2 大额牛的电刺激法采精

按赵家才等［2］的电刺激方法进行采精。把采精的大额牛由饲养员牵引到保定架内妥善保定，确保人、畜安全。采精前用0.05%～0.10%的高锰酸钾溶液清洗大额牛包皮和外阴部，采精员和精液收集员站在大额牛的左、右两侧并由另一助理将电刺激采精器电极探头插入采精公牛直肠，然后打开电源输出按钮，使用自动或手动脉冲刺激大额牛副性腺，使其充分分泌和阴茎勃起，待大额牛副性腺分泌和阴茎勃起充分后开始排精时收集其精液。

1.3 大额牛的精液品质测定指标

大额牛精液采集后，依据GB4143—2008分别测定其采精量、精子密度、精子活力和畸形率。精子畸形率用姬姆萨染色法染色后镜检，合格的鲜精用于制作冷冻精液。

1.4 数据来源和处理

大额牛精液质量测定数据来源于2011—2016年的采精记录，利用SPSS 18.0软件对采精数据进行分析，差异显著性采用t检验。结果采用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 电刺激法和假阴道法采集精液质量比较

先用电刺激法采精，经过诱导调教，再用假阴道法采精。结果表明：采用电刺激法的采精量为5.34 mL±2.36 mL（n=116），原精活力（56.25±14.20）%（n=116），精子密度 7.33亿/mL±3.48亿/mL（n=116），解冻活力（35.95±1.04）%（n=74），采精成功率 97.30%（180/185）；假阴道法采集精量为4.38 mL±1.65 mL（n=66），原精活力（55.41±9.78）%（n=66），精子密度 14.07亿/mL±5.06亿/mL（n=66），解冻活力（36.10±2.29）%（n=52），采精成功率88.00%（66/75）。其中电刺激法采集的精液量显著高于假阴道法（P＜0.05），而精子密度极显著低于假阴道法（P＜0.01）。

2.2 大额牛第1次采精和第2次采精精液质量比较

大额牛第1次电刺激采精后，间隔40 min，再进行第2次电刺激采精，第2次电刺激采精效果好于第1次，原精活力和密度极显著提高（P＜0.01）。详见表1。

2.3 大额牛与云岭牛、西门塔尔牛电刺激法采集精液质量比较

由表2可知，大额牛电刺激法采精量和原精活力均极显著低于西门塔尔牛，而西门塔尔牛电刺激法采精量虽最高，但精子密度最低。

表1 大额牛第1次和第2次采集精液质量比较

表2 大额牛与云岭牛、西门塔尔牛电刺激采集精液品质比较

3 讨论

3.1 大额牛遗传资源保护的必要性

马月辉等［3］用群体生存力方法模拟分析了大额牛的生存过程和系统压力，结果表明，大额牛目前的生存状况很危险，按现在的生存状况，群体平均灭绝时间只有52～78年。特别是随着当地社会经济的发展，大额牛生活的自然环境在迅速缩小，这无疑更加重了其生存压力。大额牛遗传物质的保护尤为重要，通过制作冻精可促进大额牛遗传资源的开发利用，通过利用又可促进保护。