胃癌中解聚素—金属蛋白酶17的表达及预后价值研究

冯宇娇+王宏坤+郑绘霞+梁建芳

【摘要】 目的：检测解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）在胃癌中的表达情况，探讨其在胃癌发生发展中的作用及其预后意义。方法：收集85例胃腺癌组织标本及相应正常对照组织进行免疫组化法检测，应用Kaplan-Meier生存分析法和Cox比例风险回归模型进行生存分析，评价ADAM17表达、临床病理指标与胃癌患者生存期的关系。结果：胃癌组织中ADAM17表达明显高于正常组织（P<0.05）；ADAM17的表达与胃癌组织中淋巴结转移及TNM分期均有关（P<0.05），与年龄及肿瘤分化程度均无关（P>0.05）。单因素Cox比例生存分析显示，ADAM17表达、淋巴结转移均与患者预后密切相关（P<0.05），多因素Cox回归分析显示ADAM17高表达是胃癌患者独立的预后因素。结论：ADAM17蛋白表达在胃癌的发生进展过程中起了一定的作用，ADAM17高表达的患者预后差，是评价胃癌患者预后的重要指标。

【关键词】 胃癌； ADAM17； 免疫组化； 预后

【Abstract】 Objective：To detect the expression of a disintegrin and metalloproteinase 17（ADAM17） in tissue of gastric cancer and explore the roll and prognostic value of development of them.Method：ADAM17 expression was detected by immunohistochemistry in 85 gastric cancer tissues and the corresponding normal tissues，Kaplan-Meier survival analysis and Cox regression were used to evaluate the relationship of ADAM17 expression and clinical pathology indicators and overall survival of patients.Result：The expression of ADAM17 protein in cancer was significantly higher than that in normal tissues（P<0.05）.ADAM17 protein expression in cancer were significantly related to lymph node metastasis and TNM stage（P<0.05），no related with age and tumor differentiation degree（P>0.05）.The single factor survival analysis showed that ADAM17 protein expression and lymph node metastasis were correlated with patients prognosis（P<0.05），and Cox multi-factor analysis showed that ADAM17 expression was an independent prognostic factor.Conclusion：The expression of ADAM17 protein may play a roll of development progression of gastric cancer.The high expression of ADAM17 is poor prognosis in gastric cancer，and it is a independent prognostic factor for gastric cancer.

【Key words】 Gastric cancer； A disintegrin and metalloproteinase 17； Immunohistochemistry； Prognosis

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.20.005

胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，病理类型主要以腺癌多见，目前主要以手术切除结合放化疗的方式为主，但是多年来胃癌的预后都没有得到较大的改善，究其原因一是患者多数就诊时已属于中晚期，二是到目前为止尚未找到能够评价患者预后的关键因子，因此寻找有效的分子标记物来评估患者预后，为患者的后期生存质量提供较大的改善是目前研究的热点。解聚素-金属蛋白酶（a disintegrin and metalloprotease domain，ADAM）家族是近年来发现的一种跨膜蛋白，它含去整合素域和金属蛋白酶域结构的蛋白[1]。解聚素-金属蛋白酶17（a disintegrin and metalloproteinase 17，ADAM17）是其蛋白家族的成員之一，又名肿瘤坏死因子α转化酶，具有解聚素和金属蛋白酶的活性，研究发现，ADAM17在炎症和肿瘤组织中均有一定的作用[2-3]。本研究采用免疫组化法检测85例胃癌组织中ADAM17表达情况，探讨其与胃癌临床病理特征及预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2011-2014年本院收治的胃癌手术切除病例，对石蜡标本重新包埋切片观察，整理85例胃腺癌及相应切缘阴性组织做对照，所有病例经过两位经验丰富的高年资病理专家诊断。并进行随访，其中未能随访53例，有随访资料32例，生存期5～70个月，其中17例死亡。

1.2 主要试剂和方法 ADAM17抗体、免疫组化试剂盒和DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物科技有限公司。免疫组化EnVision法进行检测，按照试剂盒说明书进行，ADAM17浓度配比1∶200，以PBS液代替一抗作为阴性对照。endprint

1.3 免疫组化 ADAM17蛋白在肿瘤细胞胞膜/胞浆呈棕黄色为阳性表达，观察阳性细胞百分比及染色强度，分别计数阳性细胞百分比（阴性=0分，1%～25%=1分，26%～50%=2分，51%～75%=3分，>75%=4分），评判阳性细胞染色强度（阴性=0分，弱阳性=1分，中度阳性=2分，强阳性=3分），两者相乘：≤4分为低表达或不表达，>4分为高表达。

1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验，单因素及多因素Cox比例回归模型用于评估预后相关因素，Kaplan-Meier法绘制生存曲线。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ADAM17蛋白在85例癌组织和正常组织中的表达情况 85例胃癌组织中，45例（52.9%）ADAM17呈不同程度的表达（图1A），对比正常组织中仅2例（2.4%）显示ADAM17表达（图1B），差异有统计学意义（ 字2=54.373，P=0.000）。

2.2 ADAM17的表达与胃癌临床病理特征的关系 ADAM17蛋白的表达与胃癌淋巴结转移及TNM分期均有关（P<0.05），与患者发病年龄及肿瘤分化程度均无关（P>0.05），见表1。

2.3 生存分析 32例有随访资料的病例ADAM17高表达12例、年龄分布（小于44岁18例，大于44岁14例）、分化程度（高6例、中20例、低

6例）、淋巴结转移者10例、TNM分期（Ⅰ、Ⅱ期19例，Ⅲ期13例），由表2可知，单因素Cox比例分析胃癌的生存期与ADAM17表达及淋巴结转移均相关（P<0.05），与年龄分布、分化程度及TNM分期均无关（P>0.05）。表3显示，多因素Cox比例回归模型筛选发现ADAM17表达是胃癌患者独立的预后因素（P<0.05），总生存期Kaplan-Meier生存曲线提示ADAM17高表达的胃癌患者预后明显较ADAM17低表达或不表达的胃癌患者为差，淋巴结转移患者的生存期也明显短于未发生转移的患者，见图2。

3 讨论

解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）属于Ⅰ型跨膜蛋白，参与着人类多种正常生理活动[4]。ADAM17具有剪切蛋白酶样的作用，能够活化细胞外多种结构不同的功能区，从而释放多种不同的分子，进而发挥一定的生物学作用[5-6]。例如它可以剪切多种表皮生长因子及其受体、细胞因子及黏附分子等胞外结构域，从而提高细胞的增殖和迁移能力[7-8]。

研究发现，在肿瘤组织中，ADAM17的高表达可以促进肿瘤细胞的增殖侵袭和血管形成及转移的能力[9]。当ADAM17表达受到抑制后即进行干扰后可以明显降低肿瘤细胞的增殖能力和周围新生血管的形成能力[10-11]。在口腔鳞状细胞癌、前列腺癌、结肠癌等中均存在着ADAM17高表达，并与肿瘤侵袭性行为相关[12-13]。在乳腺癌、肾癌、非小细胞肺癌、胶质瘤中均发现，ADAM17表达增高显著促进了肿瘤的增殖侵袭能力，且其高表达的患者预后较差[14-18]。在前三种肿瘤中，ADAM17表达不但与肿瘤的发生发展及预后密切相关，而且均认为ADAM17可能是肿瘤分子靶向治疗的新靶点。本研究结果显示，ADAM17在癌组织中的表达显著高于正常组织，两者比较差异有统计学意义（P<0.05），表明ADAM17在胃癌的发生过程中起了一定的作用，ADAM17的表达还与胃癌临床病理指标有关，与淋巴结转移及TNM分期密切相关，而与年龄及肿瘤分化程度等无关。进一步分析显示，淋巴结转移病例及TNM分期高的病例ADAM17表达率明显增高，由此可知，ADAM17表达与肿瘤的恶性进展有关，可能在胃癌的进展中也起着一定的促进作用。

在胶质瘤中，ADAM17在高级别肿瘤中呈高表达，生存分析显示其高表达的患者预后较差[19]。在食管鳞状细胞癌中同样发现，ADAM17呈高表达且与肿瘤的浸润及转移有关，是食管癌评价预后的独立预后因子[20]。本研究单因素生存分析结果显示，ADAM17蛋白表达高的患者生存期明显较表达低的患者差，发生淋巴结转移的患者生存期明显较未发生淋巴结转移的患者差。多因素Cox回归模型提示ADAM17蛋白表達与淋巴结转移两个因素中，ADAM17高表达是评价胃癌患者的预后差的独立因素。总生存期Kaplan-Meier生存曲线显示，ADAM17高表达的胃癌患者预后明显较ADAM17低表达或不表达的患者差。由此可见，ADAM17高表达是胃癌患者评估预后的独立因子。综上所述，ADAM17不但在胃癌的发生进展过程中起着一定的作用，而且是胃癌患者评价预后的重要因子。

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