灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗生长育肥内江猪抗氧化能力的影响

查 琳 易 霞 周天予

(四川省内江市农业科学院,四川内江 641000)

灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗生长育肥内江猪抗氧化能力的影响

查 琳 易 霞 周天予

(四川省内江市农业科学院,四川内江 641000)

为了探讨了饲粮中添加灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗生长育肥内江猪抗氧化能力的影响,本试验选择50头生长育肥内江猪(分为2组,每组40头)为研究对象。试验按照2×2的因子设计:因子一设接种PRRSV弱毒苗和不接种两种处理;因子二为灵芝多糖添加水平,设0,50mg/kg两个水平。在试验的第1d和29d接种弱毒苗。结果显示:接种疫苗组的抗氧化能力下降。与对照组比,接种疫苗组在第7d和第14d这一时段中,血清中总抗氧化能力下降显著(p＜0.05),在第1d血清丙二醇(MDA)含量上升。GLP组在第14d血清中的MDA显著下降(p＜0.01)。饲粮中添加灵芝多糖能提高机体抗氧化能力。

灵芝多糖;PRRSV;抗氧化能力;内江猪

灵芝是一种珍贵的食药两用的真菌，研究表明灵芝之所以具有益寿延年，补中增智，益心补气等滋补功效，源自于其含有多种活性物质，其中灵芝多糖是主要的活性成分。研究表明，灵芝多糖具有一定的抗衰老的生物学功能[1-2]。

PRRSV是一种感染猪的病毒。PRRS是由PRRSV引起的一种传染病，它只感染猪，以厌食、怀孕母猪早产、死胎、木乃伊胎，仔猪呼吸困难为主要病理特征，感染本病后容易引起免疫抑制而继发其他疾病。现在用的PRRSV疫苗主要是弱毒活疫苗、灭活疫苗。其中弱毒活疫苗的效果最好。PRRSV弱毒苗被广泛使用，但其安全性和有效性存在不一致的结果，在某些条件下注射弱毒苗还存在毒力返强的情况，用PRRS弱毒苗注射猪还存在向非疫苗猪传播PRRSV致病性的情况[3]。为探讨在饲粮中添加灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗生长育肥内江黑猪抗氧化能力的影响，我们开展了本试验。

1 材料与方法

（1）试验材料：试验猪：60kg左右的内江猪，源自四川省内江市农科院畜牧研究所猪场；饲养方为自由饮水、自由采食，确保舍内温度适宜、清洁、空气流通，并定期对圈舍进行清洗消毒；灵芝多糖，购买于上海康舟真菌多糖有限公司；PRRSV弱毒苗：北美ATCC VR-2332 PRRS株活疫苗（Ingelvac®PRRSV MLV，每头分含TCID50为104.8）。主要仪器设备：各种规格移液器，普通离心机等。

（2）试验分组及处理：试验期为42d。试验按照2×2的因子设计：因子一为接种PRRSV弱毒苗和不接种两种处理；因子二为灵芝多糖添加水平，设0，50mg/kg两个水平（表示为CON和GLP）。试验共4个处理，每个处理组5个重复，每个重复4头猪，共80头猪。

表1 试验动物分组

（3）检测指标及方法：每个组随机选取一头猪，在试验的7d、14d、21d、28d、35d、42d静脉采血5ml，收集血清，-70℃冰箱保存待测。用分光光度计测定血清中的测定T-AOC值，用硫代巴比妥酸法测定血清中MDA的含量。试验结束的猪屠宰后，迅速分别取其肝脏部、肌肉部3g，每个样取3份。将取出的肉样用经DEPC处理的生理盐水迅速冲洗，用液氮速冻，-70℃保存备用。

（4）统计分析：用spss进行数据统计，结果用平均数±标准差表示。p＜0.05认为有统计学意义。

2 结果与分析

（1）灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗内江猪血清T-AOC的影响 接种疫苗组的猪血清中T-AOC都有所降低，且在接种疫苗后的前14d降低程度较大。接种疫苗组与PBS对照组相比，在接种疫苗后的第7d和第14d，接种疫苗组的猪的血清中T-AOC 显著降低（p＜0.05）。此外，在接种疫苗之后的第28d，接种疫苗组猪血清中T-AOC值低于PBS对照组。就日粮的影响而言，GLP组猪血清中T-AOC的浓度更高，在接种疫苗后的第14d和第35d差异显著（p＜0.05）。结果显示，日粮和免疫交互对猪血清中T-AOC浓度的影响不显著（p＞0.05）（表2）。

表2 灵芝多糖对内江黑猪血清中T-AOC影响

（2）灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗内江猪血清MDA的影响接种疫苗组的猪血清中MDA水平有所提高。同时，在接种疫苗后的第28d，猪血清中MDA趋于正常的水平。接种疫苗组与PBS对照组相比，在接种疫苗后14d内，接种疫苗组的内江猪血清MDA浓度不断升高。就日粮而言，GLP组猪血清中MDA的浓度降低，且在接种疫苗后的第14d达到显著差异（p＜0.05）。结果显示，日粮和免疫交互对猪血清MDA浓度的影响不显著（p＞0.05）（表3）。

（3）灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗内江猪肝脏抗氧化能力的影响 在第二次接种疫苗之后的14d，接种疫苗组肝脏中MDA浓度升高显著（p＜0.05），肝脏中T-AOC能力降低，但其T-AOC能力的差异不显著（p＞0.05）。就日粮而言，GLP日粮降低了猪肝脏中MDA的浓度，且有降低趋势，猪肝脏中T-AOC能力显著提高（p＜0.05）。结果显示，日粮和免疫对肝脏中MDA浓度和T-AOC能力的影响不显著（p＞0.05）（表4）。

（4）灵芝多糖对接种PRRSV弱毒苗内江猪肌肉抗氧化能力的影响 接种疫苗组猪肌肉中MDA水平增加显著（p＜0.05），加快肝脏脂质过氧化，同时显著降低了肌肉T-AOC能力（p＜0.05）。就日粮而言，GLP日粮降低了猪肌肉中MDA浓度，提高了猪肌肉中T-AOC能力，但T-AOC能力的差异不显著（p＞0.05）。结果显示，日粮和免疫对肌肉中MDA浓度和T-AOC能力的影响不显著（p＞0.05）（表5）。

3 讨论

灵芝多糖日粮对接种PRRSV弱毒苗内江猪抗氧化能力的影响：

通常，正常机体它的抗氧化防御体系是非常完整的。这套完整的防御体系包括了超氧化物歧化酶、CAT以及GSH-Px等。这套完整的防御体系使体内的自由基保持动态平衡。然而，当这套完整的防御抗氧化系统损坏，就会引起细胞损伤。细胞损伤是由于机体内产生过量的MDA等脂质过氧化物而导致的。灵芝多糖能诱导T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖，促进细胞因子分泌，进而使得酶的活力得到提高，清扫自由基，发挥免疫调节作用，增强机体的抗氧化能力。研究显示，机体感染病毒后，发生病变和损坏的细胞产生的自由基较多，使机体抗氧化能力的变弱[4]，造成机体氧化应激、细胞膜脂质过氧化、DNA片段分裂等。本研究的结果与上述结果一致。在接种疫苗之后的第7d和第14d，接种疫苗组血清中T-AOC显著降低，并且在接种疫苗的第21d直到第28d血清中的T-AOC慢慢的趋于正常的水平。由此可见，在感染PRRSV之后机体的抗氧化力下降。

研究显示，病毒对宿主细胞能够通过发生一定的应激反应而产生并且释放大量的自由基。同时，这些被释放出来的自由基可以使得病毒的复制不断增强。与此同时，这些被释放出来的自由基可以引起生物膜的损伤，进而会导致机体的抗氧化力变弱，从而引发疾病。在本研究中，接种疫苗组在接种疫苗之后其内江猪的血清中MDA水平有所提高。然而，在接种疫苗的第14d种疫苗组血清MDA浓度才慢慢开始升高，而除此之外的天数差异不显著。

在本研究中，接种疫苗组肝脏中MDA水平极显著增加（p＜0.01），肝脏脂质过氧化的速度加快，同时降低了肝脏T-AOC能力，引起肝脏的氧化损伤。

多项研究表明，灵芝多糖对抗氧化、减缓氧化应激有一定的作用。王君巧等[5]报道灌服黑灵芝多糖可使脾脏组织中的SOD、CAT、T-AOC的含量较模型对照组显著提高而MDA含量较模型对照组显著下降。在本研究中，实验结果显示在接种疫苗之后14d肝脏MDA水平增加，灵芝多糖日粮可以降低肝脏脂质过氧化。灵芝多糖能提高小鼠的抗氧化能力。通过给免疫抑制小鼠服用灵芝多糖，发现小鼠血清中IL-2、INF-α的含量都能明显上升，并使谷胱甘肽过氧化物酶、SOD、T-AOC、CAT水平提高，使MDA含量降低[6]。

表3 灵芝多糖对内江猪血清MDA的影响

表4 灵芝多糖对内江猪肝脏抗氧化能力的影响

表5 灵芝多糖对内江猪肌肉T-AOC和MDA的影响

在本研究中，内江黑猪在接种疫苗之后的免疫应激期间，其机体的抗氧化能力下降，而灵芝多糖日粮组在接种疫苗后第14d和第35d内江黑猪血清中T-AOC浓度显著升高了；接种疫苗后的14d内江黑猪血清中和肝脏MDA浓度降低了。结果表明，在接种疫苗之后的两周内，灵芝多糖能够减轻疫苗引起的氧化应激反应，并且能够提高内江猪机体的抗氧化力，进而提高生产性能。

4 结论

在接种PRRSV弱毒苗的情况下，饲粮中添加灵芝多糖能够提高机体抗氧化能力，从而提高机体免疫力。

[1]赵岩，张莹，初乐，等.灵芝多糖的研究进展[J].中国果蔬，2014，（32）：27-30.

[2]毛健，马海乐.灵芝多糖的研究进展[J].食品科学，2010，（31）：295-298.

[3]王俊文.饲粮添加白藜芦醇对接种蓝耳病弱毒苗育肥猪生产性能和免疫功能及肉品质的影响[D].四川农业大学，2012.

[4]Krishnan V，Zeichner SL. Host cell gene expression during human immunodeficiency virus type 1 latency and reactivation and effects of targetinggenes that are differentially expressed in viral latency. Journal of Virology，2004，78（17）：9458-9473.

[5]王君巧，聂少平，余强，等.黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节和抗氧化作用[J].食品科学，2012，33（23）：274-277.

[6]邹佳妤，石广亮，姜晓文.赤灵芝多糖对机体抗氧化作用及免疫功能的影响研究[J].中国兽医医药杂志，2012，（2）：56-60.

查琳（1989—），女，四川内江人，硕士研究生，主要从事内江猪及家禽遗传育种研究工作。