猪蓝耳病灭活苗和弱毒苗免疫效果的对比研究

隋 超 闫益波 申 超 岳 磊 焦福林 吴志娟 胡广英 任毅菲

（山西省农业科学院畜牧兽医研究所，山西太原 030032）

猪病防控

猪蓝耳病灭活苗和弱毒苗免疫效果的对比研究

隋 超 闫益波 申 超 岳 磊 焦福林 吴志娟 胡广英 任毅菲

（山西省农业科学院畜牧兽医研究所，山西太原 030032）

本文通过观察免疫猪蓝耳病灭活苗与弱毒苗后母猪和仔猪抗体水平的变化，比较两种疫苗的免疫抗体消长规律。实验母猪和仔猪都分为4个组，1组、2组、3组、4组各免疫一次灭活苗、两次灭活苗、一次弱毒苗、两次弱毒苗。在计划时间采集血清，检测试验猪的抗体水平。由试验结果可知，弱毒苗的免疫效果略优于灭活苗，同种疫苗免疫两次的效果优于免疫一次的效果；弱毒苗的抗体峰值出现的比灭活苗早，但抗体维持时间略短。灭活苗适用于一般猪场的免疫防治工作，而弱毒苗更适用于急性突发的猪蓝耳病的防治。

猪蓝耳病；灭活苗；弱毒苗；抗体水平

猪蓝耳病（PRRS）是一种高度接触性的传染病，很容易在地方蔓延，在国内外时有暴发，对养猪业的影响巨大。目前没有有效的药物能彻底根治猪蓝耳病[1]，只能靠预防为主。猪蓝耳病病毒（PRRSV）的感染只针对猪，以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最为易感[2]。PRRSV对患病猪和带毒猪的感染和影响能持续一段时间[3]。感染PRRSV的猪群常具有不同的临床反应和症状，患病猪有的表现为皮肤变色，包括猪耳顶部发蓝，腹部和阴部呈深紫色；有的猪只呼吸困难并伴有咳嗽。而一旦有临床发病症状出现，又极易和其他疾病的病毒混合感染，这就使临床诊断变得复杂难定[4]。为了验证灭活苗与弱毒苗对猪蓝耳病的免疫效果，本研究设计以下试验进行比较，从而为现阶段选择猪蓝耳病疫苗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验耗材

美国爱德士生物有限公司生产的猪蓝耳病病毒ELISA抗体检测试剂盒及一次性采血器等。

1.1.2 试验用疫苗

哈尔滨维科生物有限公司生产的经典PRRS灭活苗（CH-1R）；南农高科技股份有限公司生产的经典PRRS弱毒苗（R98株）。

1.1.3 试验猪

试验前在猪场选定一处单独的饲喂场地作为试验区，并提前将试验区消毒杀菌，为试验的开展做好准备。

对试验猪群做好其他疫苗的免疫工作。试验前对挑选的公猪与母猪都提前完成多杀性巴氏杆菌、链球菌、副猪嗜血杆菌、猪支原体、圆环病毒2型、伪狂犬病毒、流感病毒和猪瘟病毒的疫苗免疫，免疫过程中也会避开PRRS疫苗的免疫时间。

挑选出20头PRRSV抗体检测为阴性，生育过2胎次，年龄、体重相近的母猪。在母猪所产仔猪中，挑选20头体重相近、PRRSV抗体检测为阴性的仔猪。

1.2 方法

1.2.1 试验分组

20头母猪随机分为4组。20头仔猪根据母本剪耳号后依然分为4组。

1.2.2 免疫方法

母猪1组受精后20天免疫1次灭活苗（2头份/头）。母猪2组产前2周免疫1次灭活苗，受精后20天免疫1次灭活苗（均为2头份/头）。母猪3组受精后20天注射1次弱毒苗（1头份/头）。母猪4组产前2周免疫1次弱毒苗，受精后20天免疫1次弱毒苗（均为1头份/头）。

仔猪1组14日龄免疫1次灭活苗（0.5头份/头）。仔猪2组14日龄肌肉注射1次灭活苗（0.25头份/头），35天加强免疫，即再肌肉注射1次灭活苗（0.5头份/头）。仔猪3组14日龄免疫1次弱毒苗（0.5头份/头）。仔猪4组14日龄肌肉注射1次弱毒苗（0.25头份/头），35天再肌肉注射1次弱毒苗（0.5头份/头）。

1.2.3 血样采集

母猪1组、3组于免疫前采血，以保证该母猪PRRSV抗体是阴性，在免疫后分别于14、21、35、49、70、91、112天时采血；母猪2组、4组在首次免疫前采血，保证母猪免疫前为PRRSV抗体阴性猪，在二次免疫前也采血，检测抗体水平，二免后于14、21、35、49、70、91、112天时采血。

在仔猪出生后第7、14、35、42、49、70、90、120日龄分别采集血样。

1.2.4 检测方法

采用美国爱德士生物有限公司生产的猪蓝耳病病毒ELISA抗体检测试剂盒，按照说明书进行血清样本检测。

1.3 计算结果

PRRS阳性对照平均值（PC∶PRRS）减去阴性对照平均值（NC∶PRRS）必须≥0.150；NHC阳性孔对照平均值（PC∶PRRS）必须≤0.120，NHC阴性对照平均值（NC∶PRRS）必须≤0.250；另外，阴性对照平均值（NC）必须≤0.150，试验方能有效。

样本/阳性对照比率的计算（S/P）∶S/P=〔（样本A650nm∶PRRS）－（样本A650nm∶NHC）〕÷〔（PC∶PRRS）－（PC∶NHC）〕。

1.4 结果判定

如果S/P值≥0.40，样品应被判定为PRRS抗体阳性。如果S/P值＜0.40，样品应被判定为PRRS抗体阴性。

1.5 统计方法

本实验采用SPSS 18软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 试验母猪的结果

2.1.1 母猪的PRRSV抗体水平

表1 4个组母猪免疫后不同时期的PRRSV抗体情况（A650nm）

从表1可以看出，所有母猪免疫后，抗体均逐渐升高，1组、2组和3组的抗体水平在35天时达到峰值，4组的抗体水平在21天时达到峰值，而后4个组的抗体水平均逐渐衰减，至112天时达到最低。另外整个试验期，4个组的母猪抗体水平表现为：4组＞2组＞3组＞1组。2.1.2母猪免疫后的产子情况

图1 4个组母猪的死胎率、弱仔率、死亡率、发病率比较

由图1知，4个组母猪的死胎率相比为1组＞2组＞3组＞4组，弱仔率为2组＞3组＞4组＞1组，死亡率为2组＞3组＞1组＞4组，发病率为1组＞2组＞4组＞3组，其中母猪4组的死胎率和死亡率为零。

2.2 试验仔猪的结果

从表2可以看出，1组仔猪的免疫抗体水平在70日龄达到峰值，2组仔猪的免疫抗体在90日龄时达到峰值，1组和2组仔猪都是在120日龄时抗体值最低，3组仔猪的免疫抗体水平在35日龄时达到峰值，4组仔猪的免疫抗体水平在49日龄时达到峰值，3组和4组仔猪则是在90日龄时抗体值最低。

表2 4个组仔猪的PRRSV抗体情况（A650nm）

3 小结和分析

试验证明，经两次弱毒苗免疫的母猪4组抗体峰值出现最早，在21天。一次弱毒苗免疫的母猪3组与两次灭活苗免疫的母猪2组免疫效果相似，抗体峰值都出现在35天。何新群等就证明弱毒苗免疫猪后20～35天左右出现抗体峰值，本研究的结果与此相一致[3]。免疫一次灭活苗的母猪1组抗体峰值出现最晚，在49天。而后4个组抗体水平逐渐衰减，至112天最低，但也为阳性，即在整个生产周期，母猪都可以抵抗PRRSV相关毒株的感染。整个试验期，母猪4组的抗体水平最佳，母猪2组的抗体水平又高于其他2个组，说明经两次疫苗免疫的效果较好，并且经两次弱毒苗免疫的效果最好。但是4个组母猪抗体水平差异不显著，只能从表1中显示免疫效果的差别。另外，比较试验母猪的死胎率、弱仔率、死亡率、发病率，也是母猪4组的最低，说明经两次弱毒苗免疫的效果较好。免疫弱毒苗的仔猪3、4组的抗体峰值比免疫灭活苗的1、2组抗体峰值出现早，但抗体衰减速度快。由此可知，免疫PRRS弱毒苗的母猪及仔猪的效果要远远优于PRRS灭活苗的效果。而同种疫苗的免疫也是两次免疫的效果要好于一次。

曹斌[1]、曹晋蓉[6]等学者均认为，弱毒苗的免疫效果要优于灭活苗，本次试验结论也证明了这一点。但是，曹斌、曹晋蓉等学者同时主张灭活苗安全性好，不存在散毒和毒力返强的危险，但灭活苗存在免疫剂量大，免疫次数多，产生免疫所需的时间较长等缺点。

相比之下，弱毒苗的免疫效果好，免疫力坚强，免疫期长，而此次试验结果则是弱毒苗免疫抗体维持时间要短于灭活苗，这点与相关文献的报道不符。由于试验只在一个猪场进行，且试验对象范围狭小，所以结论可能存在一些误差，但依然有一定的参考价值。

对于未来猪场猪蓝耳病的防控，可以采取以下措施：未发病猪场加强猪场管理，全面贯彻各项防疫程序，做好消毒措施，坚持引种后配种前的疫苗免疫，提高猪群免疫力，可适当在饲料中添加有益的中草药成分。发病猪场要先确定PRRS病毒株型，根据病情的急缓选择弱毒苗或灭活苗，并确定疫苗接种的剂量，必要时可联系相关科技部门寻求技术帮助。

[1]曹斌,王海燕,周广生,等.不同类型猪蓝耳病疫苗的体液免疫效果比较[J].中国动物检疫,2010(8):51-52.

[2]姚敬明,孟帆,吴忻等.猪繁殖与呼吸综合征母源抗体和免疫抗体的消长规律研究[J].中国畜牧兽医,2010,37(4):206-208.

[3]何信群,闰福栋.猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株活疫苗抗体应答水平的观察[J].中国兽药杂志,2003,37(11):24-26.

[4]Evans M,Medley G,Green L.Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)in GB pig herds:farm characteristics associated with heterogeneity in seroprevalence[J]. BMC Veterinary Research,2008(4):48-62.

[5]孟帆,姚敬明,吴忻.猪群暴发猪瘟与蓝耳病混合感染的诊断与防制[J].山西农业科学,2010,38(6):66-68.

[6]曹晋蓉,占松鹤,王非,等.不同类型猪蓝耳病疫苗的免疫探讨[J].中国动物检疫,2009,26(9):56-57.

S858.28

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1673-4645(2014)10-0045-03

2014-09-09