Galileo全自动血型仪在血站血型检测中的应用

2017-11-16姜蓓蓓徐志华周军兵耿雪芹

临床输血与检验 2017年5期

姜蓓蓓徐志华周军兵耿雪芹

姜蓓蓓徐志华周军兵耿雪芹

目的评价Galileo全自动血型仪在批量检测ABO和RH血型中的应用价值。方法应用Galileo全自动血型仪检测无偿献血者标本，统计ABO、RH血型的首次判读情况，并对正反定型不一致从凝块、重度溶血、重度脂血等干扰因素角度进行分析。结果全自动血型仪对129 569例标本ABO 血型判读正确率为99.86%，对RH血型判读正确率达99.98%。凝块、重度溶血脂血标本均对仪器加样有干扰，影响结果判读；对抗体反应弱及正反定型不一致的标本，需手工复查、判读结果。结论全自动血型仪具有自动化、规范化、标准化、批量化等优点，能有效减少人为误差，可以发现亚型及盐水不规则抗体。

Galileo全自动血型仪血站血型检测

我国《献血者健康检查要求》（GB18467-2011）中规定，血站必须对献血者血液标本进行ABO及RH血型检测。血型鉴定常用方法有平板法和试管法，缺点是操作、结果判定需要人工参与，在标本量大时缺点尤为明显。输血技术的发展必然对血站实验室检测提出快速、准确和标准化、规范化、自动化的要求。为此，我国很多血液中心和血站相继采用全自动血型仪进行血型检测工作[1-3]，本站应用美国美德声科学技术公司的Galileo全自动血型仪对献血者进行ABO、RH血型检测及不规则盐水抗体筛查。现对血型仪的检测结果及影响因素进行统计分析，报告如下。

材料与方法

1 标本来源盐城市中心血站于2013年1月～2015年12月收集无偿献血标本共129 569例，每份标本留样5 ml，乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝。

2 仪器与耗材 Galileo全自动化血型仪；江苏康健公司生产的96孔的U型微孔板；IMMUCOR公司生产的磁性搅拌球，富友Fu-Ro100L纯水机。

3 试剂单克隆抗-A、抗-B血清（上海血液生物医药有限公司，批号20120814、20121020、20130510等）；RhD（IgM）血型定型试剂（美德声科学技术公司，批号NDMG06303；上海血液生物医药有限公司，批号20131105、20140129、20140523等）；A1、B、O红细胞（上海血液生物医药有限公司，批号20125339、20135303、20135307等）；血型鉴定及不规则抗体筛查质控品（北京金豪制药有限责任有限公司，批号20141103、20141215、20150201等）。

4 检测流程

4.1 微板布局：每个标本作6孔检测，依次是抗-A、抗-B、抗-D、Ac、Bc、Oc，每块板检测16个标本。准备生理盐水，抗-A、抗-B血清，RhD抗血清，A1细胞、B细胞、O细胞，红细胞试剂瓶中加入一颗磁珠确保细胞处于均匀悬浮状态。

4.2 进样与检测：将标本放入样本架进样（血型质控置于专用质控架上加样）开始检测。流程依次为：①加样针依次吸208 μl生理盐水（不加入板孔中，中间有空气柱隔开），吸标本血清50 μl加入反定型及盐水抗体筛查孔中，吸取2 ul标本红细胞与208 μl生理盐水，仪器自动稀释，加入正定型孔中。②吸取抗-A、抗-B、抗-D各10 μl，A1c、Bc、Oc试剂红细胞各12 μl加入相应各孔中。加样结束后通过自动传送带进行标本传送，并进行孵育、离心、振荡等步骤，应用CCD成像分析系统对每块板的每个反应孔扫描，作图像分析和电脑数据处理和判定。

4.3 结果判读及临界阈值（Threshold configure Tc）设置：正定型及Rh：不凝（Tc＜27）、可疑（Tc为27～70）、凝集（4+）（Tc＞70）；反定型及Oc：不凝（Tc＜2 5）、可疑（Tc为25～28）、凝集（正常）（Tc＞28）。对仪器无法判读的标本，分析原因并用手工复检血型或STAR加样、酶标仪检测，无法判定的标本送血型室进一步采用血型血清学试验确认。

结果

全自动血型仪检测结果及影响因素分析见表1～3。

表1 ABO血型检测结果统计

表2 RH血型检测结果统计

表3 影响血型仪检测判读因素

讨论

应用全自动血型仪共检测129 569例样本，ABO血型判读正确129 385例，首次判读正确率达99.86%（＞99%），与文献报道一致[4，5]。ABO血型有184例经血型仪无法判定最终结果，分析原因有以下几方面：①正反定型不符标本25例，其中18例反定型Ac、Bc反应弱，4例献血者血浆中抗-A、抗-B效价较弱，并发现3例B亚型（其中1例确证为稀有的Bhm血型，另2例未能明确定型）；②28例单纯Oc凝集，其中检出3例不规则盐水抗体抗-M，2例抗-Lea，2例抗-P1，其余21例均为无特异性冷抗体；③重度溶血21例，因溶血导致红细胞表面抗原较弱，引起正定型无法判读；④严重脂血标本23例，皆因血浆重度乳糜引起反定型无法准确判读；⑤87例凝块标本，导致血型仪正定型无法正确加样。

从表2可以看出，Rh血型一次准确定型129 542例，首次判读正确率达99.98%（＞99%），与文献报道一致[4，5]。RH血型有27例无法正确判读，其中6例RH血型无法判读，21例初筛RhD（–）经进一步确证为阳性，与抗-D凝集弱，导致血型仪判读结果落在可疑区间，分析原因可能与不同批号抗-D（IgM）效价有关。

根据全自动血型仪检测中遇到的问题，作者总结出以下几个解决方案：①标本质量是影响实验结果的重要因素，在标本留样、运输、保存、处理等环节应严格执行操作规程；②有凝块的标本，先用竹签剔除标本中凝块，再检测血型；③在标本接收过程认真核对，如发现有未抗凝完全的标本及时处理，避免血型的二次检测，也减少血型仪加样针堵塞的可能；④重度溶血标本，可采取剪血辫检测；⑤重度脂血标本，在成像扫描读取反定型结果时会有干扰，可采取人工判读；⑥微板在使用前，应仔细检查有无裂痕、灰尘、透光性，在放入板架时要仔细检查是否卡到位置，这直接影响后续实验是否中断；⑦每天根据标本数准备足够量试剂，检查试剂液面是否有气泡，气泡会影响加样准确性；⑧ABO血球要加入磁珠，可以保证实验运行过程血球一直处于均匀的悬浮状态，否则血球加样不准会直接导致反定型无法判读[6]；⑨因RhD试剂效价相对较高，程序多加了盐水清洗步骤防止残留RhD试剂，这样避免了对后续反应孔的干扰[7]；⑩要保证高精密仪器获得高精确的检测结果，完备的维护是必不可少的，除外表灰尘的擦拭，血型仪每天、每周、每月应做定期维护，除此，还需要定期进行加样臂加润滑油、加样管道浸泡等。

全自动血型仪实现了血型检测的全自动化，使得血型检测的操作更标准、规范和简便化，结果直观可靠、成像图清晰易判断，更易发现亚型及盐水不规则抗体，同时提高了工作效率，减轻了人员负担，降低了人为主观因素的影响。同时微机化管理可长期保存，便于备查及资料统计，具有很好的溯源性。

1 陈显，刘洲君，朱绍汶，等.全自动血型仪在血型检测中的应用[J].临床输血与检验，2014，16（3）：250-252.

2 靳冰，蒋学兵，刘慧珠等.STARIet IVD全自动血型仪在交叉配血中的应用评价[J].临床输血与检验，2015，17（6）：504-506.

3 王敏，王保龙，姚萍，等. 全自动血型仪在输血前检查中的应用[J].临床输血与检验，2011，13（2）：123-125.

4 胡宁克，陆欢平.全自动血型仪在血型检测中的应用及无法判读结果的原因分析[J].临床输血与检验，2015，17（6）：539-540.

5 李敏芳，刘峰.采用全自动血型仪正反定型不一致的原因分析及对策[J].临床输血与检验，2013，15（1）：54-56.

6 许婷婷，何明嫡，赵磊，等.Galileo全自动血型仪在血站的应用[J]. 国际检验医学杂志，2014，35（4）：484-485.

7 石绍川，刘东，李军，等.PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的初步研究[J].国际检验医学杂志，2014，11（22）：3131-3136.

R457.1

1671-2587（2017）05-0515-03

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.05.033

224005 江苏省盐城市中心血站