2种血液保存液对新鲜冰冻血浆Ⅷ因子含量影响分析

张雅莉 姚蓓 赵晓华

2种血液保存液对新鲜冰冻血浆Ⅷ因子含量影响分析

张雅莉 姚蓓 赵晓华

目的 探讨采用CPDA、ACD-B血液保存液的全血分离制备的新鲜冰冻血浆（FFP）中Ⅷ含量的差异并分析其相关因素。方法 随机抽取用CPDA（A组）、ACD-B（B组）保存的标量400 ml全血所分离制备的FFP各48份，测定FⅧ含量，比较2组FⅧ均值及合格率。结果 2组FⅧ含量的差异无统计学意义（P＞0.05），B组较A组FⅧ达到质量标准数量的合格率明显下降。结论 ACD-B组FⅧ含量达到质量标准数量的下降与保存液容量增多所致稀释性浓度下降、实际采血量等因素有关。

血液保养液 血液容量 Ⅷ因子

新鲜冰冻血浆（FFP）是采集后储存于冷藏环境中的全血，最好在6 h（保养液为ACD）或8 h（保养液为CPD或CPDA-1）内，但不超过18 h，将血浆分离出并速冻成固态的成分血[1]，其主要用途是补充凝血因子。FⅧ含量检测是FFP质量控制的重要指标，质量标准要求≥0.7 IU/ml，但是未标注血液保存液的种类，每100 ml血液两种配方保养液的添加量分别是14 ml（CPD）和25 ml（ACD）。为了解不同配方血液保养液对FFP融化后Ⅷ含量的影响，现对本中心2013年（CPDA）和2015年（ACD-B）质管科抽检的96份FFP中Ⅷ含量进行回顾性分析，报道如下。

材料与方法

1 材料 96份FFP均为本中心采集的400 ml标量全血，均未经过白细胞过滤，且严格按成分血质量要求制备。采集顺利、冷链监测正常、离心参数（4 100 g，加速9，减速6，4℃，12 min），全自动成分分离机制备200 ml血浆，速冻机（预温–50℃）在1 h内冰冻成固态，于–25℃以下冰柜保存。A组和B组从采集到制备成FFP经电脑控制时间均在6～8 h之内。

2 仪器及试剂 大容量冷冻离心机（德国 CRYOFUGE 6000i），全自动血液成分分离机（德国SEPAMATIC-SL（Ⅲ）），速冻机（卢森堡DOMETIC），–25℃以下冰柜（海尔）。

3 标本检测 根据试剂盒操作说明测定FⅧ含量。以凝固法（一步法）测定标本FⅧ活性，每批检测同时进行室内质控品监控，质控结果均在控，检测样品每毫升所含 FⅧ活性情况。

4 质量标准 GB18469-2012《全血及成分血质量要求》[1]：新鲜冷冻血浆Ⅷ因子含量≥0.7 IU/ml 。《血站技术操作规程》（2012版）6.1.6要求：“如果有75%的抽检结果落在质量控制指标范围内，可认为血液采集和制备过程受控”。

结 果

2种血液保养液对FFP 中FⅧ含量及合格率的影响见表1，2种血液保养液对全血容量的稀释对比见表2。

表1 2种血液保养液对FFP 中FⅧ含量及合格率的影响

表2 2种血液保养液对全血容量的稀释对比

讨 论

Ⅷ因子是不稳定的凝血因子，体外半衰期较短，多为8～12 h。血液离体后，血浆凝血因子接触异物表面会有不同程度的激活从而失去活性。易受到各种因素影响：如献血者个体差异、采集是否顺利、保养液与血液混匀的时间及混匀度、血量与保养液的比例、冷链温度控制、冷冻速率、采集到制备成冰冻血浆的总时间等。目前，采集、运输、保存、制备时间、冷链等因素对FⅧ因子的影响研究较多。有研究发现，400 ml全血采集时间大于13 min，所采集的全血不可用于制备FFP[2]；也有研究发现，15℃左右和37℃保存的血液，在6～10 h制备FFP中FⅧ因子随温度升高和保存时间延长，其活性下降速度显著[3]。从表1可见，2组FⅧ均值的差异无统计学意义，但ACD-B配方血浆中FⅧ合格率明显下降。分析原因有以下几点：①血液保存液容量。根据GB18469-2012《全血及成分血质量要求》，新鲜冰冻血浆中FⅧ含量要求≥0.7 IU/ml，以400 ml全血为例，CPDA保存液容量56 ml，ACD-B保存液容量100 ml，同样的全血使用ACD-B保存液，必然会导致稀释性浓度下降，从而使FⅧ浓度降低。文献报道指出[4]，采集HCT为42%的200 ml全血，若使用CPDA保养液，其原始因子浓度相比ACD-B保养液高出15%。若CPDA保养液全血制备的FFP中FⅧ含量是0.7 IU/ml，那么等容量ACD-B方的FFP中FⅧ含量是0.595 IU/ml，即为不合格。②实际采血量。 根据GB18469-2012《全血及成分血质量要求》，标示量±10%均为容量合格的全血。以400 ml标示量为例，容量在360～440 ml均为合格全血。为了解我血液中心每份400 ml全血的实际采血量，随机抽取2种配方血液保养液的全血各81袋，标示量均为400 ml，称重后求平均值，再根据公式[2]：血液容量=（毛重（g）–血袋重（g）–保养液重（g））/全血比重1.045 （g/ml），计算出实际平均采血量，ACD-B约为377 ml，CPDA约为393 ml。根据合格率≥75%的要求，计算出25%的平均实际采血量ACD-B约为364 ml，CPDA约为366 ml。以采集HCT为42%的400 ml全血为例，若以CPDA保养液全血制备的FFP中FⅧ含量是0.7 IU/ml，那么等容量ACD-B方的FFP中FⅧ含量是0.595 IU/ml，再换算到表2（ACD-B方）实际采血量364 ml，血量与总容量的百分比下降了9.3%，FⅧ含量从0.7降到0.540 IU/ml。因此，不合格机率就增大了。③制备成FFP的时间。GB 18469-2012《全血及成分血质量要求》新鲜冰冻血浆的术语定义中，从采血到冰冻成固态的时间ACD配方最好6 h，最长不超过18 h。电脑设置时间都是8 h，理论上讲时间对ACD配方FFP中FⅧ的含量可能有影响，但我们追溯了8袋不合格血浆，其从采血到制成FFP的时间均在6 h以内，故本次试验的制备时间未影响实验结果。

新鲜冰冻血浆是临床输血中非常重要的成分血，以采集HCT为42%的400 ml全血（CPDA方）为例，标准血浆量约为232 ml，但是制备中去白过程的损耗、病毒灭活过程的损耗，部分最终产品的容量会低于200 ml的标量，再考虑到白细胞滤器的易通过性，一些血站选择了ACD-B的全血袋。GB 18469-2012《全血及成分血质量要求》采用欧盟指南要求，欧盟标准[5]规定450 ml全血，保养液为63 ml，其血液保养液比例为10∶1.4，而国内ACD-B方400 ml全血，保养液为100 ml，血液保养液比例为10∶2.5，其对血浆中FⅧ含量降低的影响是不争的事实。建议再次修订标准时考虑保养液配方对FⅧ含量的影响，质管科增加成分用全血的质控项目，并制定内控标准，进一步提高临床疗效。

1 全血及成分血质量要求[S].GB18469-2012.

2 卫医政发.血站技术操作规程[S]. 2012.

3 王晓峰，张美萍，刘自安，等.不同温度、时间制备新鲜冰冻血浆中各种凝血因子含量研究[J]. 临床输血与检验，2015，17（2）：128-129.

4 龚裕春，莫琴，邱颖婕，等. 不同储存温度对于全血中Ⅷ因子含量的影响[J]. 中国输血杂志，2015，28（6）：710.

5 EDQM.Guide to the Preparation，Use and quality assurance of blood components[M]. 16th ed.Strasbourg：Council of Europe Publishing，2011.120.

Effect of Two Kinds of Blood Preservative Solution on the Content of Factor Ⅷ Recovery in Fresh Frozen Plasma

ZHANG Ya-li , YAO Bei , ZHAO Xiao-hua. Shanxi Blood Center, Xi'an 710061

Objective To investigate the fresh frozen plasma （FFP）VIII derived from the whole blood with CPDA or ACD-B blood preservative solution，content difference and analyze the relative factors. Methods 48 cases of FVIII derived from the whole blood with CPDA （A group） or ACD-B （B group） blood preservative solution were randomized for the determination respectively，compared the two groups of the mean value and qualified rate of FVIII. Results There was no significant difference between the 2 groups of FVIII content （P＞0.05），compared with the A group，the qualified rate of FVIII quality standards in B group decreased significantly. Conclusion The decline of qualified rate of FVIII quality standards in B group related to the related factors such as the decrease of the concentration of dilution caused by the increase of the liquid storage capacity，the actual blood collection and so on.

Blood preservative solution Blood volume FⅧ

R446.1

A

1671-2587（2017）05-0442-03

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.05.009

710061 西安，陕西省血液中心

张雅莉（1966–），女，陕西西安人，主任护师，学士，主要从事输血管理工作，（Tel）13892869269，（E-mail）1270430698@qq.com。

2017-01-30）

（本文编辑：王虹）