印楝素和藜芦碱对昆虫病原线虫存活及感染力的影响

颜 珣，林姻英，韩日畴

(广东省生物资源应用研究所，广东省动物保护与资源利用重点实验室，广东省野生动物保护与利用公共实验室，广州 510260)

印楝素和藜芦碱对昆虫病原线虫存活及感染力的影响

颜 珣，林姻英，韩日畴*

(广东省生物资源应用研究所，广东省动物保护与资源利用重点实验室，广东省野生动物保护与利用公共实验室，广州 510260)

测定了两种植物源杀虫剂印楝素、藜芦碱和对照杀虫剂高效氯氟氰菊酯在不同使用量下处理HeterorhabditisindicaLN2，H.indica212-2，SteinernemacarpocapsaeAll和S.pakistanense94-1等4个昆虫病原线虫品系2 d、1 w、2 w、3 w和4 w后对线虫存活和感染力的影响。3种杀虫剂对H.indicaLN2和S.pakistanense94-1存活的影响最小，藜芦碱和高效氯氟氰菊酯对H.indica212-2存活的影响小于对S.carpocapsaeAll存活的影响，印楝素则对S.carpocapsaeAll存活的影响小于对H.indica212-2存活的影响。藜芦碱和高效氯氟氰菊酯处理后线虫死亡率低于10%，对存活线虫对大蜡螟的感染力没有显著影响。印楝素在高使用量(8.10 g/ha)下对线虫的致死作用明显，且处理时间在3 w以上时显著提高线虫的死亡率，但是在田间推荐使用量(4.05 g/ha)及稀释使用量下对线虫的存活及感染力没有显著影响。结果表明，印楝素和藜芦碱以及对照药剂均可与4个品系的线虫共同施用于田间用于农业害虫的综合防控。

植物源杀虫剂；昆虫病原线虫；存活率；感染力；害虫综合防治

昆虫病原斯氏属Steinernema与异小杆属Heterorhabditis线虫是国际上新型的生物杀虫剂(Grewaletal., 2005)。昆虫病原线虫具有寄主范围广，对寄主特别是对土栖性及钻蛀性害虫具主动搜寻能力，对人畜、环境安全，易于大量培养，使用方便，在环境中可循环利用等优点，已广泛用于各种重要害虫的安全防治(Ehlers, 2005; Georgisetal., 2006; Kayaetal., 2006; Laceyetal., 2015)。在全球的生物农药市场中，昆虫病原线虫的市场销售额接近1800万美元，占生物农药总销售额的4%(CPL Business Consultants, 2010)。昆虫病原线虫在我国也已经商业化生产和销售，并应用于防治多种农林、草地、花卉以及卫生害虫(Kayaetal., 2006; 韩日畴等, 2008; 颜珣等, 2014)。

黄曲条跳甲Phyllotretastriolata属鞘翅目Coleoptera叶甲科Chrysomelidae，是严重为害十字花科蔬菜的重要害虫之一。多年连续大量施用化学农药导致黄曲条跳甲对多数杀虫剂产生不同程度的抗药性，也使得上市蔬菜农药残留量增大，直接危及人们的健康。因此，对黄曲条跳甲的控制必须改变以化学防治为主的防治方法，寻找可以替代化学药剂的防治因子(Yan, 2012)。前期研究筛选到H.indicaLN2，H.indica212-2，S.carpocapsaeAll和S.pakistanense94-1等4个品系的昆虫病原线虫对黄曲条跳甲幼虫具有高毒力，田间实验也进一步确定了昆虫病原线虫对黄曲条跳甲幼虫的防控效果(Xuetal., 2010; Yanetal., 2013)，但是黄曲条跳甲成虫的防控则主要依靠杀虫剂。对黄曲条跳甲进行防控时，可应用中低毒药剂防治成虫，同时应用昆虫病原线虫防治地下龄期，多种防控因子相结合的方法将提高对黄曲条跳甲的防控效果。此外，由于昆虫病原线虫在应用时会受到紫外线照射、干燥、缺氧等不利环境因素的影响，对叶面害虫的防治效果不够理想(Poinar, 1990; Barrett, 1991; Hominicketal., 1996)，尚无法完全取代化学农药，因此有必要测定一些化学药剂对昆虫病原线虫存活和感染力的影响，通过研究化学药剂与昆虫病原线虫的相容性，为将昆虫病原线虫与化学药剂共同应用到重要经济害虫的综合治理提供理论基础，以提高对害虫的有效控制，延缓害虫抗药性的产生，同时降低昆虫病原线虫的使用量，进而降低害虫防控的成本(Yanetal., 2012)。

本研究测定了2种植物源杀虫剂及1种菊酯类杀虫剂对防治黄曲条跳甲幼虫有应用潜力的4个昆虫病原线虫品系的存活及感染力的影响，为这几种杀虫剂与昆虫病原线虫共同施用于田间以综合防控黄曲条跳甲的成虫和幼虫提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 生物材料

1.1.1供试线虫

SteinernemacarpocapsaeAll，S.pakistanense94-1，H.indicaLN2和H.indica212-2的感染期幼虫(Infective juveniles, IJ)由广东省生物资源应用研究所以人工固体培养基培养获得(韩日畴等, 1997)。将收集并清洗后获得的感染期幼虫浓度调整为1000 IJ/mL，保存于三角瓶中，于100 rpm摇床保存。S.carpocapsaeAll，H.indicaLN2和H.indica212-2线虫保存于13℃±1℃，S.pakistanense94-1线虫保存于25℃±1℃，2周内使用。使用前检查线虫存活率，确保存活率大于90%。

1.1.2供试昆虫

大蜡螟GalleriamellonellaL.用人工饲料于28℃±2℃，60%相对湿度下培养(Han and Ehlers, 2000)。

1.2 供试药剂

供试药剂：植物源杀虫剂0.3%印楝素乳油(成都绿金生物科技有限责任公司，推荐使用量4.05 g/ha)；植物源杀虫剂满维0.5%藜芦碱可溶液剂(成都新朝阳作物科学有限公司，推荐使用量2100 g/ha)；对照杀虫剂佳田奔腾10%高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂(南通联农农药制剂研究开发有限公司，推荐使用量100 g/ha)。药剂使用量根据测定培养皿面积进行换算，药剂推荐使用浓度分别为印楝素500倍稀释液，藜芦碱1000倍稀释液，高效氯氟氰菊酯1500倍稀释液。实验设置4个药剂浓度，分别为推荐使用量(RC)，2倍推荐使用量(2RC)，1/10推荐使用量(1/10RC)和1/50推荐使用量(1/50RC)。

1.3 药剂对线虫存活的影响

在培养皿中测定药剂对线虫存活的影响(Yanetal., 2012)。在9 cm培养皿中加入10 mL浓度为1000 IJ/mL的线虫悬液，每皿加入相应浓度的药剂，使线虫与药剂混合液中的药剂使用量分别达到测定所需的量。每个处理设4个重复，以不加药剂的线虫悬液作为对照。封口膜封口，于25℃±1℃的黑暗培养箱中放置2 d，1 w，2 w，3 w 和4 w后，每个重复随机取0.1 mL线虫悬液检查线虫的存活情况，用探针碰触后无反应的线虫则被认为死亡。若有存活线虫，则继续测定药剂处理后存活线虫对大蜡螟的感染力。

1.4 药剂对线虫感染力的影响

在培养皿中测定药剂对线虫感染力的影响(张中润等, 2005; 赵国玉等, 2013)。在垫有两层中速定性滤纸的9 cm培养皿中挑入10头大蜡螟末龄幼虫，每皿滴入含有250条药剂处理过的活IJ的线虫悬液1.5 mL，封口膜封口，于25℃±1℃的黑暗培养箱中放置48 h和72 h后，检查大蜡螟死亡情况。继续孵育观察是否有线虫后代产生。以未经农药处理的线虫、未加线虫的不同使用量的农药处理的大蜡螟作为对照，同时以清水处理的大蜡螟作为阴性对照。

1.5 数据分析

实验用不同批次的线虫重复一次，经Paired samplet-tests检验无显著性差异(P>0.05)后取一次实验数据分析。农药处理后的同种线虫在不同时间点的死亡率以同一时间点的对照线虫死亡率进行校正，线虫感染力以大蜡螟死亡率表示，大蜡螟死亡率以清水处理的大蜡螟死亡率进行校正(Abbott, 1925)。百分比数值经开平方反正弦转换后，使用SPSS 16.0进行方差分析，多重比较采用Tukey检验各处理之间的差异显著性，显著水平P<0.05。

2 结果与分析

2.1 药剂对线虫存活的影响

2.1.1对照线虫的存活情况

对照线虫在25℃孵育4 w后的存活率见图1。昆虫病原线虫H.indica212-2，S.carpocapsaeAll和S.pakistanense94-1在25℃孵育3 w内存活率差异不显著，4 w后存活率显著下降(F≥4.903，df=4，15，P≤0.010)。H.indica212-2线虫3 w内存活率高于95.2%，4 w时存活率降至74.3%，S.carpocapsaeAll和S.pakistanense94-1线虫4 w后的存活率仍高于90.6%。H.indicaLN2线虫存活率则在3 w后明显下降，4 w后显著降低到84.9%(F=19.290，df=4，15，P<0.001)。

图1 Heterorhabditis和Steinernema昆虫病原线虫在25℃孵育不同时间后的存活率Fig.1 Survival rates of Heterorhabditis and Steinernema entomopathogenic nematodes after incubated at 25℃ for different periods注：不同字母表示同种线虫在不同孵育时间后的存活率之间存在显著性差异(Tukey’s test，P<0.05)。Note: Different letter(s) indicated significant differences of survival rates among different treated time of the same entomopathogenic nematode isolate (Tukey’s test, P<0.05).

2.1.2印楝素对线虫存活的影响

印楝素处理不同时间后线虫的校正死亡率见图2。印楝素处理的线虫死亡率受线虫品系(F=9.637，df=3，240，P<0.001)、药剂使用量(F=130.910，df=3，240，P<0.001)及处理时间(F=41.642，df=4，240，P<0.001)的显著影响，同时受线虫品系与药剂使用量(F=4.962，df=9，240，P<0.001)、线虫品系与处理时间(F=5.016，df=12，240，P<0.001)、药剂使用量与处理时间(F=6.649，df=12，240，P<0.001)、以及三者之间(F=1.936，df=36，240，P=0.002)的交互影响。印楝素对H.indicaLN2存活的影响最小，处理后线虫死亡率最低，对S.pakistanense94-1及S.carpocapsaeAll的影响次之，对H.indica212-2存活的影响最大，处理后线虫死亡率最高；药剂使用量增加到RC后，线虫死亡率随药剂使用量的增加而显著提高；药剂处理线虫3 w后线虫死亡率显著提高。

印楝素处理2 d后，随着印楝素使用量由RC提高到2RC，除S.pakistanense94-1外，另外3种线虫死亡率显著提高(F≥8.709，df=3，12，P≤0.002)。印楝素使用量提高到2RC时，S.pakistanense94-1和H.indicaLN2线虫的死亡率(<2.5%)显著低于另外2种线虫(F=24.853，df=3，12，P<0.001)，H.indica212-2和S.carpocapsaeAll死亡率接近10%。H.indicaLN2在药剂处理2 w内死亡率低于3.0%，3 w后药剂使用量RC及以上、4 w后药剂使用量1/10RC及以上时死亡率高于5.0%。S.pakistanense94-1线虫在印楝素处理1 w及更长时间后，死亡率也随印楝素使用量增加到2RC而显著提高(F≥6.498，df=3，12，P≤0.007)，且随着处理时间的延长而提高；在2RC处理2 w后死亡率增加至13.9%，处理4 w后死亡率提高至47.2%，为所有测定的线虫、药剂使用量及处理时间下最高的死亡率。S.carpocapsaeAll在药剂使用量1/10RC及以下时，处理4 w内死亡率均低于3.5%，药剂使用量RC及2RC处理下，除2 d时2RC处理下死亡率1.4%外，其他处理及时间下的死亡率均高于5.0%，在2RC处理4 w后死亡率最高达23.0%。H.indica212-2在药剂使用量低于RC处理1 w内死亡率低于5.0%，在其他处理时间及药剂使用量下死亡率均高于5.0%。

2.1.3藜芦碱对线虫存活的影响

藜芦碱处理不同时间后线虫的校正死亡率见图3。藜芦碱处理的线虫死亡率受线虫品系(F=7.150，df=3，240，P<0.001)，药剂使用量(F=7.345，df=3，240，P<0.001)及处理时间(F=3.101，df=4，240，P=0.016)的显著影响，受线虫品系与药剂使用量(F=2.879，df=9，240，P=0.003)、线虫品系与处理时间(F=5.558，df=12，240，P<0.001)、以及三者之间(F=1.507，df=36，240，P=0.039)的交互影响，而不受药剂使用量与处理时间的交互影响(F=1.229，df=12，240，P=0.264)。藜芦碱对H.indicaLN2和S.pakistanense94-1存活的影响最小，药剂处理后线虫死亡率最低，对H.indica212-2的影响次之，对S.carpocapsaeAll存活的影响最大；RC及2RC的药剂使用量处理显著提高线虫的死亡率，药剂处理线虫3 w后线虫死亡率显著提高。

藜芦碱处理线虫后，除H.indica212-2线虫在药剂处理2 w后(F=4.343，df=3，12，P=0.027)、S.carpocapsaeAll线虫在药剂处理3 w后(F=15.559，df=3，12，P<0.001)、S.pakistanense94-1线虫在药剂处理4 w后(F=6.879，df=3，12，P=0.006)外，其他线虫在不同处理时间下不同药剂使用量对同种线虫的死亡率没有显著性影响(F≤3.508，df=3，12，P≥0.049)。藜芦碱处理线虫2 d时，不同药剂使用量下不同线虫的死亡率之间存在显著性差异(F≥5.040，df=3，12，P≤0.017)，各线虫死亡率由低到高分别为S.pakistanense94-1，H.indicaLN2，H.indica212-2，S.carpocapsaeAll。其他处理时间下，除1 w时 2RC，2 w时RC及2RC，3 w和4 w时1/50RC(F≥3.607，df=3，12，P≤0.046)外，其他处理时间相同药剂使用量下不同线虫的死亡率之间没有显著性差异(F≤3.095，df=3，12，P≥0.068)。H.indicaLN2仅在2RC处理4 w后死亡率达到6.9%，其他药剂使用量和处理时间下死亡率均低于<5.0%；S.pakistanense94-1在1/50RC处理3 w和4 w后死亡率>5.9%，其他药剂使用量和处理时间下死亡率均<5.0%；H.indica212-2在药剂使用量高于1/10RC处理3 w和药剂使用量高于1/50RC处理4 w后，死亡率>6.9%；S.carpocapsaeAll死亡率相对较高，死亡率为0.3%-7.5%。

图2 印楝素处理Heterorhabditis和Steinernema昆虫病原线虫不同时间后的校正死亡率Fig.2 Corrected mortality rates of Heterorhabditis and Steinernema entomopathogenic nematodes after treated by azadirachtin for different periods注：1/50RC，推荐使用量的50倍稀释液；1/10RC，推荐使用量的10倍稀释液；RC，推荐使用量；2RC，2倍推荐使用量。不同大写字母表示相同处理时间下同种线虫在不同药剂使用量处理下的死亡率差异显著，不同小写字母表示相同处理时间下同个药剂使用量处理下不同线虫的死亡率差异显著(Tukey’s test，P<0.05)。相同处理时间下同种线虫在不同药剂使用量处理下的死亡率及相同药剂使用量处理下不同线虫的死亡率没有差异则无标记(Tukey’s test，P>0.05)。Note: 1/50RC, 50-time diluent of recommended rate; 1/10RC, 10-time diluent of recommended rate; RC, recommended rate; 2RC, 2-time of recommended rate. Different uppercase letter(s) indicated significant differences of survival rates of the same nematode isolates among different insecticide concentrations at the same treated period. Different lowercase letter(s) indicated significant differences of survival rates of different nematode isolates treated at the same insecticide rate at the same treated period (Tukey’s test, P<0.05). No labels were given if no significant differences were found in survival rates of the same nematode isolate treated by different insecticide rates or of the different nematode isolates treated by the same insecticide rates after the same treated period (Tukey’s test, P>0.05).

图3 藜芦碱处理Heterorhabditis和Steinernema昆虫病原线虫不同时间后的校正死亡率Fig.3 Corrected mortality rates of Heterorhabditis and Steinernema entomopathogenic nematodes after treated by veratrine for different periods注：1/50RC，推荐使用量的50倍稀释液；1/10RC，推荐使用量的10倍稀释液；RC，推荐使用量；2RC，2倍推荐使用量。不同大写字母表示相同处理时间下同种线虫在不同药剂使用量处理下的死亡率差异显著，不同小写字母表示相同处理时间下同个药剂使用量处理下不同线虫的死亡率差异显著(Tukey’s test，P<0.05)。相同处理时间下同种线虫在不同药剂使用量处理下的死亡率及相同药剂使用量处理下不同线虫的死亡率没有差异则无标记(Tukey’s test，P>0.05)。Note: 1/50RC, 50-time diluent of recommended rate; 1/10RC, 10-time diluent of recommended rate; RC, recommended rate; 2RC, 2-time of recommended rate. Different uppercase letter(s) indicated significant differences of survival rates of the same nematode isolates among different insecticide concentrations at the same treated period. Different lowercase letter(s) indicated significant differences of survival rates of different nematode isolates treated at the same insecticide rate at the same treated period (Tukey’s test, P<0.05). No labels were given if no significant differences were found in survival rates of the same nematode isolate treated by different insecticide rates or of the different nematode isolates treated by the same insecticide rates after the same treated period (Tukey’s test, P>0.05).

2.1.4高效氯氟氰菊酯对线虫存活的影响

对照药剂高效氯氟氰菊酯处理不同时间后线虫的校正死亡率见图4。高效氯氰菊酯处理的线虫死亡率受线虫品系(F=4.550，df=3，240，P=0.004)，药剂使用量(F=7.758，df=3，240，P<0.001)及处理时间(F=9.900，df=4，240，P<0.001)的显著影响，受线虫品系与药剂使用量(F=2.681，df=9，240，P=0.006)、线虫品系与处理时间(F=3.674，df=12，240，P<0.001)、以及三者之间(F=1.749，df=36，240，P=0.008)的交互影响，而不受药剂使用量与处理时间的交互影响(F=0.690，df=12，240，P=0.761)。高效氯氟氰菊酯对S.carpocapsaeAll线虫存活的影响显著高于其他线虫，药剂处理后线虫死亡率最高；2RC的药剂使用量处理显著提高线虫的死亡率，药剂处理线虫3 w后线虫死亡率显著提高。

高效氯氟氰菊酯处理2 d后，药剂使用量为2RC时，不同线虫死亡率之间存在显著性差异(F=9.963，df=3，12，P=0.001)，高效氯氟氰菊酯对线虫存活率影响大小依次为S.carpocapsaeAll，H.indica212-2，S.pakistanense94-1，H.indicaLN2；其他药剂使用量下不同线虫死亡率之间没有显著性差异(F≤2.798，df=12，240，P≥0.085)。处理1-3 w时，相同药剂使用量下不同线虫的死亡率不受线虫品系的显著影响(F≤2.340，df=3，12，P≥0.125)。处理4 w后，药剂使用量为1/50RC时，H.indicaLN2和S.carpocapsaeAll死亡率显著高于其他两种线虫(F=15.371，df=3，12，P<0.001)，而其他药剂使用量下不同线虫死亡率之间没有显著性差异(F≤3.300，df=3，12，P≥0.058)。对于同种线虫来说，药剂处理3 w内，同种线虫的死亡率不受药剂使用量的显著影响(F≤3.422，df=3，12，P≥0.053)；药剂处理4 w时，S.pakistanense94-1和H.indicaLN2线虫的死亡率不受药剂使用量的显著影响(分别为F=3.118和2.558，df=3，12，P=0.066和0.104)，而H.indica212-2和S.carpocapsaeAll线虫死亡率在2RC使用量下死亡率(>6.6%)显著提高(分别为F=4.409和5.583，df=3，12，P=0.026和0.012)。

2.2 药剂对线虫感染力的影响

药剂处理后测定存活线虫对大蜡螟的感染力，H.indicaLN2和S.carpocapsaeAll的存活线虫均可在48 h内致死测定的全部大蜡螟，大蜡螟死亡率100%。H.indica212-2在药剂处理2 w内，存活线虫均可在48 h内致死所有大蜡螟，药剂处理3 w和4 w后，存活线虫均可在72 h内致死所有大蜡螟。S.pakistanense94-1在药剂处理的2 w内，存活线虫均可在48 h内致死所有大蜡螟；药剂处理3 w后，除印楝素2RC处理(72 h大蜡螟死亡率60%)外，其他药剂处理后的存活线虫均可在72 h内致死所有测定的大蜡螟；药剂处理4 w后，除印楝素RC(72 h大蜡螟死亡率80%)外，其他药剂处理后的存活线虫均可在72 h内致死所有测定的大蜡螟。总体来说，药剂处理后仍存活的线虫保持了对大蜡螟的感染力，均可致死测定的大蜡螟，且能在大蜡螟死亡后的2-3 w内观察到下一代的感染期幼虫爬出大蜡螟虫尸，保持了线虫的繁殖力。

3 结论与讨论

将生物防治制剂如昆虫病原线虫与杀虫剂结合起来防控农业害虫是害虫综合治理(Integrated Pest Management, IPM)的核心策略(Koppenhöfer & Grewal, 2005)。这一策略不仅可以易化昆虫病原线虫的应用，通过降低昆虫病原线虫的使用量及成本，提高综合治理的效率，还可以降低对化学农药的依赖，延缓害虫抗药性的产生，减少对环境和人类的不良影响。本研究测定了2种植物源杀虫剂及对照化学杀虫剂商品处理4个具有防治黄曲条跳甲幼虫应用潜力的昆虫病原线虫品系不同时间后对线虫存活及感染力的影响，结果表明这3种杀虫剂在推荐使用量下对4个昆虫病原线虫品系的存活及感染力影响不大，可以与测定的 4个昆虫病原线虫品系共同施用于田间进行害虫防治。

图4 高效氯氟氰菊酯处理Heterorhabditis和Steinernema昆虫病原线虫不同时间后的校正死亡率Fig.4 Corrected mortality rates of Heterorhabditis and Steinernema entomopathogenic nematodes after treated by λ-cyhalothrin for different periods注：1/50RC，推荐使用量的50倍稀释液；1/10RC，推荐使用量的10倍稀释液；RC，推荐使用量；2RC，2倍推荐使用量。不同大写字母表示相同处理时间下同种线虫在不同药剂使用量处理下的死亡率差异显著，不同小写字母表示相同处理时间下同个药剂使用量处理下不同线虫的死亡率差异显著(Tukey’s test，P<0.05)。相同处理时间下同种线虫在不同药剂使用量处理下的死亡率及相同药剂使用量处理下不同线虫的死亡率没有差异则无标记(Tukey’s test，P>0.05)。Note: 1/50RC, 50-time diluent of recommended rate; 1/10RC, 10-time diluent of recommended rate; RC, recommended rate; 2RC, 2-time of recommended rate. Different uppercase letter(s) indicated significant differences of survival rates of the same nematode isolates among different insecticide concentrations at the same treated period. Different lowercase letter(s) indicated significant differences of survival rates of different nematode isolates treated at the same insecticide rate at the same treated period (Tukey’s test, P<0.05). No labels were given if no significant differences were found in survival rates of the same nematode isolate treated by different insecticide rates or of the different nematode isolates treated by the same insecticide rates after the same treated period (Tukey’s test, P>0.05).

植物源杀虫剂印楝素对黄曲条跳甲成虫具有显著的拒避作用，能够有效控制黄曲条跳甲的田间种群，对黄曲条跳甲三龄幼虫亦具有杀虫活性(侯有明等, 2003; 杨建云等, 2013)，在田间与S.carpocapsaeAll线虫共同施用时，可以在短时间内显著提高两者对黄曲条跳甲的防控效果(Yanetal., 2013)。印楝素在4.05 g/ha及稀释使用量下处理S.carpocapsaeAll线虫3 d对该线虫的存活及感染力没有影响(Yanetal., 2012)。本研究结果表明印楝素在4.05 g/ha下不仅对S.carpocapsaeAll线虫的毒力没有影响，对H.indica和S.pakistanense线虫的毒力也没有影响，但使用量提高到8.1 g/ha后，则会对线虫的存活率有显著的影响，线虫死亡率会随着印楝素处理时间的延长而显著提高。在田间共同施用印楝素及昆虫病原线虫用于黄曲条跳甲的防治时，由于印楝素通常是按照推荐使用量进行喷施，且从幼苗时期或移苗时喷洒药剂防治成虫到收成的时间一般是2-3 w，所以印楝素不会对线虫在田间对害虫的作用效果产生负面的影响，这对于同时应用昆虫病原线虫与另外两种杀虫剂藜芦碱和高效氯氟氰菊酯来说亦是如此。前期研究发现有2种印楝素商品对S.feltiae线虫的存活和感染力是没有影响的(Grewaletal., 1998)，综合我们的结果，表明印楝素与大部分常用于害虫防治的昆虫病原线虫品种是相容的，可以共同施用于田间防治害虫。

藜芦碱是一种具有触杀和胃毒作用的植物源杀虫剂，对人畜毒性低、残留低、药效持久，主要用于防治蔬菜上的地上害虫(安丽娜等, 2014)，有些商品化产品对黄曲条跳甲防控效果好。藜芦碱与昆虫病原线虫的相容性研究进展不多，目前仅有药剂虫蛾毙治(0.5%藜芦碱可溶性液剂)对S.longicaudumX-7线虫有亚致死作用的报道，药剂处理线虫时，线虫会由于药剂的麻痹作用而引起痉挛性或抽搐性活动，对外界物理刺激无反应或反映迟缓，丧失感染力(张中润等, 2006)。本研究所用的藜芦碱药剂是针对螨类防治的，在测定中对4个昆虫病原线虫品系的存活及感染力均没有显著影响，不同使用量下处理不同时长线虫死亡率均不高于10%，不影响存活线虫的感染力。

本研究使用的对照杀虫剂高效氯氟氰菊酯是是我国病虫害防治的重要农药之一(龚勇等, 2013)。菊酯类药剂对害虫的作用机理相近，对昆虫病原线虫的存活和感染力影响效果也相似，前期研究发现高效氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯等菊酯类药剂在推荐使用量下对S.carpocapsaeAll，S.longicaudumX-7，S.scapterisci，H.bacteriophoraH06，H.indicaLN2等昆虫病原线虫的存活及感染力均没有显著影响，仅在2倍的推荐使用量下对S.longicaudumX-7和H.indicaLN2线虫有影响(张中润等, 2005; Yanetal., 2012; 赵国玉等, 2013)，这与我们的测定结果是相一致的。而在Koppenhöfer & Grewal(2005)整理的数据中显示，高效氯氟氰菊酯和氟氯氰菊酯与S.carpocapsae线虫是不相容的。在不同的实验测定中，相同有效成分的不同商品化杀虫剂对同一种昆虫病原线虫的影响存在差异，这可能与不同商品中添加的助剂、商品中有效成分的浓度、昆虫病原线虫的品系、以及测定的方法有关。

本研究测定了不同杀虫剂在不同使用量下对4个昆虫病原线虫品系(包括3个不同的昆虫病原线虫品种和2个品系的H.indica线虫)存活及感染力的影响，其中对S.pakistanense这一种线虫与杀虫剂的相容性研究国内外均未见报道。研究结果表明所测定的印楝素、藜芦碱、高效氯氟氰菊酯等3种杀虫剂在推荐使用量及更低使用量下对昆虫病原线虫的毒力是没有影响的，可与昆虫病原线虫共同施用于田间，对黄曲条跳甲及其他蔬菜害虫进行综合防控。

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Effectsofazadirachtinandveratrineonthesurvivalandinfectivityofentomopathogenicnematodes

YAN Xun, LIN Yin-Ying, Han Ri-Chou*

(Guangdong Key Laboratory of Animal Conservation and Resource Utilization, Guangdong Public Laboratory of Wild Animal Conservation and Utilization, Guangdong Institute of Applied Biological Resources, Guangzhou 510260, China)

The effects of three insecticides at different application rates on survival and infectivity of four entomopathogenic nematode isolates,HeterorhabditisindicaLN2,H.indica212-2,SteinernemacarpocapsaeAll andS.pakistanense94-1, for different periods were evaluated in this study.H.indicaLN2 andS.pakistanense94-1 showed lower mortality rates than the other two nematode isolates after treated by the three insecticides. Mortality rates ofH.indica212-2 treated by veratrine and λ-cyhalothrin were lower than that ofS.carpocapsaeAll, while mortality rates ofH.indica212-2 treated by azadirachtin were higher than that ofS.carpocapsaeAll. Corrected mortality rates of the nematodes treated by veratrine and λ-cyhalothrin were lower than 10% and the surviving nematodes retained their infectivity to theGallerialarvae. When azadirachtin was applied at high rate of 8.10 g/ha and for treated periods of longer than 3 weeks, mortality rates of the nematodes were significantly increased. But when azadirachtin was applied at 4.05 g/ha and lower rates, survival and infectivity of the nematodes were not significantly affected. Our results showed that the three tested insecticides could be combined with the four isolates of entomopathogenic nematode in the field to control important agricultural insect pests.

Botanical insecticide; entomopathogenic nematodes; survival rate; infectivity; integrated pest management

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Q968.1;S476

A

1674-0858(2017)05-1015-10

广东省省级科技计划项目(2016A020210076，2014A020208075)；广东省自然科学基金项目(2017A030313157)；广东省科学院科研平台环境与能力建设专项资金项目(2016GDASPT-0305)；广东省科学院科技发展专项(2017GDASCX-0107)；国家重点研发计划试点专项(2017YFD0201200)

颜珣，女，1980年生，广东汕头人，博士，副研究员，研究方向为生物农药-昆虫病原线虫及其应用，E-mail：yanxun@giabr.gd.cn

*通讯作者Author for correspondence, E-mail: hanrc@giabr.gd.cn

Received: 2017-06-13; 接受日期Accepted: 2017-08-28