纳豆银杏紫苏软胶囊辅助降血脂人体试食试验研究

黄 妍， 李小莉， 张勋力， 张迎庆

(1 湖北工业大学生物工程与食品学院，湖北武汉430068；2 北京纳百恩食品有限公司，北京102200)

纳豆银杏紫苏软胶囊辅助降血脂人体试食试验研究

黄 妍1， 李小莉1， 张勋力2， 张迎庆1

(1 湖北工业大学生物工程与食品学院，湖北武汉430068；2 北京纳百恩食品有限公司，北京102200)

目的：考察人体服用含纳豆激酶、银杏叶提取物、紫苏籽油复配物软胶囊的安全性以及辅助降血脂的功效。方法：选择114例符合本试验标准的高血脂受试者进行试食试验(分别为：对照组59例，男29例，女30例；试食组55例，男29例，女26例)。试食组连续服用纳百恩牌辅助降血脂软胶囊45 d后，采用自身对照及组间对照进行评价。结果：试食组45 d后，血清总胆固醇(TC)，血清甘油三酯(TG)分别平均下降10.39%和16.03%，显著大于对照组的0.30%和0.32%，差异均有显著性(P< 0.01)；试食组血清总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)试验前后的自身比较结果，以及试验后与对照组的组间比较结果均具有显著性差异(P< 0.01)，而对照组试验前后自身TC、TG值差异均无显著性(P> 0.05)；试验后试食组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著高于对照组(P< 0.05)；试食组总有效率为47.31%，显著高于对照组有效率(P< 0.01)。试食者各项指标包括血常规、血液生化指标、肝肾功能及其他临床检查均未显示异常。结论：受试样品具有辅助降血脂功能，并对受试人群健康无损害作用。

纳豆激酶； 银杏提取物； 紫苏籽油； 人体试食试验； 辅助降血脂

纳豆中活性物质纳豆激酶的溶栓和降脂功效已得到人们的普遍重视[1-3]，银杏叶提取物中银杏黄酮、银杏内酯等[4-6]以及紫苏籽油中富含的亚麻酸[7-9]均是重要的辅助降血脂功能因子。本文对纳豆冻干粉、银杏叶提取物和紫苏籽油复配软胶囊在前期辅助降血脂动物实验基础上[10]进行了人体试食试验研究[11-13]，以考察人体服用含纳豆激酶、银杏叶提取物、紫苏籽油复配物软胶囊的安全性以及辅助降血脂的功效。

1 材料与方法

1.1样品及安慰剂

纳百恩牌纳豆银杏叶紫苏籽油软胶囊，北京纳百恩食品有限公司提供(以纳豆冻干粉、银杏叶提取物、紫苏籽油、蜂蜡为主要原料，每100 g含总黄酮1.5 g，α-亚麻酸40.3 g)，规格为0.5 g/粒，批号：20101011。室温保存。该产品已经过动物毒理学安全性评价和卫生学检验，并经动物实验证明具有辅助降血脂的功能[10]。安慰剂的规格及外观与功能样品相同。

1.2受试对象

本试验方案经过广西壮族自治区疾病预防中心保健食品人体试食试验伦理委员会批准，并在广西壮族自治区疾病预防中心完成。受试者纳入标准：受试者均签署过书面知情同意书，为单纯血脂异常的人群，正常饮食，在半年内进行2次采血，2次血清总胆固醇(TC)含量均≥ 5.2 mmol/L，或两次血清甘油三酯(TG)含量≥ 1.65 mmol/L[14]。

受试者排除标准：1)年龄小于18岁或超过65岁的；2)哺乳期或是妊娠期的妇女，以及对保健食品过敏的人群：3)患有严重疾病者，如患有精神病以及心、肝、肾和造血系统等疾病的：4)在近期内服用过可能会对结果判断产生影响的与受试功能有关的物品的；5)不符合纳入标准，没有按时按量服用受试样品，不能判定受试样品的功效或资料不全，影响到受试样品的功效或安全性判断者[15]。

1.3试验设计与分组方法

试验采用组间和自身两种对照设计。受试者根据血脂水平被随机地分为对照组和试食组，尽量减少性别、年龄、饮食等因素的差距，缩小对试验结果的影响，并通过均衡性检验对组间的可比性予以保证。试验初始采用每组60例，最终统计的有效人数每组不少于50例。

1.4剂量及试食时间

试食组每人每日服食2 次，每次2 粒；对照组采用安慰剂，服用方法与样品试食组的相同。均为45 d连续服食。

1.5观察指标

1.5.1安全性指标观察一般情况，包括受试者的睡眠、饮食、精神状况、大小便等，这些现象由受试者自身每天写入记录。试食试验前进行一次胸透、心电图、腹部B超检查。在试食试验前和试食试验结束后分别进行一次血常规检查、血压和肝、肾功能检查。

1.5.2功效性指标功效判定采用如下标准：当血清甘油三酯降低> 15%，总胆固醇降低> 10%；高密度脂蛋白胆固醇上升> 0.104 mmol/L，判定为有效；未达到此有效标准者，则判定无效。同时在测定中观察血清甘油三酯有效率、高密度脂蛋白胆固醇有效率、血清总胆固醇有效率及总有效率以进一步判定受试样品的功效[16]。

1.6数据统计方法

采用配对t检验进行自身对照资料比较，并采用成组t检验进行两组均数比较，两组均数比较需采用方差齐性检验，对于非正态分布或方差不齐的数据，需采用适当的变量转换，使其满足正态方差齐以后，用转换的数据来进行t检验；如果转换的数据依然无法满足正态方差齐的要求，则改用t'检验或秩和检验；如果方差齐，但是变异系数太大(例如CV> 50%)的应采用秩和检验。采用X2检验对有效率及总有效率进行检验。四格表总例数如果小于40，或总例数等于或大于40，但出现理论数等于或小于1时，即应改用确切概率法。

1.7结果判定方法

如果血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)两项指标均为阳性，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)指标不显著低于对照组，则可判定该受试品具有辅助降血脂功能作用。[17]

2 结果

2.1试食前受试者一般情况

试食试验开始时，将符合受试标准的志愿者分为两组，每组各60人。试食前试食组与对照组人群的一般情况(如年龄大小、精神状态、睡眠状况和饮食情况等)大体一致，两组试食志愿者的检查结果显示，包括腹部B超、心电图及胸部透视等均无明显异常，并且血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)均无显著性差异(P> 0.05)。试验过程失访人数为6例，最终有效统计人数为试食组55 例，对照组59 例，脱失率为5.0%。两组人群试验前基本情况见表1。

表1 试食前两组人群血清TC、TG、HDL-C含量比较

2.2样品对高血脂受试者功效性指标的影响

试食后，血清TC含量检测结果显示：试食组和对照组受试者分别降低10.39%和0.30%，不仅试食组受试者的血清TC含量试食前后有显著差异(P< 0.01)，而且试食组与对照组受试者的血清TC含量比较结果也有显著性差异(P< 0.01)；同样，血清TG含量检测结果显示：试食组和对照组受试者检测的TG含量分别降低16.03%和0.32%，试食组实验前后比较以及与对照组组间比较，其TG含量均有显著性差异(P< 0.01)。血清HDL-C含量检测结果显示：试验后试食组受试者血清HDL-C含量明显高于对照组受试者，差异具有显著性(P<0.05)。试食组辅助降血脂的总有效率为47.3%，结果显著高于对照组的有效率(P< 0.01)(表2-表5)。结果提示，该样品能够降低试食者的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量，说明该样品具有辅助降血脂功能。

表2 试食前后两组受试人群的血清TC含量比较

表3 试食前后两组受试人群的血清TG含量比较

表4 试食前后两组受试人群的血清HDL-C含量比较

表5 试食后两组受试人群辅助降血脂有效情况

2.3样品对安全性指标的影响

2.3.1样品对血压、心率的影响试食样品前后，两组受试者的心率和血压均处于正常值范围内(表6)，试食组受试者试食前后自身比较以及对照组受试者的组间比较均无显著性差异(P> 0.05)，结果表明样品试食对受试者的心率以及血压无不良影响。

表6 试验前后两组人群的血压及心率的检验结果

2.3.2样品对尿、便常规的影响除个别受试者的尿液中检出上皮细胞增多外，试食前后两组人群的尿液、粪便常规检查结果均正常，表明该样品对受试者的大、小便常规无不良影响。

2.3.3样品对血常规的影响由表7可见，试食前后，两组受试者的红细胞、白细胞、血小板及血红蛋白均处于正常值范围内，且试食组受试者试食前后血常规指标自身比较以及与对照组受试者的血常规指标组间比较，并无显著差异(P> 0.05)。结果表明该样品对试食受试者的血常规各项指标并无不良影响。

2.3.4样品对血液主要生化指标的影响表8结果显示，试食前后，两组受试者所检测的各项血液生化指标结果均在正常值范围内，试食组受试者试食前后血液主要生化指标自身比较以及与对照组受试者各指标组间比较差异均无显著性(P> 0.05)。表明样品对试食受试者肝、肾功能均无不良影响。

2.3.5不良反应试验过程中试食该胶囊的受试者均未出现诸如恶心、胀气、腹泻及过敏等不良反应。

表7 试验前后两组人群的血常规的检验结果

表8 试验前后两组人群的血液生化指标的检验结果

3 结论

对符合本试食试验受试标准的高血脂志愿者共进行了114例试食试验(包括：对照组59例，男29例，女30例；试食组55例，男29例，女26例)。其中试食组连续服用纳百恩牌辅助降血脂软胶囊45 d后，血清TC、TG分别平均下降10.39%和16.03%，显著大于对照组的0.30%和0.32%，差异均具有显著性(P< 0.01)；试食组受试者血清TC、TG试验前后自身比较以及试验后与对照组受试者血清TC、TG的组间比较结果均有显著性差异(P< 0.01)，而对照组受试者试验前后自身TC、TG值均不存在显著性差异(P> 0.05)；试验后试食组受试者血清HDL-C含量显著高于对照组(P< 0.05)；试食组总有效率为47.31%，显著高于对照组有效率(P< 0.01)。根据实验结果可见，该样品具有辅助降血脂的作用。

试食试验前后，试食受试者的尿便常规、血常规和血液生化指标等得到的检查结果都属于正常值范围内，此结果表明该样品对受试者身体健康无不良影响。试验中试食受试者人群均未出现如恶心、胀气、腹泻及过敏反应等不良反应。表明该样品的安全性符合要求。

[1] Kamiya S, Hagimori M, Ogasawara M, et al. In vivo evaluation method of the effect of nattokinase on carrageenan-induced tail thrombosis in a rat model[J]. Acta Haematologica, 2009, 124(4): 218-224.

[2] Dabbagh F, Negahdaripour M, Berenjian A, et al. Nattokinase: production and application[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2014, 98(22): 9199-9206.

[3] Weng Y, Yao J, Sparks S, et al. Nattokinase: an oral antithrombotic agent for the prevention of cardiovascular disease[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2017, 18(3): 523.

[4] 朱成义, 伊琼, 马金力,等. 银杏叶提取物对血脂、血液流变学及血小板的影响[J]. 临床内科杂志, 2016, 33(7): 490-492.

[5] 陈梅霞, 苏洁, 张玥莉, 等. 银杏叶提取物与银杏黄酮对高脂血症大鼠血脂水平影响的比较研究[J]. 中国新药杂志, 2014(7): 833-838.

[6] 万冬宇, 黄维义, 刘全未. 银杏叶提取物抗动脉粥样硬化的实验研究[J]. 现代预防医学, 2012, 39(15): 3908-3910.

[7] 孙书红, 孟宏涛, 惠增骞,等. n-3PUFA对高脂SHR大鼠血压及血浆游离脂肪酸谱的影响[J]. 现代生物医学进展, 2016, 16(2): 225-229.

[8] 戴毅, 闫慧慧, 王枫. α-亚麻酸和γ-亚麻酸对高脂血症人群的降血脂作用[J]. 现代生物医学进展, 2009, 9(23): 4492-4495.

[9] 韩浩. α-亚麻酸植物甾醇酯对动脉粥样硬化的保护作用及其机制研究[D]. 武汉：华中科技大学, 2015.

[10] 卜荣华, 李小莉, 张勋力,等. 纳豆银杏紫苏软胶囊辅助降血脂动物试验研究[J]. 湖北工业大学学报, 2016, 31(4): 93-96.

[11] 陈伟,母智深,李洪亮,等. α-亚麻酸、植物甾醇酯复方牛奶降血脂人体试食研究[J]. 食品工业科技,2013,34(11):353-360.

[12] 黄亦琦,赵鹏,杨辉,等. 葛明胶囊调节血脂作用临床试验[J]. 辽宁中医药大学学报,2011,13(8):41-43.

[13] 中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范[S/OL].[2010-02-26] http://www.sdfda.gov.cn/art/2010/2/26/art_206_15132.htm.

[14] 董捷, 张红城, 胡余明. 蜂胶软胶囊辅助降血脂人体试食研究[J]. 食品科学, 2008, 29(9): 557-559.

[15] 李玲, 储智勇, 袁波,等. 贻贝多糖胶囊辅助降血脂人体试食研究[J]. 中药材, 2011, 34(10): 1645-1647.

[16] 王辉, 于鹏, 任璐,等. 功能性牛奶辅助降血脂的人体试食研究[J]. 食品工业, 2015, 36(4): 214-217.

[17] 袁根良, 黄远英. 鲑鱼油软胶囊辅助降血脂的人体作用研究[J]. 食品安全质量检测学报, 2016, 7(4): 1568-1571.

[责任编校：张众]

ClinicObservationofFeedingTrialsontheAssistantHypolipidemicEffectofNattoGingkoPerillaOilSoftCapsules

HUANG Yan1, LI Xiaoli1, ZHANG Xunli2, ZHANG Yingqing1

(1SchoolofFoodandBioengin.),HubeiUniv.ofTech.,Wuhan430068,China; 2BeijingNABIOFoodLimitedCompany,Beijing102200,China)

The paper was to evaluate the assistant hypolipidemic effects and safety of mixture soft capsules of nattokinase, ginkgobiloba extract and Perilla seed oil on human feeding trials. It selected 114 patients with hypolipidemia in the trials (control group 59 patients, male: 29, female: 30; test group 55 patients, male: 29, female: 26). The test group were administrated NABIO assistant hypolipidemic soft capsules for 45 days, and then evaluated by self-control and inter-group control. After the treatments for 45 days, serum total cholesterol (TC) and triglyceride (TG) of the test group were decreased 10.39% and 16.03% respectively, significantly higher than that of the control group which were 0.30% and 0.32%, and the differences were significant (P< 0.01); The TC and TG of test group decreased significantly after treatments in self-control and inter-group control compared with the control group (P< 0.01). However，the TC and TG of control group had no significant difference in self-control after treatment (P> 0.05); the high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) of test group was significant higher than that of the control group after treatment (P< 0.05). The total efficiency of test group was 47.31%, significantly higher than that of the control group (P< 0.01). The indexes of blood routine, hepatic and renal function, blood biochemical test and other clinical test of test patients were not abnormal. The results suggest that the test sample has assistant hypolipodemic effects, and does no harm to test patients.

nattokinase; ginkgo biloba extract; perilla seed oil; human feeding trials; assistant hypolipidemic effects

2017-07-24

黄 妍(1993-)， 女，湖北武汉人，湖北工业大学硕士研究生，研究方向为生物化工

张迎庆(1969-)，女，湖北黄石人，工学博士，湖北工业大学教授，研究方向为生物制药

1003-4684(2017)05-0054-05

R153

A