肺结核患者血清MMP-2、TIMP-2与HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C水平变化及肺功能的相关性

刘 艳，马康康，黄泽智，李 辉，罗开军，王晓红，郭 靖，肖永一*

（1.邵阳医学高等专科学校，湖南 邵阳 422000；2.吉首大学医学院，湖南 湘西 416000；3.株洲市妇幼保健院检验科，湖南 株洲 412000）

肺结核患者血清MMP-2、TIMP-2与HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C水平变化及肺功能的相关性

刘 艳1，马康康2，黄泽智1，李 辉2，罗开军2，王晓红2，郭 靖2，肖永一3*

（1.邵阳医学高等专科学校，湖南 邵阳 422000；2.吉首大学医学院，湖南 湘西 416000；3.株洲市妇幼保健院检验科，湖南 株洲 412000）

目的探讨MMP-2和TIMP-2的表达水平及MMP-2和TIMP-2表达失衡与PTB纤维化愈合、肺通气-弥散功能的关系，及血清纤维化指标HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C水平变化的相关性。方法 ELISA检测MMP-2和TIMP-2含量；化学发光法检测HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C的含量；肺功能测定采用肺功能仪测定。结果 肺结核患者在未经治疗前，MMP-2和TIMP-2的含量均显著高于健康组，且TIMP-2的含量及比例也较高于健康组。同时血清纤维化指标HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C的含量也显著高于健康组，与肺功能的下降也有着一定的关系。结论 肺结核血清中MMP-2和TIMP-2的含量及其关系，TIMP-2的升高能够促进血清纤维化指标的积累。MMP-2和TIMP-2的关系失衡也会对肺功能造成一定的影响。

MMP-2；TIMP-2；血清纤维化指标；肺功能

目前国内外尚未见动态观察抗结核治疗过程中初治涂阳PTB患者血清MMP-2、TIMP-2的表达变化的相关研究报道。本项目完成后，将阐明MMP-2和TIMP-2的表达水平及MMP-2和TIMP-2表达失衡与PTB纤维化愈合、肺通气-弥散功能的关系，阐明MMP-2及TIMP-2与血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）水平变化的相关性，可为临床监测PTB患者病情变化和判断抗结核治疗效果提供新的血清标记物。探讨肺结核抗纤维治疗的临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究材料

实验组：选取湘西地区2015年5月～2016年5月60例根据胸片、痰细菌学检查等确诊的肺结核且经过治疗好转的患者。其中男性38例、女性22例，年龄（38±15岁）。对照组：经过检查肺功能正常的20例志愿者，男女各10例。

1.2 方法

1.2.1 标本收集：分别抽取60例肺结核患者入院抗结核治疗前、好转（好转界定指标：临床症状好转同时痰菌阴性，或胸部CT病变吸收≥1/3，或空洞闭合，或空洞缩小≥1/3）以及对照组患者的空腹静脉血5 mL，立即2500 rpm离心10 min，吸取血清-70℃保存待测[1]。

1.2.2 方法及仪器：ELISA检查MMP-2和TIMP-2含量（ELISA试剂盒采购于R&D公司）；化学发光法检测HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C含量；采用德国耶格公司生产的肺功能仪检查受试者肺功能[2-4]。

1.3 统计学分析

所有样本采用SPSS 13.0统计分析软件进行统计学处理，数据均用“±s”表示，多组间比较采用方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 血清中MMP-2和TIMP-2含量

肺结核患者治疗前及好转过程中MMP-2和TIMP-2含量均显著高于肺功能正常组，且治疗前的TIMP-2的比例低于健康组。随着治疗，结核的好转，MMP-2/TIMP-2逐渐接近正常水平。见表1。

表1 血清中MMP-2和TIMP-2含量及MMP-2/TIMP-2

2.2 血清中HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C含量

血清纤维化指标HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C的含量均值见表2。结核患者治疗前的各项指标均显著差异与肺功能正常组。好转组相对于治疗前，各项指标均有所下降，其中PCⅢ、LN无统计学意义；HA、Ⅳ-C具有显著性差异。

表2 血清纤维化指标HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C的含量

2.3 肺功能的测定

肺结核治疗前，好转及健康组肺弥散功能（DLCO）与常规肺功能测定指标见表3，由结果可见，肺结核治疗前及好转组的肺功能各项指标相对于健康组均有所下降。

表3 肺弥散及常规功能测定结果比较

3 讨 论

肺结核患者由于结核杆菌的感染，造成肺部组织的病变。受到机体免疫反应的影响。细胞外基质ECM大量降解，这之间伴随着MMP-2和TIMP-2的表达。MMPS是体内降解ECM的主要酶系，TIMP-2能特异地与MMP-2及其前体（proMMP-2）以1:1非共价键结合，抑制其活性[5-7]。ECM的大量沉积是组织纤维化中的主要表现，其中Ⅳ型胶原的过度沉积是导致组织结构改建继而形成组织纤维化的主要因素之一[8]。

实验结果显示，肺结核患者在未经治疗前。MMP-2和TIMP-2的含量均显著高于健康组，且TIMP-2的含量及比例也较高于健康组。同时血清纤维化指标HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C的含量也显著高于健康组；与肺功能的下降也有着一定的关系。这说明MMP-2和TIMP-2的含量关系与血清纤维化指标有着密不可分的关系。结核病患者中TIMP-2显著升高，同时其与MMP-2的含量关系也出现失衡，造成MMP-2的活性大大的降低，造成ECM不能够得到有效的降解， IV型胶原（Ⅳ-C）等过度沉积，导致组织结构改建继而形成组织纤维化。PTB患者的转归中一般伴有肺部病变组织的纤维化，但若纤维组织严重增生或此类增生得不到恰当的抑制，则会引弥漫性肺间质纤维化。由好转组的各项指标数据可见MMP-2和TIMP-2含量均有升高，但其含量关系有所改善，血清纤维化指标也有所降低。因此在肺结核的治疗过程中应当改善MMP-2和TIMP-2的含量关系。

而在肺功能指标上，肺结核患者的肺功能有明显的下降，而且治疗后的效果不明显，这可能是肺结核造成肺组织的纤维化，造成其有效面积减少，削弱了弥散功能及通气功能。而这种损伤是难以可逆的。因此肺结核患者应当尽早治疗。

综上所述，肺结核血清中MMP-2和TIMP-2的含量及其关系，TIMP-2的升高能够促进血清纤维化指标的积累。MMP-2和TIMP-2的关系失衡也会对肺功能造成一定的影响。

[1] 张朋,朱学彬,李世明,等.肺结核患者抗结核治疗前后血清MMP9表达水平变化的临床研究[J].标记免疫分析与临床,2015,(02):155-157.

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Correlation between serum levels of MMP-2, TIMP-2,HA, PCⅢ, LN, Ⅳ-C and pulmonary function in patients with pulmonary tuberculosis

LIU Yan, MA Kang-kang, HUANG Ze-zhi, LI Hui, LUO Kai-jun, WANG Xiao-hong,GUO Jing, XIAO Yong-yi
(1.Shaoyang Medical College, Hunan Shaoyang 422000, China; 2.Jishou University School of Medicine,Hunan Xiangxi 416000, China; 3.Zhuzhou Maternal and Child Health-Care Hospital, Hunan Zhuzhou 412000, China)

ObjectiveTo investigate the relationship between the expression of MMP - 2 and TIMP-2 levels and express imbalances and pulmonary tuberculosis fibrosis healing, pulmonary ventilation-dispersion function,and serum fibrosis indexes such as HA, PCⅢ, LN and Ⅳ-C level chang. The contents of MMP-2 and TIMP-2 were detected by ELISA. Methods The contents of HA, PCⅢ, LN, Ⅳ-C were detected by chemiluminescence.Lung function instrument was used for determination of lung function. Results Before the treatment, pulmonary tuberculosis patients’ MMP-2 and TIMP-2 levels were significantly higher than those in healthy group, and the content of TIMP-2 and the proportion is also higher than the healthy group. At the same time, serum fi brosis indexes such as HA, PCⅢ, LN and Ⅳ-C were significantly higher than those in the healthy group, and also correlated with the decline of lung function. Conclusion The content of MMP-2 and TIMP-2 in the serum of pulmonary tuberculosis and the relationship between them and the increase of TIMP-2 can promote the accumulation of serum fi brosis markers. The imbalance between MMP-2 and TIMP-2 also has a certain effect on lung function.

MMP-2; TIMP-2; serum fi brosis markers; pulmonary function

R446

A

ISSN.2095-8242.2017.39.7538.02

湖南省科技惠民计划项目（2014SK4060）

肖永一，男，硕士

本文编辑：李新刚