绣球菌工厂化栽培优良菌株的筛选研究*

雷 萍，吴亚召，张文隽，杜双田，杜 芳

（1.陕西省微生物研究所，陕西 西安 710043；2.西北农林科技大学，陕西 杨凌 712100）

绣球菌工厂化栽培优良菌株的筛选研究*

雷 萍1，吴亚召1，张文隽1，杜双田2，杜 芳1

（1.陕西省微生物研究所，陕西 西安 710043；2.西北农林科技大学，陕西 杨凌 712100）

观察不同绣球菌菌丝培养特性和出菇情况，筛选获得优良的栽培菌株。比较不同绣球菌菌株菌丝生长情况、子实体农艺性状和产量情况，其中绣12菌丝生长势最佳，生长速度快，生长周期短，子实体农艺性状佳，产量高，平均单产量为198.4 g。试验结果表明绣球菌菌株绣12为优良栽培菌株。

绣球菌；优良菌株；筛选

绣球菌Sparassia crispa(Wulf.)Fr.，又名绣球蕈、绣球菇，属担子菌亚门（Basidiomycotina） 异隔担子菌纲（Heterobasidiomycetes） 非褶孔菌目（A－phyllophorales） 绣球菌科（Sparassidaceae） 绣球菌属（Sparassia）[1]。在日本、韩国、美国、加拿大、澳大利亚等国和我国河北、吉林、黑龙江、陕西、云南、福建等地自然分布。夏秋季于云杉、冷杉或松林及混交林中分散生长。子实体中等至大形，肉质，菌柄基部似根状并与树根相连[2]。由1个粗壮的柄上生出许多分枝，枝端形成无数曲折的瓣片，形似巨大的绣球而得名。绣球菌资源蕴藏量比较稀少，被誉为“万菇之王”，是珍稀名贵药食两用菌。

绣球菌子实体肉质洁白细嫩，营养丰富。据分析每100克干品中含有多糖2.6 g、还原糖1.46 g、粗蛋白质12.9 g、粗脂肪1.5 g、粗纤维13.7 g[3]。绣球菌含有大量β-葡聚糖，具有提高人体免疫力和机体造血功能，抗癌、防癌的特殊功效[4-6]。子实体中含有的抗氧化物质、维生素C、维生素E等，作为美容产品有效成分，对祛除黑色素沉淀等肌肤问题具有良好的功效。因其具有超高的激活免疫能力，在日本有“梦幻神奇菇”之称。普通蘑菇生长在阴面，而绣球菇每天需要10 h以上的光照，是世界上唯一的“阳光蘑菇”。在欧美、日本极为畅销，价格昂贵。为了适应工厂化栽培技术发展，选育优良绣球菌品种，对提高其产量和品质具有重要意义。笔者通过对本研究室分离和引进的3个绣球菌菌株进行筛选，以期获得高产、稳产、商品性状优良的菌株。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株

试验用绣球菌菌株来自陕西省微生物研究所和东北食药用菌研究所等，其中绣12来自陕西微生物研究所微生物菌种资源中心第三研究室，绣396来源于东北食药用菌研究所，绣HB来源于河北。

1.1.2 培养基

（1） 母种培养基

综合PDA马铃薯200 g（煮汁）、葡萄糖20 g、蛋白胨5 g、酵母膏2 g、硫酸镁1 g、磷酸二氢钾0.5 g、琼脂20 g，定容至1 000 mL。

（2） 原种培养基

木屑81%、麦麸10%、KH2PO40.5%、石膏0.5%、白糖1%、黄豆粉5%，含水量62%。

（3） 栽培配方

木屑78%、麸皮20%、蔗糖1%、石膏1%、石灰0.5%，含水量62%～65%。

1.2 方法

1.2.1 母种培养特性试验

为了保证试验中各菌株菌龄和接种量一致，将供试菌株在母种培养基上进行活化。然后取0.5 cm2大小菌种块，接种到综合PDA培养基平板中央，（25±1）℃恒温培养。试验设3个重复，培养过程中记录菌丝每天生长速度、长势、菌落边缘特征等。当生长速度最快的菌株即将长满平板时取出，测定菌落直径，对菌丝生长速度进行差异显著性分析。

1.2.2 原种培养特性试验

按原种培养基配制，采用规格15 cm×28 cm×0.05 cm的聚乙烯菌袋，每袋装干料320 g，高压灭菌。冷却至室温后，接入绣球菌菌种，每个品种接种15袋，于（25±1） ℃恒温箱中进行培养，待菌丝定植后，观察菌丝长势、密度等，并记录满袋时间，进行差异显著性分析。每个品种重复3次。

1.2.3 优良品种筛选试验

按栽培培养基配制，采用17 cm×33 cm×0.045 cm的聚乙烯菌袋装料，每袋装干料350 g，高压灭菌。冷却至室温后，接入绣球菌菌种，每个品种接种50袋，于（25±1） ℃恒温箱中进行培养，待菌丝长满后继续培养10 d～15 d后进行出菇管理。出菇温度控制在16℃～20℃，空气相对湿度90%～95%，待子实体成熟时即可采收。试验期间记录菌丝长势、满袋时间、现蕾时间、子实体性状、产量等。

1.3 统计学处理

采用Excel进行统计分析，多组比较，新复极差检验法检验。

2 结果与分析

2.1 不同绣球菌母种培养特性分析

3株绣球菌菌株在母种培养基上的生长情况见表1。

表1 3株绣球菌菌株在母种培养基上生长情况Tab.1 Growth situation of three Sparassis crispa strains in mother culture medium

从表1可以看出，绣12在母种培养基上菌丝生长粗壮、旺盛，颜色洁白，接种后萌发快，菌丝边缘生长整齐，菌丝日均生长速度最快1.38 mm·d-1；其次是绣396，菌丝日均生长速度为1.32 mm·d-1，菌丝生长较旺盛，边缘整齐、浓密、洁白；最差的是绣HB，菌丝生长势较弱，边缘较整齐，菌丝日均生长速度1.26 mm·d-1。3株菌菌丝生长速度差异显著，平板培养过程中绣396菌株有1皿污染外，其余菌株未发生污染现象。

2.2 不同绣球菌原种培养特性分析

3株绣球菌菌株在原种培养基上的生长情况见表2。

表2 3株绣球菌菌株在原种培养基上生长情况Tab.2 Growth situation of three Sparassis crispa strains in original culture medium

不同绣球菌菌株在原种培养基上的长势差异不明显，除绣HB菌丝生长势一般、生长速度稍慢，71 d长满袋；其余2株菌绣12、绣396生长差异不明显，菌丝长势均很好，生长速度较快，分别62 d、64 d菌丝即可长满袋。原种培养过程中均未出现污染现象。

2.3 绣球菌栽培优良菌株筛选试验

3株绣球菌菌株子实体农艺性状以及产量的分析见表3。

表3 3株绣球菌菌株子实体农艺性状和产量分析Tab.3 Analysis on agronomic traits and yield of three Sparassis crispa

从表3中可以看出，绣球菌品种绣12和绣396在栽培培养基中菌丝生长势均很好，满袋天数分别为74 d、76 d，绣12继续培养46 d后长出子实体原基，子实体乳白色，至成熟时子实体直径平均17.3 cm，单产量最高为198.4 g；绣396培养48 d后出现子实体原基，子实体黄白色，成熟时子实体直径平均16.5 cm，单产量次之，为179.2 g；绣HB菌丝生长一般，86 d菌丝长满菌袋，需继续培养56 d菌袋出现子实体原基，子实体颜色乳白色，成熟时子实体直径平均14.9 cm，单产量最差为139.3 g。菌丝培养和出菇培养过程中均未出现污染现象。

3 结论

菌种是影响食用菌生产的重要因素，只有优良的菌种才能在不增加原料投入的情况下增加菇农经济效益，获得优质高产的产品，降低栽培风险，因此筛选优良栽培菌种是食用菌栽培方面极其重要的环节。

本试验通过对3株不同绣球菌菌株的菌丝生长情况、栽培特性、子实体农艺性状和产量等进行比较，筛选出优良栽培菌株绣12。菌丝生长势好、旺盛浓密，培养期间无污染现象，原种满袋时间为62 d，栽培袋满袋时间为74 d，继续培养46 d现蕾；子实体乳白色，直径17.3 cm，平均单产量198.3 g。

[1]黄年来.中国大型真菌原色图鉴[M].北京：中国农业出版社，1998.

[2]卯晓岚.中国大型真菌[M].郑州：河南科学技术出版社，2000：410.

[3]黄建成，李开本，林应椿，等.绣球菌子实体营养成分分析[J].营养学报，2007，29（5）：514-515.

[4]Tada R,Harada T,Nagi-miura N,et al.NMR characterization of the structure of a β-(1→3)-D-glucan isolate from cultured fruit bodies of Sparassis crispa[J].Carbohydr Res,2007,342(17):2611-2618.

[5]Nameda S,Harada T,Miura NN,et al.Enhanced cytokine synthesis of leukocytes by a beta-glucan preparation,SCG,extracted from a medicinal mushroom,Sparassis crispa[J].Immunopharmacol Immunotoxicol,2003,Vol.25(3):321-335.

[6]Harada T,MiuraI NN,AdachiI Y.IFN-gamm induction by SCG,1,3-beta-Dglucan from Sparassis crispa,in DBA/2 mice in vitro[J].Interferon Cytokine Res,2002,22(12):1227-1239.

Study on Screening of Sparassis crispa Strains Suitable for Cultivation

LEI Ping1,WU Ya-zhao1,ZHANG Wen-jun1,DU Shuang-tian2,DU Fang1
(1.Shaanxi Microbioogy Rereach Institute,Xi’an 710043,China;2.North West Agriculture and Forestry University,Yangling 712100,China)

To obtain Sparassis crispa strains suitable for cultivation,the mycelial growing states,fruiting body morphology and yields of several S.crispa strains were compared.The results showed that Xiu12 presented the best cultivation properties,such as good growing state of mycelium,faster growth rate,shorter growth cycle,good agronomic trait for fruiting body,high yield and average yield for single cultivated bag being 198.4 g.Therefore,Xiu12 was a fine strain.

Sparassis crispa;fine strain;screening

S646.9

A

1003-8310（2017）00-0024-03

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.05.006

陕西省科技统筹创新工程计划项目（2015KTTSNY03-09）。

雷萍（1966-），女，专科，副研究员，长期从事食（药）用菌研究方面的工作。E-mail:wuleiping2529@126.com

2017-07-18