探析放射状垂直取材法如何客观地反映胃癌异质性

河南省漯河市第二人民医院（451191）黄孝宇

1 资料与方法

1.1 一般材料 收集2013年3月～2016年2月间共44例胃癌，术前未经放化疗的胃癌根治性标本，年龄24～78岁，中位年龄57岁。根据1997年国际抗癌联盟（UICC）的TNM分期标准，I～II期21例、III～IV期23例；N024例，N120例。

1.2 取材 每例标本沿大弯侧剪开，洗去污物，4%中性缓冲甲醛固定过夜。同时常规取材和放射状垂直取材，放射状垂直取材就是从肿物中心放射状切开分别取材，包括肿物的边缘，逐项进行记录。自动脱水，石蜡包埋切片，HE染色，镜检。癌组织异质性的判读标准：两种以上组织类型；病理分级差异；核级别差异；癌细胞密度差异；浸润淋巴细胞种类及数量差异；纤维组织差异等。

1.3 免疫组化检查 ①试剂：HER2：鼠抗人单克隆抗体，克隆号：B68; Ki67:7B11。试剂盒选用即用型免疫组织化学（IHC）二步法Envision广谱染色试剂盒及DAB显色试剂盒，均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。②方法：依据HE结果分别挑选不同蜡块、不同区域，进行HER2、Ki67染色。③HER2结果判定：0～1+视为阴性，2+～3+视为阳性。Ki67的判断：表达阳性的细胞染色强度均呈中等以上强度，故仅用阳性细胞占所观察同类细胞的百分比做为评价指标，细胞阳性率<10%为阴性表达；>10%为阳性表达。

2 结果

2.1 常规HE镜检中两种取检方法的异质性检出的不同表现 总体χ2=58.619，P<0.01，说明两种取材方法在癌组织的异质性的检出上有着明显的差异。放射性垂直取检的方法有着更加明显的优势，更能全面完整的反映出肿瘤本身的异质性。详见附表。

2.2 HER2、Ki67在胃癌中的异质性表现 统计学方法采用χ2检验，P<0.05时认为有显著性差异。在44例胃癌中，Her2阳性表达率为29.5%(13/44)，Ki67阳性表达率为68.2%（30/44）。Her2的表达与淋巴结转移、病理分级、临床分期间无明显差异(P>0.05)。Ki67的表达与淋巴结转移、病理分级及临床分期有明显差异，有统计学意义(P<0.01)。

3 结论

常规的HE诊断是胃癌精准诊断的前提和基础。胃癌又具有明确的异质性。放射状垂直取检方法是将病材中有浸润可能、异质性区域重点取材的一种方法，这将是病理检查的一次革命。有重点的有选择的取材，于是就有了取材间隔的问题，有的间隔1cm，有的2cm，有的0.5cm。具有临床以及教学意义的病材就详细的取检，而临床常规工作就按照规矩来，既客观又不浪费资源，让胃癌的诊断更精准更有价值。

HER2定位于人17号染色体，该受体蛋白与HER家族成员及其配体之间相互作用，通过细胞间信号传导来调节细胞生长、生存、分化及增殖[1]。该基因有着明显的个体差异性，即便是同一个癌组织标本也具有很强的区域的差异性，这种区域的差异性是由其遗传异质性导致的，同时它也是导致抗HER2治疗不理想的重要原因。HER2遗传异质性包括肿瘤内异质性和肿瘤间异质性。Ki67是目前应用最广泛的细胞增殖标记，Ki67与胃癌细胞凋亡和增殖相关，癌组织分化差、异质性明显，淋巴结转移，Ki67表达越强。

附表 常规HE镜检中两种取检方法的癌组织异质性检出的不同表现(例)

郭建波[2]等检测67例胃癌标本中的HER2蛋白，其过表达率为22.4%，而在癌旁正常组织无表达。宋岩等报道83例晚期胃癌患者的HER2过表达和基因扩增的患者分别为25例(30.1%)和29例(34.9%)。寸丽英报道85例胃癌患者HER2蛋白过表达与胃癌的位置、临床分期有关。王钦波研究发现Her-2强阳性表达率与性别、年龄、肿块大小、浸润程度、淋巴结转移以及远处转移无关。

精准的诊断是精准治疗的第一步，是基础与关键，同时又是不断进步与发展的。