重楼同属植物南重楼的药理研究

李洪梅 孙建辉 康利平 霍海如 李小芹 黄圆圆 陈敏 黄璐琦

[摘要]重楼为常用中药材，目前资源紧缺，除法定品种云南重楼和七叶一枝花外，同属多种近缘植物均被收购作为重楼入药。该研究比较了重楼同属植物南重楼和药典收载的云南重楼、七叶一枝花在抗炎、止血、改善血流变方面的药理活性，以其扩大重楼药用资源范围，保护重楼野生资源，满足市场需求。研究表明云南重楼、七叶一枝花、南重楼具有抗炎、止血和改善血流变作用，可明显抑制角叉菜胶致足肿胀，缩短小鼠出血时间和凝血时间，明显降低大鼠急性血瘀模型各切变率下的全血黏度；云南重楼、南重楼可明显抑制小鼠腹腔毛细血管通透性的增高。

[关键词]南重楼； 抗炎； 止血； 改善血流变

Pharmacodynamics study on Paris vietnamensis

LI Hongmei1， SUN Jianhui1， KANG Liping2， HUO Hairu1， LI Xiaoqin1，

HUANG Yuanyuan2， CHEN Min 2*， HUANG Luqi2*

（1. Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China；

2. State Key Laboratory of Daodi Herbs， National Resource Center For Materia Medica， China Academy of

Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China）

[Abstract]Paris is commonly used in traditional Chinese medicine and its resource is in shortage， a variety of related plants are acquired as Paris. This study compared pharmacological activity in antiinflammatory and hemostatic and blood rheology of P. vietnamensis with pharmacopoeial Paridis Rhizoma to expand its range of Paris medicinal resources and protect wild resources of Paris and meet market demand. The experimental study showed that P. vietnamensis and P. polyphylla var. yunnanensis and P. polyphylla var. chinensis had antiinflammatory and hemostatic effect and improved blood rheolog. They can significantly inhibit rat foot swelling induced by carrageenan and short the bleeding time and clotting time and reduce the blood viscosity in rats with acute blood stasis model， P. vietnamensis and P. polyphylla var. yunnanensis can inhibit mice capillary permeability induced by acetic acid.

[Key words]Paris vietnamensis； antiinflammatory； hemostatic effect； improve blood rheolog

重樓为常用中药材，目前国内市场以重楼药材为组方的中成药品种有60余种，如云南白药、宫血宁、热毒清、复方蛇胆川贝散等，重楼供应主要依赖野生资源，由于需求巨大，加之人工栽培再生周期长， 重楼资源紧缺。除法定品种云南重楼和七叶一枝花外，同属多种近缘植物均被收购作为重楼入药。按照李恒老师分类系统，我国有19 种重楼属植物[1]，包括南重楼Paris vietnamensis （Takht）HLi、长柱重楼P forrestii （Takht） HLi等。本研究在前期文献调研、资源调查、化学成分研究基础上，比较了重楼同属植物南重楼和药典收载的云南重楼、七叶一枝花在抗炎、止血、改善血流变方面的药理活性，以其扩大药用重楼资源范围，保护重楼野生资源，满足市场需求。

1材料

11受试药物云南重楼水提物，含生药083 g·mL-1；七叶一枝花水提物，含生药047 g·mL-1；南重楼水提物，含生药097 g·mL-1，由中国中医科学院中药资源中心提供。云南白药，云南白药集团股份有限公司产品（批号 ZAA1522）。

12动物ICR小鼠，SPF级，体质量18～22 g，雌雄各半；SD大鼠，SPF级，体质量180～200 g，雄性，均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[动物生产许可证号 SCXK（京）20120001]。小鼠和大鼠饲育在屏障环境下[实验动物使用许可证号 SYXK（京）20130035]。

13试剂角叉菜胶，Sigma公司产品（批号 021M0038V）；伊文思兰，Solarbio公司（批号50813022）；冰醋酸，北京化工厂（批20100603）；盐酸肾上腺素注射液，天津金耀药业有限公司（批号 1412021）。endprint

14仪器PV200足趾容积测量仪，成都泰盟科技有限公司产品；AVE型半自动生化分析仪，爱威科技实业有限公司产品；SA5000自动血流变测试仪，北京赛科希德科技发展有限公司产品。

2方法

21对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响[2]分组：选取健康SD大鼠，SPF级，雄性，体质量180～200 g，将大鼠按体质量随机分组，分别为模型对照组、云南重楼、七叶一枝花、南重楼水提物（162 g·kg-1）和云南白药组，每组10只。

给药：各组分别灌胃给予相应药物，模型对照组给予相同体积的蒸馏水（10 mL·kg-1），每天1次，连续给药2 d。

观察指标：试验当天先用足趾容积测定仪测定大鼠右后足跖容积为基础值，末次药后于大鼠右后足跖中央皮内注射1%角叉菜胶溶液致炎01 mL，测定致炎后1，2，4 h的肿胀值（致炎后与致炎前足趾容积之差）。

22对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响[3]分组：选取健康ICR小鼠，SPF级，体质量18～20 g，将小鼠按体质量随机分组，分别为模型对照组、云南重楼、七叶一枝花、南重楼水提物各高、中剂量组（330，165 g·kg-1）和云南白药组，每组10只，雌雄各半。

给药：各组分别灌胃给予相应药物，模型对照组给予相同体积的蒸馏水（20 mL·kg-1），每日1次，连续给药3 d。

观察指标：末次药后1 h，尾静脉注射05%依文思兰液（10 mL·kg-1），10 min后腹腔注射07%醋酸（10 mL·kg-1），再10 min后腹腔注射5 mL生理盐水注射液，处死小鼠，轻揉腹部50次，剪开皮肤，用吸管吸取腹腔液，离心，取上清在波长590 nm下测吸光度。

23对出血时间的影响[4]分组、给药同22。观察指标：末次药后1 h，采用剪尾法，将小鼠固定，以利剪将小鼠尾尖3 mm处剪断，待血液自行流出开始计时，此后每隔30 s用滤纸吸去血滴1次，至血液自然停止为止，即为出血时间。

24对凝血时间的影响[4]分组、给药同22。观察指标：末次药后1 h，采用玻片法，摘去一侧眼球即有血液流出，于载玻片两端各滴1滴血，血滴直径约5～10 mm，立即开始记时，此后每隔30 s用干燥针头自血滴边缘向里轻轻挑动1次，至针头能挑起纤维蛋白丝为止，即为凝血时间。

25对急性血瘀模型血液流变性的影响[5]分组：选取健康SD大鼠，SPF级，雄性，体质量180～200 g，将大鼠按体质量随机分组，分别为模型对照组、云南重楼、七叶一枝花、南重楼水提物（162 g·kg-1）和云南白药组，每组10只。各组分别灌胃给予相应药物，模型对照组给予相同体积的蒸馏水（10 mL·kg-1），每天1次，连续给药7 d。采用注射肾上腺素结合冰水浸泡致大鼠急性血瘀模型，测定1，5，50，100，200 s-1切变率下的全血黏度。

26统计分析实验数据均以±s表示，应用SPSS 170统计软件进行分析，t检验进行组间比较，P<005时为显著差异。

3结果

31对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响云南重楼、七叶一枝花、云南白药在致炎后1～4 h均可明显抑制角叉菜胶致足肿胀，南重楼在致炎后4 h可明显抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀，与模型对照组相比具有显著性差异，表明云南重楼、七叶一枝花、南重楼水提物均具有抗炎作用（表1）。

32对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响云南重楼（330，165 g·kg-1）、南重楼（330 g·kg-1）及云南白药可明显抑制小鼠腹腔毛细血管通透性的增高，其平均吸光度明显低于模型对照组，与模型对照组相比具有显著性差异，表明云南重楼和南重楼具有抗炎作用（表2）。

33对出血时间和凝血时间的影响云南重楼、七叶一枝花、南重楼（330，165 g·kg-1）及云南白药均可明显缩短小鼠出血时间和凝血时间，与模型对照组相比具有显著性差异，表明云南重楼、七叶一枝花、南重楼具有止血作用（表3）。

34对急性血瘀模型血液流变性的影响注射肾上腺素结合冰水浸泡可导致大鼠急性血瘀模型，模型组1，5，50，100，200 s-1切变率下的全血黏度较正常组明显增高，云南重楼、七叶一枝花、南重楼及云南白药可明显降低各切变率下（1，5，50，100，200 s-1切变率下）的全血黏度，与模型对照组相比具有显著性差异（表4）。

4讨论

重楼为常用中药材，目前资源紧缺，同属多种近缘植物均被收购作为重楼入药。王艳芳等[6]对重楼属植物滇重楼和南重楼2个种进行显微结构鉴别，研究表明滇重楼和南重楼这2个种的根、根茎、茎、叶显微结构相似；段志剛等[7]采取原植物、性状、显微结构、理化鉴定方法，对南重楼进行了系统的生药学研究；黄芸[8]等从南重楼分离到11种甾体皂苷类化合物，体外筛选出部分甾体皂苷类化合物具有细胞毒作用。现代药理研究表明重楼具有抗肿瘤、消炎、抑菌、镇静、镇痛、止血等作用等多种药理作用[9]。本实验采用抗炎、止血、血液流变学实验比较了重楼同属植物南重楼和药典收载重楼的药理活性差异。研究表明云南重楼、七叶一枝花、南重楼具有抗炎、止血和改善血流变学作用，可明显抑制角叉菜胶致足肿胀，缩短小鼠出血时间和凝血时间，明显降低大鼠急性血瘀模型各切变率下的全血黏度；云南重楼、南重楼可明显抑制小鼠腹腔毛细血管通透性的增高。因此，在进一步化学成分、临床研究基础上，南重楼有望被收载作为正品重楼使用。

[参考文献]

[1]李恒. 重楼属植物[M]. 北京： 科学出版社，2013： 7.

[2]李仪奎. 中药药理实验方法学[M]. 上海：上海科技出版社，1991：299.

[3]陈奇. 中药药理研究方法学[M]. 北京：人民卫生出版社，1993： 305.

[4]刘彬，张海涛，刘慧明，等. 鲎素对小鼠出血时间和凝血时间的影响[J]. 广东医学院学报，2015，33（1）：49.

[5]李伟霞，黄美艳，唐于平，等. 大鼠急性血瘀模型造模方法的研究与评价[J]. 中国药理学通报，2011，27（2）：1761.

[6]王艳芳，唐玲，李荣英，等. 滇重楼和南重楼的显微结构研究[J]. 云南中医学院学报，2012，35（4）：40.

[7]段志刚，刘江，夏从龙. 南重楼的生药学研究[J]. 大理大学学报，2016，1（4）：29.

[8]黄芸，崔力剑，王强，等. 南重楼Paris vietnamensis活性物质的分离与鉴定[J]. 药学学报，2006，41（4）：361.

[9]何明生，李秀. 重楼药理作用的研究进展[J]. 世界中医药，2012，7 （6）：579.

[责任编辑吕冬梅]endprint