某规模化猪场三种重大疫病血清抗体检测结果分析

王玉超，李保全＊ ，胡东方，古金元，陈同煜，彭 涛，王文武，马梓承，孟凡亮，刘照虎，刘思当，肖一红

(山东农业大学，山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室，山东 泰安 271000）

某规模化猪场三种重大疫病血清抗体检测结果分析

王玉超，李保全＊ ，胡东方，古金元，陈同煜，彭 涛，王文武，马梓承，孟凡亮，刘照虎，刘思当，肖一红

(山东农业大学，山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室，山东 泰安 271000）

河北省某规模化猪场为了解猪重大疫病疫苗免疫效果，实时监测其群体免疫状况，优化疫苗免疫程序，及时发现存在问题及潜在风险，应用韩国金诺(MEDIAN)公司猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病gE抗体检测试剂盒，对该猪场送检的71份血清进行抗体检测。结果显示，猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病gE抗体总体阳性率分别为49.30%、52.11%和4.22%。基于检测结果，对该猪场免疫状况进行了分析，并提出来免疫整改建议，为该场的猪病免疫程序制定提供了科学指导。

猪重大疫病；抗体检测；免疫程序；猪病防控

养猪生产中，猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病等是当前危害养猪业的重要疾病。就目前我国的实际情况，免疫仍是猪场疫病防控的主要手段，而免疫效果存在众多影响因素，因此抗体的检测显得尤为重要。适时进行抗体检测，可以评估猪群的免疫状态与疫苗免疫效果，为疫苗的选择、免疫程序的制定提供科学依据，从而更好地指导猪病防控的临床实践工作。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 样品采集与处理 2017年2月中旬，于河北地区某存栏生产母猪约800头规模猪场通过前腔静脉采集血样71份，凝血处理，分离血清后置于-20 ℃冰箱冻存待检，采样情况见表1。

表1 采样信息

1.1.2 主要试剂及仪器

MEDIAN公司猪瘟病毒（CSFV）抗体检测试剂盒、猪蓝耳病病毒（PRRSV）抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病病毒gE（PRVgE）抗体检测试剂盒，Eppendorf移液器，酶标仪。

1.2 实验方法

1.2.1 检测方法 严格按照试剂盒说明书操作。

1.2.2 结果判定 CSFV：阻断率≥40.0%为阳性，阻断率＜40.0%为阴性；PRRSV：S/P 值≥0.4为阳性，S/P值＜0.4为阴性；PRVgE：S/N＞0.6为阴性，S/N≤0.6为阳性。若猪场使用伪狂犬病基因缺失疫苗，一旦检出伪狂犬病 gE 阳性则说明有伪狂犬病野毒感染。

2 结果与分析

2.1 抗体检测结果

经检测，猪瘟、猪蓝耳病和猪伪狂犬病gE抗体整体阳性率分别为49.30%、52.11%和4.22%，猪伪狂犬病gE抗体检测存在3份阳性血清，汇总结果见表 2。

表2 检测结果

2.2 猪瘟抗体检测结果及分析

农业部印发的《2013 年国家动物疫病强制免疫计划》指示，存栏猪的猪瘟抗体阳性率大于 70%为免疫合格。母猪作为猪场的核心生产猪群，理论上其猪瘟抗体阳性率应为100%，但出乎意料的是在本次检测中，母猪猪瘟抗体阳性率仅有50%，有一半的母猪（14头）抗体不合格，怀疑存在免疫操作或者疫苗稀释保存问题，也可能猪群带毒率较高，存在免疫耐受。产房仔猪抗体平均值25.64%，离散度91.72%，阳性率23.08%，更是远远低于猪瘟抗体合格的标准。因为该场母猪猪瘟抗体阳性率只有50%，产房仔猪从母体获得的猪瘟母源抗体水平自然不会很高，仔猪得不到母源抗体的有效保护。保育猪的猪瘟抗体平均值、离散度和阳性率分别为35.56%、66.36%和41.67%，说明一免之后保育猪的猪瘟抗体水平有了一定程度的提升，但该水平的猪瘟抗体仍不足以让保育猪获得有效保护。育肥猪的猪瘟抗体平均值、离散度和阳性率分别为59.26%、44.94%和72.22%，其猪瘟抗体水平基本上符合强制免疫规定的合格率，说明二免后的猪瘟抗体达到了抵抗野毒感染的水平。总的来说，该场猪瘟抗体整体阳性率仅有49.30%，远低于强制免疫规定的合格率，仅有育肥猪的猪瘟抗体阳性率达到70%以上，其他猪群均为易感猪群，存在极大的猪瘟感染风险。猪瘟抗体检测结果见表3。

表3 猪瘟抗体检测结果

2.3 猪蓝耳病病毒抗体检测结果及分析

猪蓝耳病免疫良好的猪场，抗体阳性率在70%～80%，离散度在25%左右，S/P值在0.8～1.2之间，并且保证S/P值大于2.5的猪只占猪群5%以下。该场产房仔猪、保育猪、育肥猪和母猪的猪蓝耳病抗体阳性率分别为7.69%、25.00%、94.44%和57.14%，猪场一直没有免疫过猪蓝耳病疫苗，但是抗体检测阳性，说明已有部分猪只感染过猪蓝耳病病毒。从产房仔猪到保育猪再到育肥猪，猪蓝耳病抗体阳性率在明显升高，且S/P值＞2.5的比例从无到有，怀疑感染点应该在保育猪时期，并之后在猪群中持续感染，并且保育猪和育肥猪猪蓝耳病毒抗体S/P值＞2.5比例均大于5%，需要密切关注猪群的状态，比如，保育猪有无发热、喘、逐步消瘦的情况，特别是育肥猪有无突然死亡，部分死亡猪只耳、口鼻、尾巴发紫的现象，一旦发现要及时送诊，以确定有无猪蓝耳病发生。猪蓝耳病病毒抗体检测结果见表4。

表4 猪蓝耳病病毒抗体检测结果

2.4 猪伪狂犬病gE抗体检测结果及分析

猪伪狂犬gE抗体一旦检测出阳性，就说明有野毒感染。从检测结果中可以看出，产房仔猪、保育猪和育肥猪中各有一例猪伪狂犬gE抗体阳性，说明其感染了伪狂犬野毒。猪伪狂犬病毒gE抗体检测结果见表5。

表5 猪伪狂犬病毒gE抗体检测结果

3 讨论与建议

通过检测数据的分析发现，该猪群重大疫病的免疫状况不容乐观，存在许多问题。第一，母猪群猪瘟病毒抗体水平远低于国家强制免疫计划的要求，存在较大的感染压力，并且不能够通过初乳给仔猪提供足够的保护力，仔猪也存在较大的猪瘟感染风险；第二，猪群没有免疫猪蓝耳病毒疫苗，但猪场各猪群均为猪蓝耳病抗体阳性，育肥猪猪蓝耳病抗体阳性率高达94.44%，且保育和育肥猪群S/P异常值比例大，怀疑猪蓝耳病毒已经在猪群中开始蔓延；第三，该场所检测的母猪的伪狂犬野毒抗体均为阴性，在目前伪狂犬野毒的普遍感染情况下，说明该猪场做过伪狂犬的净化，并且母猪群仍保持阴性，但是保育猪和育肥猪群中各存在一例伪狂犬野毒抗体阳性，说明曾经感染过伪狂犬野毒。

根据以上发现的问题，建议猪场采取以下措施：第一，由于母猪群猪瘟病毒抗体水平异常偏低，建议严格检查疫苗保存、稀释及免疫操作是否存在问题，然后全群母猪立即补免一次猪瘟疫苗，一个月之后重新做一次抗体检测，注意观察母猪抗体水平是否上升，抗体没有上升的母猪应怀疑是否存在免疫抑制，或存在免疫耐受；第二，猪群存在猪蓝耳病病毒感染，并且异常S/P值较高，猪群可能存在低致病毒株感染，应时刻注意猪群状态，可以尝试猪群免疫经典毒株猪蓝耳病疫苗。第三，保育猪和育肥猪有个别伪狂犬野毒感染的情况，由于伪狂犬野毒抗体可以通过母猪初乳传给哺乳仔猪，并能够存在10～14周，建议猪场查找伪狂犬野毒抗体呈阳性仔猪的母猪，采该母猪血液进行伪狂犬野毒抗体检测，如果阳性，建议淘汰，并加强生物安全措施，以防病毒在猪群中蔓延。

2017-05-21）

本研究由国家重点研发计划项目“猪重要疫病免疫防控新技术研究”子课题“规模化猪场科学合理的免疫程序的研究（2017YFD0500605）”支持；山东省“双一流”奖补资助。

李保全