西宁地区成人紫癜性肾炎患者血浆 及尿液ET-1水平及临床意义 ※

贾顺莲，刘谊蓉，金 磊，汪晓玲

(西宁市第一人民医院，青海 西宁 810000)

西宁地区成人紫癜性肾炎患者血浆及尿液ET-1水平及临床意义※

贾顺莲，刘谊蓉，金 磊，汪晓玲

(西宁市第一人民医院，青海 西宁 810000)

目的观察西宁及西安地区成人紫癜性肾炎血浆、尿液内皮素-1水平变化特征，分析其在判定西宁患者肾脏受损程度相关指数域。方法选择西安地区和西宁地区单纯性紫癜性肾炎患者各30例，健康人群各30例，共120例，分为西安地区肾脏损害组(18例)和无肾脏损害组(12例)、西宁地区肾脏损害组(19例)和无肾脏损害组(11例)作研究组，两地区健康人群组作健康对照组。采用 ELISA方法测定血浆及尿液内皮素 - 1含量，并行组间差别分析。常规检测24小时尿蛋白定量，设定为亚组进行相关性分析。采用SPSS 22.0软件行统计学分析。结果1. 西宁地区紫癜性肾损害组、无肾损害组血浆、尿液内皮素-1与于西安地区相比较，结果具有统计学差异(P<0.05 )。2.西宁地区紫癜性肾损害组的血浆内皮素-1水平与无肾损害组相比较，结果无明显统计学差异(P>0.05 )。3.西宁地区紫癜性肾损害组的尿液内皮素-1水平高于无肾损害组，但结果无统计学意义(P>0.05 )。进一步分析西宁地区紫癜性肾损害组中不同程度尿蛋白定量水平尿液内皮素-1的变化，结果显示：1.尿蛋白定量>1.0 g/24 h时尿液内皮素-1表达明显高于尿蛋白定量0.15 g～1.0 g/24 h和尿蛋白定量<0.15 g/24 h 时，存在统计学意义(P<0.05)；尿蛋白定量0.15 g～1.0 g/24 h 组尿液内皮素-1水平高于尿蛋白定量<0.15 g/24 h组，存在统计学意义(P<0.05 )。2.经Pearson相关性分析显示，紫癜性肾损害组患者尿液内皮素-1水平与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.597，P<0.007 )。结论高海拔地区紫癜性肾损害组患者血浆、尿液内皮素-1水平的变化具有地域性特点，要视具体情况判断不同程度紫癜性肾炎的肾脏受损情况。

成人 过敏性紫癜性肾炎 蛋白尿 血 尿 内皮素-1

过敏性紫癜性肾炎(Henoch-schonlein’s purpura nephritis，HSPN )是过敏性紫癜(Henoch-schonlein’s purpura，HSP)最常见的一个合并症。有报道认为HSPN病理特点主要为系膜细胞增生伴上皮细胞和内皮细胞增生[1]，内皮素-1(enaothelin -1，ET-1)可能介入了HSPN肾脏损伤进程，不同水平的ET-1在HSP患儿肾脏组织的表达均不同，高ET-1水平时在肾脏组织中的表达也会增高。近年来关于ET-1与HSPN之间关系的研究越来越多，但多见于对儿童患者的研究[2-4]。之前也有研究报道ET-1的代谢在高原地区缺氧环境下会受到较大影响，存在地域性特点。本研究选择典型的高海拔地区[西宁，海拔2260m，大气压为78.0 kPa(580mmHg)，大气氧分压为16.4kPa)]病例，对西宁地区成人HSPN患者血浆、尿液ET-1的表达水平，及尿ET -1水平与尿蛋白的相关性及临床意义开展研究，分析其在判定西宁患者肾脏受损程度相关指数域。

1 对象与方法

1.1 研究对象

随机收集2014年9月至2016年1月西安地区(第四军医大学附属西京医院)初发成人HSPN患者及健康病例各30例，西宁地区(西宁市第一人民医院)各30例，两地区共120例。两地区健康对照组分别为30例、HSP组分别为30例。HSP组分为西安地区肾脏损害组(18例)和无肾脏损害组(12例)、西宁地区肾脏损害组(19例)和无肾脏损害组(11例)作研究组，两地区健康人群组作为健康对照组。西宁地区HSP组平均年龄31.67±16.31岁，对照组平均年龄32.17±10.08；西安地区HSP组平均年龄32.27±10.16 岁，对照组平均年龄35.7±6.82，组间相比较无统计学意义(P>0.05)。

1.2 研究方法

留取被研究者清晨空腹血液标本5 mL注入生化管内，尿液标本10 mL注入无菌中段尿管中，离心(2000r/min)15 min后将血浆及尿上清液注入离心管内，保存于-80 ℃冰箱，统一送检。血浆、尿液ET-1采用固相免疫法检测并记录，试剂盒由武汉华美公司生产。比浊法常规检测24小时尿蛋白定量。

2 结果

2.1 尿液、血浆 ET-1水平测定结果

两地区无肾损害HSP组、HSPN组、健康对照组成人尿液ET-1水平测定结果见表1。两地区无肾损害HSP组、HSPN组尿液ET-1水平与该地区健康对照组尿ET-1水平相比较，差异有统计学意义(P<0.05 )。两地区HSPN组尿液ET-1水平相比较，差异有统计学意义(P<0.05 )。两地区无肾损害HSP组尿液ET-1水平相比较，差异有统计学意义(P<0.05 )。两地区无肾损害HSP组、HSPN组、健康对照组成人血浆ET-1水平测定结果见表1。两地区无肾损害HSP组、HSPN组血浆ET-1水平与该地区健康对照组血浆ET-1水平相比较，差异有统计学差异(P<0.05 )。两地区HSPN组血浆ET-1水平相比较，差异有统计学意义(P<0.05 )。两地区无肾损害HSP组相比较，差异有统计学意义(P<0.05 )。

Table 1 ET-1 levels of adult Plasma and urine in both HSPN group，HSP without renal damage group and healthy control group in the two regions(±s)

☆：与西安健康组比较P<0.05；◆：与西安无肾损害HSP组比较P<0.05；△：与西宁健康组比较P<0.05；▼：与西安HSPN组比较P<0.05.

2.2 西宁地区HSPN组24小时尿蛋白定量与尿液ET-1变化水平

进一步设定亚组分析两地区HSPN组中24小时尿蛋白定量与尿液ET-1水平变化的相关性，肾损害程度根据患者24小时尿蛋白定量的不同分成三组：24小时尿蛋白定量<0.15 g组(Ⅰ组)，共4例；24小时尿蛋白定量0.15～1.00 g组(Ⅱ组)，共8例；24小时尿蛋白定量 >1.0 g组(Ⅲ组 )，共7例。分析三组尿液ET-1之间是否存在统计学差异，结果发现高的尿液ET-1含量时24小时尿蛋白定量也会增多，各组也随之升高，各组间差异均有统计学意义(P<0.05 )，见表2。

Table 2 The changes of the quantitative level for 24 h urinary protein and the level of urinary

※：与II组比较P<0.05；▲：与I组比较P<0.05.

2.3 相关性分析结果

Pearson相关性分析见图1。西宁地区HSPN组尿液ET-1与24小时尿蛋白定量呈正性相关(r=0.597，P<0.01 )。

图1HSPN组尿液ET- 1与24小时尿蛋白定量相关性图

Figure1Therelativityofthequantitativelevelfor24hurinaryproteinandthelevelofurinaryET-1inHSPNgroup

3 讨论

HSP是一种白细胞碎屑血管炎，并以IgA介导损伤为特征。肾脏受损程度是疾病预后预测的一个重要指标，但是对于慢性肾脏疾病预测率在儿童中要低于成人[5，6]。HSP其发病率为8%～22%，可以发生在任何年龄段，HSPN发病率高达87.9%以上，在年龄较大儿童与成人较为普遍[7-9]。有关研究提示[10-13]，HSP肾脏受损的儿童大多在10岁以上，最常见的临床表现为血尿伴或不伴不同程度的蛋白尿，血肌酐、蛋白尿和高血压为肾脏受损的危险因素。HSPN基本病理变化为系膜细胞、上皮细胞的增生、新月体的形成以及肾小球系膜区免疫复合物IgA1的沉积[1，4，14]。发病与血管内皮细胞(endothelial cells，EC)的受损，免疫复合物、活化的补体沉积有关，当肾小球基底膜受损不能够尽快被修复，长期存在持续性蛋白尿及血尿，促使肾微血管病变。

HSP属于血管壁变态炎症反应病变，发生内皮功能紊乱，释放内源性血管收缩调节因子ET-1。ET-1是由21个氨基酸残基构成的血管活性多肽，介入人类各种疾病的发展过程。现已证明，ET-1主要见于血管内皮细胞、上皮细胞以及系膜细胞，肾脏不仅是ET-1的靶器官，也是其产生和分泌的一个场所。肾脏相对于其他器官对ET-1缩血管效应更敏感，这大概与 ET-1受体集中会合在肾脏阻抗性血管的血管平滑肌上有关。同时，ET-1在保持肾小球滤过，水、电解质紊乱过程当中占有非常重要的地位。病理情况下ET-1因缩血管效应导致球后毛细血管收缩，发生小管间质缺血缺氧，导致低氧损害。有学者发现合成的ET-1可以促使系膜细胞增生。也有研究显示ET-1介入了HSPN患儿肾受损的全部进程。

本研究发现西安和西宁两地区HSPN组与无肾脏损害HSP组患者血浆及尿液ET-1水平明显高于健康对照组，而两地区HSPN组、HSP组分别相比较结果均有统计学差异，这说明ET-1在HSP的疾病发展过程中起到重要的作用，这与国内外的报道相一致。同时也提示西宁地处高海拔缺氧地区，缺氧情况下血浆及尿液ET-1表达显著增高的原因可能是：1.高海拔地区缺氧后二氧化碳分压增多，组织缺氧，促红细胞生成增加，血液黏滞度升高，血流动力学改变，血流速减慢，发生微循环毛细血管血流停滞。2.组织缺氧后血液中一些衍生物、血栓素转化生长因子B等损害物质过多。3.高海拔地区缺氧时，肺泡表面活性物质减少，使内皮素首次通过肺时灭活减少引起ET-1 水平升高，缺氧可促进血管EC产生氧自由基，影响EC的增殖和修复。上述这些因素均可以导致ET-1 合成及分泌异常。本研究通过对不同海拔地域HSP、HSPN及健康对照组血、尿ET-1数据的观察分析，得出结果为西宁高海拔缺氧地区可能对ET-1的代谢水平有一定影响，具有地域特点。

蛋白尿是慢性肾脏疾病进展的主要独立危险因素，其定量的多少也是HSPN病情程度及预后的参考指标[11-13]。越来越多的证据表明蛋白尿不仅是肾脏损害的标志，而且是肾脏进展及预后至关重要的因素，比如HSPN肾病范围的蛋白尿往往提示预后不良。以往研究结果显示，HSPN关于儿童尿液ET-1水平与尿蛋白定量呈线性正相关的关系。也有报道糖尿病肾病患者尿液ET-1含量与24小时尿蛋白尿定量水平相一致，这也可以说明尿液ET-1的表达与蛋白尿定量、肾脏受损程度紧密相关。

同样我们的研究结果也显示HSPN组尿液ET-1水平与24小时尿蛋白定量的多少呈显著正相关关系，说明在高海拔地区HSPN成人ET-1水平的升高可能与肾脏损害程度密切相关。尿液ET-1水平升高也提示肾脏组织局部表达ET-1水平增高，这可能与HSPN初发未治疗时的血清炎性物质增多，肾脏上皮细胞受损，促进ET-1的分泌和释放增多，肾血管收缩阻力增加，导致小球滤过滤降低并抑制肾小管对蛋白的重吸收有关。因此在评估HSPN方面通过检测尿液ET-1水平的含量可能会反应HSPN肾脏损害的程度及预后，可作为简便无创检测HSPN肾脏损害程度的生物学指标。

我们目前的研究存在样本量小、单中心的研究问题，仍然需要大样本、多中心的数据来证实本研究结果，进一步评估尿液ET-1在HSPN诊断中作为生物标记物的敏感性和特异性。

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ThelevelandclinicalsignificanceofPlasmaandurineendothelin-1inadultpatientswithHenoch-schonleinpurpurainXiningregion

JIA Shun-lian，LIU Yi-rong，JIN Lei，WANG Xiao-ling

(Xining No.1 people′s hospital，Xining，Qinghai，810000)

ObjectiveIn this study，we observed the change of Plasma and urine endothelin-1(ET-1)in adult patients with Henoch-schonlein purpura nephritis(HSPN)in Xining region，also，we analyzed the relativity of these changes with renal damage.Methods30 cases with HSPN patients and 30 healthy cases in Xining and Xi′an region were collected respectively，total 120 cases.Including 18 cases of HSPN group in Xi′an region and 19 cases of HSPN group in Xining region with renal damage，the other patients in both regions are without renal damage，while healthy people was used as control group in each region.The levels of ET-1 in plasma and urine were detected respectively by double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(ABC-ELISA)，and further，we analyzed the difference in two group.At the same time，the levels of 24 h urine protein of each patients were routinely detected，and the correlation for ET-1 in urine and urine protein were analyzed.Finally，SPSS 22.0 software was used to analyze all data statistically.Results 1.ET-1 levels of Plasma and urine in both HSPN and HSP without renal damage group were significantly higher than that of the control group in the two regions(P<0.05).2.The difference without statistical significant(P>0.05)in the level of plasma ET-1 of the HSPN group compared with the usp group in the Xining region.3.The difference without statistical significant(P>0.05)in the level of urine ET-1 of the HSPN group compared with the HSP group in the Xining region.Further，we analyzed the changes of the quantitative level for urinary protein and the level of urinary ET-1 in Xining region.The result showed：(1)The levels of urinary ET-1 were the highest in group Ⅲ(urinary protein>1.0g/24h)，secondary were those in group Ⅱ(urinary protein 0.15～1.0g/24h)and then group Ⅰ(urinary protein <0.15g/24h)，the difference between each group was statistically significant(P<0.05).(2)The results of Pearson′ correlation analysis indicated that the urinary ET-1 levels have a strong correlation with the levels 24 h urinary protein in patients of HSPN group(r=0.597，P<0.007).ConclusionThe change of ET-1 level in patients with HSPN possessing regional characteristics at high altitudes.It should make decisions in accordance with specific conditions，and further estimate the situation of renal damage in different degrees of Henoch-schonlein purpura nephritis(HSPN).

Henoch-Schonlein purpura Henoch-Schonlein Purpura nephritis Proteinuria Endothelin-1

R593

A

10.13452/j.cnki.jqmc.2017.03.010

2017-01-09

※：西宁市科技开发计划项目(26331766) 贾顺莲(1965～)，女，汉族，青海籍，副主任医师