脑脊液EV71抗体检测在重症手足口病合并脑炎中的意义

刘娜 王先玉 何谢玲 覃亚斌

论 著

脑脊液EV71抗体检测在重症手足口病合并脑炎中的意义

刘娜 王先玉 何谢玲 覃亚斌

目的分析脑脊液肠道病毒71（EV71）抗体在早期预测重症手足口病（HFMD）并发脑炎中的价值。方法 选取我院2015年3月至2017年3月收治的224例重症HFMD患儿，按照其并发脑炎情况与类型将其纳入未合并脑炎对照组（n＝72）、合并细菌性脑炎组（n＝86）和合并病毒性脑炎组（n＝66），对其血清、脑脊液EV71抗体水平进行检测，运用受试者工作特征曲线（ROC）计算EV71抗体早期预测HFMD并发脑炎的灵敏度、特异度，并运用Logistic多因素回归分析，评价血清EV71抗体对重症HFMD并发脑炎的影响。结果细菌性脑炎组、病毒性脑炎组血清及脑脊液EV71抗体水平均高于未合并脑炎对照组〔血清EV71抗体（μg/L）：403.5±19.6、397.1±20.8比115.9±32.4，脑脊液EV71抗体（μg/L）：427.6±48.4、430.8±49.1比125.9±31.3〕，差异有统计学意义（均P＜0.05），而细菌性脑炎组、病毒性脑炎组血清及脑脊液EV71抗体水平比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。ROC曲线显示，脑脊液、血清EV71抗体预测重症HFMD并发脑炎的灵敏度（87.83%、85.16%）、特异度（90.52%、89.33%）均较高（均P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示，以并发脑炎为因变量，脑脊液与血清EV71抗体的影响因子均具有统计学意义（均P＜0.05）。结论重症HFMD并发脑炎可损伤患儿脑组织，并引发脑脊液、血清EV71抗体水平明显上升，血清EV71抗体检测具有简便、创伤小的优势，有望在重症HFMD并发脑炎的早期预测中发挥重要作用。

脑脊液EV71抗体； 重症手足口病； 脑炎； 预测价值

手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是由肠道71型病毒（EV71）和A组柯萨奇病毒A16引发的传染性疾病，手、足、口、臀部出现大量水疱疹是本病的主要临床特征［1-2］。该病好发于学龄前儿童，通常预后良好，但重症HFMD患儿易出现肺炎、脑水肿、循环障碍等并发症，其中脑炎是重症HFMD最为严重的并发症之一，尽早识别并发脑炎风险并予以科学诊治对保证患儿生存质量具有重要意义［3-4］。然而，目前临床诊断重症HFMD并发脑炎主要借助腰穿脑脊液检查，该法操作复杂、耗时久，无法满足早期诊治需求［5-6］。本研究选取脑损伤中关键因子——脑脊液EV71抗体，就其早期预测重症HFMD并发症脑炎的价值进行了分析，旨在为临床诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2015年3月至2017年3月收治的224例重症HFMD患儿，按照其并发脑炎情况与类型分为未合并脑炎对照组（n＝72）、合并细菌性脑炎组（n＝86）和合并病毒性脑炎组（n＝66），均参照HFMD诊治指南确诊［7-8］，并排除合并其他类型感染与危重病例。3组患儿年龄、病程、体质量、性别比例比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 3组患儿一般临床资料比较

本研究经我院医学伦理委员会批准，并征得患儿监护人知情同意。

1.2 检测方法 抽取患儿入组次日（治疗前）空腹肘静脉血2 mL及脑脊液1.5 mL，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA法）检测其血清、脑脊液EV71抗体水平，试剂盒均购自上海吉泰依科赛生物科技有限公司，检测方法参照相关文献［9-10］方法。上述指标均由2名检验科医师于双盲条件下完成检测，取其平均值作为测定结果。

1.3 研究方法 比较3组血清、脑脊液EV71抗体间差异，运用受试者工作特征曲线（ROC）计算EV71抗体早期预测HFMD并发脑炎的灵敏度、特异度，并运用Logistic多因素回归分析，评价脑脊液及血清EV71抗体对重症HFMD并发脑炎的影响。

1.4 统计学分析 对本研究的所有数据采用SPSS 18.0进行分析。计数资料以例数（%）表示，并采用χ2检验；计量资料以均数±标准差表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验；EV71抗体对重症HFMD并发脑炎的影响研究采用Logistic多因素回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清及脑脊液EV71抗体水平比较 细菌性脑炎组、病毒性脑炎组血清及脑脊液EV71抗体水平均明显高于未合并脑炎对照组（均P＜0.05）；而细菌性脑炎组、病毒性脑炎组血清及脑脊液EV71抗体水平比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表2。

表2 3组患儿血清、脑脊液EV71抗体水平比较

表2 3组患儿血清、脑脊液EV71抗体水平比较

注：与未合并脑炎对照组比较，aP＜0.05

2.2 预测价值分析 ROC曲线显示，脑脊液、血清EV71抗体预测重症HFMD并发脑炎的灵敏度、特异度均较高（均P＜0.05）。见表3。

表3 脑脊液与血清EV71抗体预测重症HFMD合并发脑炎的临床价值分析

2.3 影响因素分析 多因素Logistic回归分析显示，以并发脑炎为因变量，脑脊液与血清EV71抗体的影响因子均有统计学意义（均P＜0.05）。见表4。

表4 脑脊液与血清EV71抗体影响重症HFMD并发脑炎的多因素回归分析结果

3 讨论

多数HFMD患儿病情呈自限性，感染后以发热起病，1周内即可出现体温明显下降、皮疹消退，病情恢复，但少数重症HFMD患儿病情进展极为迅速，发病1～4 d内即可出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎等严重并发症，病死率较高且存活患儿易遗留多种后遗症［11-12］。近年来，我国多个省份HFMD出现暴发流行趋势，HFMD防治形式愈发严峻。

HFMD的常见致病原为EV71病毒和A组柯萨奇病毒A16，均以高度嗜神经性为主要特点，也是导致神经系统严重并发症的主要原因［13-14］。王喆等［15］发现，较非重症HFMD患儿而言，重症HFMD患儿心动过速、呕吐、肌肉阵挛、烦躁、嗜睡等症状发生风险更高，印证了上述结论。与此同时，重症患儿亦具有更高的脑炎发生风险，而脑干脑炎不仅被认为是重症HFMD进展的重要阶段，也是肺水肿、肺出血甚至循环衰竭的前驱表现。因此，重症HFMD并发脑炎的早期诊治对于避免患儿遗留智力缺陷、肢体残疾具有重要意义。

早期脑炎的病理生理改变以脑血管周围神经坏死为主，随着病程的进展，广泛性神经坏死，累及相应局部组织是造成脑膜刺激征、头痛、发热等临床表现的主要原因，而Wormald等［11］发现，大量炎症细胞只有在通过血管内皮系统后方可进入脑组织并诱发神经系统损伤的发生发展，因此，作为调控炎症细胞的重要因子，EV71抗体可能在脑炎的发生发展中扮演了重要角色。本研究就重症HFMD、重症HFDM合并不同类型脑炎患儿血清与脑脊液EV71抗体进行了比较，结果表明，无论是合并细菌性脑炎还是病毒性脑炎，患儿血清与脑脊液EV71抗体水平均明显上升，且组间比较差异无统计学意义，说明血管内皮受损是脑炎的重要发病机制之一，而EV71抗体可通过如下机制拮抗血管内皮直接受损与直接受损后引发的继发性受损：作为血管内皮细胞内特异性的肝素结合生长因子，EV71抗体能够促进血管内皮细胞分裂与增殖，诱导体内新生血管生成、增强血管通透性，达到提升微小血管、侧支循环建立能力的目的。因此，EV71抗体水平升高表明血管内皮细胞受损、血脑屏障破坏严重，而Lteif等［13］亦指出，EV71抗体可能参与HFMD合并脑炎的发病机制，为脑炎发生风险的早期预测提供一定参考。

通过ROC曲线与Logistic多因素回归分析可以发现，血清与脑脊液EV71抗体是影响重症HFMD并发脑炎的危险因素，且根据EV71抗体水平变化能够预测患儿脑炎发生风险，与陈秀丽等［7］观点一致。同时，由于血清、脑脊液EV71抗体预测重症HFMD并发脑炎的能力相仿，加之腰椎穿刺取脑脊液检查痛苦大、安全性受限等弊端，血清EV71抗体检测有望在重症HFMD并发脑炎的预测中得到更为广泛的关注。此外，Stammberger等［9］发现，血清EV71抗体水平变化与HFMD患儿病情变化存在一定相关性，为HFMD患儿病情进展的预测提供了新的思路，关于EV71抗体与HFMD患儿预后关联性的研究，有待日后大样本、多中心分析加以明确。

综上所述，重症HFMD并发脑炎患儿血清、脑脊液EV71抗体水平明显升高，根据血清EV71抗体变化能够有效预测患儿并发脑炎风险，为临床早期诊治提供可靠的参考，值得进一步关注。

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4 周立新,李轶男,麦志广，等.危重型手足口病合并急性肺水肿患儿的临床特点［J］.中华危重病急救医学，2015，27（7）：563-567.

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9 Stammberger HR，Kennedy DW. Paranasal sinuses:anatomic terminology and nomenclature ［J］. Ann Otol Rhinol Laryngol Suppl，1995，167：7-16.

10 王伟群，王孙尧.手足口病患儿血清免疫球蛋白A检测的临床意义［J］.中国中西医结合急救杂志，2012，19（1）：42-43.

11 Wormald PJ. The agger nasi cell: the key to understanding the anatomy of the frontal recess［J］. Otolaryngol Head Neck Surg，2003，129（5）：497-507.

12 徐梅先，张军桥，闫春明.肠道病毒71感染致危重型手足口病的研究进展［J］. 中国中西医结合急救杂志，2013，20（6）：382-384.

13 Lteif AA，Han K，Mather KJ. Obesity, insulin resistance, and the metabolic syndrome: determinants of endothelial dysfunction in whites and blacks ［J］. Circulation，2005，112（1）：32-38.

14 刘雪雁，张昊，王婉奕，等.手足口病合并神经系统受累23例临床分析［J］.中华危重病急救医学，2010，22（4）：246-247.

15 王喆，李颖，任彦.乌司他丁联合正压通气治疗危重型手足口病患儿临床观察［J］.中华危重病急救医学，2013，25（3）：177-178.

The significance of cerebrospinal fluid EV71 antibody detection in severe hand-foot-mouth disease and encephalitis

Liu Na, Wang Xianyu, He Xieling, Qin Yabin.
Clinical Laboratory Center, Hunan Children's Hospital, Changsha 410007, Huan, China

ObjectiveTo analyze the value of cerebrospinal fluid enterovirus 71 (EV71) antibody in the early prediction of severe hand-foot-mouth disease (HFMD) complicated with encephalitis.MethodsA total of 224 children with severe HFMD who were treated in our hospital from March 2015 to March 2017 were selected for inclusion in the unrelated encephalitis control group (n = 72) and the combined encephalitis group (n = 86) and combined with viral encephalitis (n = 66). The serum and cerebrospinal fluid EV71 antibody levels were measured and the sensitivity of the EV71 antibody was predicted by the receiver operating characteristic curve (ROC).Specificity, and logistic multivariate regression analysis was used to evaluate the effect of serum EV71 antibody on severe HFMD complicated with encephalitis.ResultsThe level of EV71 antibody in serum and cerebrospinal fluid in patients with bacterial encephalitis and viral encephalitis was higher than that in unrelated encephalitis control group [serum EV71 antibody (μg/L): 403.5±19.6, 397.1±20.8 vs. 115.9±32.4, cerebrospinal fluid EV71 antibody (P ＜ 0.05), while the levels of EV71 antibody in the serum and cerebrospinal fluid of the bacterial encephalitis group and the viral encephalitis group were significantly higher than those in the control group (P ＜ 0.05),and the difference was statistically significant (P ＜ 0.05). The difference was not statistically significant (P ＞ 0.05).ROC curve showed that cerebrospinal fluid and serum EV71 antibody predicted the sensitivity (87.83%, 85.16%)and specificity (90.52%, 89.33%) of severe HFMD complicated encephalitis respectively (all P ＜ 0.05). Multivariate logistic regression analysis showed that the influencing factors of cerebrospinal fluid and serum EV71 antibody were statistically significant (P ＜ 0.05).ConclusionsSevere HFMD complicated with encephalitis can damage thebrain tissue of children, and cause cerebrospinal fluid, serum EV71 antibody level increased significantly. Serum EV71 antibody detection is simple and noninvasive, is expected to play an important role in the early prediction of severe HFMD concurrent encephalitis.

Cerebrospinal fluid EV71 antibody; Severe hand-foot-mouth disease; Encephalitis; Pred iction value

2017-06-21）

（本文编辑：杨程伍 李银平）

410007 湖南长沙市，湖南省儿童医院检验中心

Liu Na，Email：hunanzfq@126.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.03.011

Corresponding author: Liu Na, Email: hunanzfq@126.com