乳腺癌淋巴转移与Galectin-3、CA19-9表达的相关性研究

颜文贞，戴 璟，田 猛，戴 东

(1.广东医科大学护理学院，广东 东莞523808;2.广东医科大学研究生学院；3.广东医科大学附属医院)

乳腺癌淋巴转移与Galectin-3、CA19-9表达的相关性研究

颜文贞1，戴 璟2，田 猛2，戴 东3*

(1.广东医科大学护理学院，广东 东莞523808;2.广东医科大学研究生学院；3.广东医科大学附属医院)

目的通过检测乳腺癌组织中半乳凝素-3(Galectin-3)、CA19-9的表达，探讨Galectin-3、CA19-9与乳腺癌淋巴结转移的相关性研究。方法对85例乳腺癌患者手术切除的癌组织：① 进行常规连续切片 HE 染色病理诊断、分期。② 应用免疫组织化学方法检测癌组织中及癌旁组织Galectin-3、CA19-9的表达水平；③ 结合淋巴结转移情况进行分析对比。结果① 有淋巴结转移组的癌组织Galectin-3和CA19-9表达与无淋巴结转移组癌组织中的表达有差异性改变(P<0.05)。② 有淋巴结转移组癌旁组织Galectin-3、CA19-9表达与无淋巴结转移组的癌旁组织中的表达亦呈差异性改变(P<0.05)。结论乳腺癌的侵袭及淋巴结转移可能与Galectin-3与CA19-9的表达呈正相关性改变。

乳腺癌；Galectin-3；CA199；淋巴结转移；免疫组织化学

(ChinJLabDiagn,2017,21:1299)

半乳凝素-3(Galectin-3)是具有与β-Gal和 LacNA 残基结合的共同一致序列的外凝集素家族成员之一，结构不同的半乳凝素，生物学特性不同[1]。研究表明，Galectin-3对消化道肿瘤及甲状腺癌早期诊断预测有一定的临床意义[2]。Galectin-3 结合蛋白(LGALS3BP)参与抑制单核细胞来源的纤维细胞分化从而抑制肿瘤包膜的形成[3]。Galectin-3通过多种途径抑制细胞凋亡，并能促进细胞间粘附，这可能与肿瘤转移有关[4]。CA19-9是MUC1蛋白的一种Lewis A 抗原唾液酸化衍化物，常用于肿瘤的筛查， CA19-9作为肿瘤标志物用于协助乳腺癌早期诊断已经得到认可[5]。但Galectin-3和CA19-9的高表达与乳腺癌的侵袭及淋巴的转移的相关研究鲜有报道。本研究探讨Galectin-3、CA19-9与乳腺癌转移侵袭的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集广东医科大学附属医院甲乳外科2014—2016年间行手术治疗的乳腺癌患者共计85例，年龄31-82岁，其中位年龄为49岁。纳入病例为行乳腺癌根治术或改良根治术且术前未行放、化疗的患者。其中无淋巴结转移的患者为39例，有淋巴结转移的患者为46例。所有病例均在手术切除后取癌组织和癌组织周围3 cm的癌旁组织并用福尔马林固定再石蜡包埋，保存完好。

1.2 病理切片

取石蜡包埋的癌组织用轮转式切片机进行石蜡切片，厚度约4 μm，将切片移入40℃的恒温热水器中，待展开后制片。然后行HE染色。根据WHO乳腺癌肿瘤病理学分类、TNM分期标准和术后病理结果与HE染色切片进行复核诊断。最终根据最后复核诊断将病例标本分为无淋巴结转移乳腺癌组和有淋巴结转移乳腺癌组。

1.3 免疫组织化学

通过石蜡切片免疫组化En Vision二步法染色， Galectin-3为艾博抗(上海)贸易有限公司生产的兔抗人多克隆抗体，CA19-9一抗是圣克鲁斯生物技术公司生产的小鼠单克隆抗体。

1.4 结果评定

Galectin-3抗原抗体复合物主要出现在细胞浆中，胞浆呈棕黄色、核呈淡蓝色，堆积成癌巢，其中阳性细胞为染色强度高于非特异性背景色的黄色颗粒细胞。CA19-9抗原抗体复合物主要表现在细胞膜，被染成棕褐色。通过双盲法观察免疫组化结果，依据IP(Intersity× Percentages)评分方法，最终记分：0分为阴性，1分为低表达，2分为中表达，4分为高表达(染色记分：无染色或与背景色一致为0分，淡黄色或棕黄色为1分，总棕褐色为2分。细胞数记分：无阳性细胞记0分，60%以下的细胞为阳性记1分，60%以上的细胞为阳性为2分。最后两项分乘积为最终记分。)。

1.5 统计学处理

通过SPSS24.0统计学软件包作统计学分析，对两独立样本单向有序资料行秩和检验比较阳性表达率，检验水准为α=0.05。

2 结果

有淋巴结转移组中的癌组织Galectin-3和CA19-9表达情况与无淋巴结转移组的癌组织中的表达情况差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。有淋巴结转移组中的癌旁组织Galectin-3和CA19-9表达情况与无淋巴结转移组的癌旁组织中的表达情况差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。Galectin-3抗原抗体复合物主要出现在细胞浆中，胞浆呈棕黄色、核呈淡蓝色，堆积成癌巢； CA19-9抗原抗体复合物主要表现在细胞膜，被染成棕褐色，见图1、2。

表1 Galectin-3、CA19-9在无淋巴结转移乳腺癌和有淋巴结转移乳腺癌两组的癌组织中的表达情况

表3 Galectin-3、CA19-9在无淋巴结转移乳腺癌和有淋巴结转移乳腺癌两组的癌旁组织中的表达情况

图1Galectin-3阳性细胞为染色强度高于非特异性背景色的黄色颗粒的细胞(a),阴性细胞为无染色或与背景色(b)。

3 讨论

图2CA19-9阳性细胞为染色强度高于非特异性背景色的棕褐色的细胞(c)，阴性细胞为无染色或与背景色(d)。

乳腺癌是女性最常见的肿瘤之一。目前仍然是以手术为主的治疗方式，临床TNM分期不同，具体治疗方式不同，因此早期诊断、预测是否有淋巴转移有着重要的临床意义。有研究表明Galectin-3参与多种抗凋亡作用，能够阻止T细胞或者B细胞因抗Fas抗体引起的凋亡[6，7]。Galectin-3与肿瘤细胞的粘附、新生物血管形成有关，血管内癌细胞的粘附在癌转移中发挥着重要作用， Galectin-3及糖介导的转移细胞异型性和同型性的粘附，主要通过肿瘤特异性抗体TFAg实现[8]。Galectin-3通过诱导内皮细胞在体外形成毛细血管，体内则诱导血管发生，这可能是由糖识别介导[9]。本研究的实验数据显示Galectin-3在有淋巴结转移组的癌组织中阳性表达率高于无转移组，并且癌旁组织中也是同样的结果，这表明Galectin-3可能参与乳腺癌的淋巴结转移。CA19-9作为肿瘤标志物用于协助乳腺癌早期诊断为临床广泛应用，本次研究数据表明CA19-9表达与乳腺癌的进展、淋巴结转移有关，有助于协助评估乳腺癌的预后。肿瘤的转移是一种多因素多步骤的过程，Galectin-3、CA19-9的高表达对乳腺癌的侵袭及转移呈正相关性改变。本研究显示乳腺癌中Galectin-3的表达情况可能与乳腺癌的恶性侵袭，以及促进乳腺癌细胞的转移有关，Galectin-3高表达可能与患者发生淋巴结转移和预后有着密切的关系。同样乳腺癌中CA19-9的表达情况也具有统计学意义，这表明CA19-9也可能与乳腺癌的进展、转移以及预后有关。

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CorrelationbetweenlymphnodemetastasisandtheexpressionofGalectin-3,CA19-9ofbreastcancerresearch

YANWen-zhen,DAIJing,TIANMeng,etal.

(GuangdongMedicalUniversitySchoolofNursing,Dongguan523808,China)

ObjectiveBy detecting breast tissue half HA-3 (Galectin-3,GAL-3),the expression of CA19-9,Galectin-3,CA19-9 correlation with lymph node metastasis in breast cancer research.Methods85 cases of surgical resection in patients with carcinoma of breast cancer:① Pathological diagnosis,staging routine serial sections HE staining.② Immunohistochemical detection of carcinoma and paracancerous tissue levels of Galectin-3,CA19-9;③ Combined with lymph node metastasis were compared.Results① Metastasis of cancer Galectin-3 and CA19-9 of lymph node metastasis carcinomas by gene expression differences change(P<0.05).② Metastasis lung tissue expression of Galectin-3,CA19-9 and free expression of metastasis of cancer also showed the difference changes(P<0.05).ConclusionThe invasion and lymph node metastasis of breast cancer and expression was a positive correlation between changes of Galectin-3 and CA19-9.

breast cancer;Galectin-3;CA19-9;lymph node metastasis;immunohistochemistry

广东省社会发展领域科技计划项目(20101096037)

*通讯作者

1007-4287(2017)09-1299-03

R737.9

：A

2017-01-20)