急性缺血性卒中早期血浆miRNAs水平与房颤相关性研究

张宇　周石

[摘要] 目的 探讨和分析急性缺血性卒中早期血浆miRNAs水平和房颤发生之间的相互关系。 方法 整群选取该院神经内科在2016年10月—2017年2月期间收治的急性缺血性卒中患者195例为分析对象，依据其是否合并有房颤又划成持续性房颤组（65例）和阵发性房颤组（65例）以及非房颤组（65例），并以同期在该院进行体检的健康体检者65名作为健康组，用2-ΔΔCt法来对miRNAs具有的相对表达量实施测试。 结果 持续性房颤组患者的miR-328为（5.51±0.76），显著高于陣发性房颤组；持续性房颤组的miR-150为（0.63±0.52），显著低于健康对照组；健康对照组和非房颤组的miR-29b分别为（1.00±0.39）、（0.91±0.27），均明显高于阵发性房颤组；以上组间对比差异有统计学意义（P<0.05）；持续性、阵发性房颤组的miR-29b分别为（0.50±0.39）、（0.49±0.41），该两组的miR-29b对比差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 早期血浆miRNAs水平中的miR-328、miR-29b和miR-150指标与急性缺血性卒中合并房颤的发生呈显著相关。因此，这些分子可能有望作为急性缺血性卒中患者是否合并房颤的有效预测指标。在预测急性缺血性卒中患者是否具有阵发性房颤时，有望将miR-29b的实际水平作为有效的参考依据，应引起足够的重视。

[关键词] 脑卒中；缺血性卒中；miRNAs水平；房颤

[中图分类号] R743 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）07（c）-0046-03

[Abstract] Objective To study and analyze the correlation between the early plasma of acute ischemic stroke miRNAs level and atrial fibrillation. Methods 195 cases of patients with acute ischemic stroke admitted and treated in our hospital from October 2016 to February 2017 were cluster selected and divided into two groups with 65 cases in each according to whether the patients were with atrial fibrillation or not， and 65 cases of healthy people were selected as the healthy group at the same period， and the relative expression amount of the miRNA was tested by the 2-ΔΔCt method. Results The miR-328 was in the continuous group was obviously higher than that in the paroxysmal group， which was（5.51±0.76）in the continuous group， and the miR-150 was（0.63±0.52） in the continuous group， which was obviously lower than that in the healthy control group， and the miR-29b in the healthy control group and non- atrial fibrillation group was respectively（1.00±0.39） and（0.91±0.27）， which were obviously higher than those in the paroxysmal group， and the differences between groups were obvious with statistical significance（P<0.05）， and the miR-29b in the continuous and paroxysmal groups were respectively （0.50±0.39） and （0.49±0.41）， and the difference was obvious with statistical significance（P>0.05）. Conclusion The miR-328， miR-29b and miR-150 in the early plasma miRNAs level have an obvious correlation with the occurrence of acute ischemic stroke complicated with atrial fibrillation， therefore， which can be expected to be effective predictive indexes of whether the acute ischemic stroke patients are with atrial fibrillation or not， and the practical level of miR-29b can be used as an effective reference basis of prediction， and we should attach enough importance.

[Key words] Stroke； Ischemic stroke； miRNAs level； Atrial fibrillationendprint

据调研，有超过19%的缺血性卒中是由于房颤（即心房颤动）导致的，伴有房颤的卒中患者在预后方面要比无房颤患者更差[1]。阵发性房颤尽管作用时间不长，可是其引发卒中的风险并不低于持续性房颤。现阶段，在临床往往难以借助常规的心电图来筛选阵发性房颤患者，而24 h动态心电图虽然属于诊断阵发性房颤的常用手段，但其检出率却不是很高[2-3]。对于急性缺血性卒中患者来说，其miRNAs分子表达是否会发生改变，若同时伴有阵发性房颤或是合并房颤，则其血浆内特异性miRNAs的改变是否也类似于单纯房颤患者，为了解决以上问题，对房颤及其相关卒中的全面筛查，特别是miRNAs的测定，将会有着极大的临床价值，该文主要对2016年10月—2017年2月期间收治的急性缺血性卒中患者195例進行综合的研究与检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

整群选取该院神经内科在收治的急性缺血性卒中患者195例为分析对象，全部患者都达到了我国举办的第四届脑血管病学术会议确立的相关诊断标准。依据其是否合并有房颤又划成2组，即房颤组（130例）和非房颤组（65例），同时，根据房颤在种类上的不同，再将房颤组细分成持续性房颤组（65例）和阵发性房颤组（65例）。并以同期在该院进行体检的健康体检者65名作为健康组，持续性房颤组男性共34例，女性共31例，年龄均在26～79岁之间，平均年龄是（57.1±2.6）岁。阵发性房颤组患者男性共32例，女性共33例，年龄均在27～80岁之间，平均年龄是（58.2±2.3）岁。非房颤组患者男性共35例，女性共30例，年龄均在25～76岁之间，平均年龄是（58.5±2.2）岁。健康组男性共36名，女性共29名，年龄均在24～83岁之间，平均年龄是（54.4±2.1）岁。以上4个组无论在性别还是年龄等方面对比，差异无统计学意义（P>0.05），存在着可比性。

1.2 方法

在患者发病后的24 h之内，抽取其空腹外周静脉内的血液6 mL，放在 EDTA抗凝管中。再抽提各取样血浆里面的全部RNA，借助TaqMan反转录试剂盒来完成反转录，并选择定量反转录-PCR法来对miR-150、以及miR-328和miR-29b的表达实施测试，同时将U6看作为内部参考指标。之后，运用2-ΔΔCt法来对miRNAs具有的相对表达量实施测试，所有患者均反复测试3次。对照组体检时根据上述方法进行指标测定。

1.3 统计方法

借助SPSS 17.0统计学软件来对得到的全部资料做综合的分析与处理。计量资料用（x±s）表示，以t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

持续性房颤组患者的miR-328为（5.51±0.76），显著高于阵发性房颤组；持续性房颤组的miR-150为（0.63±0.52），显著低于健康对照组；健康对照组和非房颤组的miR-29b分别为（1.00±0.39）、（0.91±0.27），均明显高于阵发性房颤组；以上组间对比差异有统计学意义（P<0.05）；持续性、阵发性房颤组的miR-29b分别为（0.50±0.39）、（0.49±0.41），该两组的miR-29b对比差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

3 讨论

相关研究认为miRNAs水平与急性缺血性卒中伴发房颤密切相关[4]。Khanna S等[5]通过动物实验发现，miR-328的过表达可诱发小鼠房颤的发生，而miR-328敲减小鼠或给予腺病毒连接的miR-328反义寡核苷酸则可减轻房颤的发生，提示miR-328升高是诱发心房颤动的靶点。临床研究发现，房颤患者的血浆miR-328水平较健康对照显著升高。

梁健球[6]通过研究发现，房颤患者血浆中miR-328的实际水平在阵发性房颤组、以及永久性和持续性房颤组中均显现了不同的表达。经该研究证明，持续性房颤组患者的miR-328为（5.51±0.76），得到了显著提升，但miR-150为（0.63±0.52），处于较低水平，不但显著优于健康对照组，而且优于非房颤组，这和梁健球研究基本相符。此外，持续性房颤组患者血浆内miR-328的实际水平为（5.51±0.76），显著高于阵发性房颤组，这又和Giorgia Manina等[7]研究结果基本相符，该研究血浆内miR-328值为（5.28±0.80），该结果提示：这并不是缺血性卒中的原因导致的，主要是由于房颤的严重程度以及存在时间长短导致了持续性房颤组内miRNAs的差异表达。

通过研究还发现，阵发性房颤组患者的miR-29b为（0.49±0.41），不仅明显低于健康对照组，还明显低于非房颤组，但是和持续性房颤组对比差异无统计学意义，这提示：这并不是房颤的严重程度以及持续时间导致的，主要是由于受到房颤实际状态的影响。这些结果也提示，缺血性卒中影响了miR-29b的表达，抑或是miR-29b水平的改变参与了缺血性卒中的病理发生机制，所以，在预测急性缺血性卒中患者是否具有阵发性房颤时，有望将miR-29b指标的实际水平作为有效的参考依据[8]。

综上所述，miR-328、miR-29b和miR-150与急性缺血性卒中合并房颤的发生呈显著相关。因此，这些分子可能有望作为急性缺血性卒中患者是否合并房颤的有效预测指标。在预测急性缺血性卒中患者是否具有阵发性房颤时，有望将miR-29b的实际水平作为有效的参考依据，应引起足够的重视。

[参考文献]

[1] 彭彬，吴大玉，孙家兰，等. 急性脑梗死早期血中miRNAs水平与脑侧支循环建立的关系[J].中风与神经疾病杂志， 2016， 9（2）：244.

[2] 李焰生，林岩，王瑞芳，等.上海地区2201例脑卒中患者危险因素分析[J].上海医学，2014，16（9）：197-198.

[3] Motaz Baibars，Khalil Kanjwal，Joseph E， et al. Detected on Implanted Cardiac Implantable Electronic Devices： Is There a Threshold for Thromboembolic Risk[J].Current Treatment Options in Cardiovascular Medicine，2014，16（3）：289.

[4] 苏敏，杨卫新，王万华，等. 急性缺血性卒中重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓致出血性转化及其预后的危险因素分析[J].中华神经科杂志，2016，8（11）：275-277.

[5] Khanna S，Rink C，Ghoorkhanian R，et al. Loss of miR-29b following acute ischemic stroke contributes to neural cell death and infarct size[J].Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism，2015，14（1）：205.

[6] 梁健球.关于心肌梗死后心力衰竭患者血浆中miRNA表达及基于ECHO的心肌能量消耗的研究[D].广州：南方医科大学，2013.

[7] Giorgia Manina，Giancarlo Agnelli，Cecilia Becattini，et al.96 hours ECG monitoring for patients with ischemic cryptogenic stroke or transient ischaemic attack[J].Internal and Emergency Medicine， 2014 ，9（1）：65-67.

[8] 杨伟民，滕军放，王月玲，等. 急性缺血性脑卒中进展与预后关系的前瞻性研究[J]. 山东医药，2015，55（43）：338.

（收稿日期：2017-04-24）endprint