分光光度法测定番茄中维生素C的含量

赵俊英，赵俊明

(1.陇东学院 化学化工学院，甘肃 庆阳 745000；.山东华宇工学院，山东 德州 253000)

分析与测试

分光光度法测定番茄中维生素C的含量

赵俊英1，赵俊明2

(1.陇东学院 化学化工学院，甘肃 庆阳 745000；.山东华宇工学院，山东 德州 253000)

本文采用分光光度法测定番茄中的维生素C含量，此方法原理为：利用维生素C的还原性，将Fe3+转化为Fe2+，Fe2+可以与K3[Fe(CN)6]反应生成可溶性普鲁士蓝。通过测定普鲁士蓝在750 nm处的吸光度间接测定番茄中维生素C的含量。结果表明三氯化铁用量为6mL，铁氰化钾用量为4mL，反应时间为50min，番茄中的维生素C含量为16.64 mg/100 g。

维生素C；分光光度法；番茄

维生素C是所有具有抗坏血酸生物活性的化合物的统称[1]，在空气中较稳定，但水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化，生成脱氢抗坏血酸；在碱性条件下易分解，见光加速分解；在弱酸条件中较稳定[2-3]。维生素C具有广泛的生理功能，能防止坏血病，关节肿，促进外伤愈合，使机体增强抵抗能力。在食品工业上常用作抗氧化剂、酸味剂及强化剂。因此，测定食品中维生素C的含量以评价食品品质及食品加工过程中维生素C的变化情况具有重要的意义。

目前，我国研究维生素C的市场景气度高，测定维生素C含量的方法主要有碘量法[4]、2,4-二硝基苯肼法[5]、高效液相色谱法[6]、2,6-二氯酚靛酚法[7]、磷钼酸法[8]、荧光法[9]、紫外可见分光光度法[10]等，它们具有各自的优缺点，具体见表1。在具体的实际情况下，依据不同的实验条件和要求选择不同的测定方法。

表1 测定维生素C的方法比较

在食品维生素 C 的定量分析方法中，常规滴定法方法简单，但操作费时费力，滴定有色物质时终点难以判断[4]。高效液相色谱法由于选择性好、测定迅速，与其他检测技术联用灵敏度较高，是近年来发展快速的一种方法，但仪器设备价格高昂，推广和普及有一定的困难[6]。电化学法应用于维生素 C 的定量检测是近几年来研究应用最活跃的一个领域，因其所需仪器结构简单、操作方便、便于携带且准确度高，在现场快速检测方面具有较好的应用前景[11]。化学发光法具有仪器简单、操作方便、灵敏度高等特点。目前在测定维生素 C 含量中也应用得较多。光度分析法目前所需的仪器设备比较成熟，且准确度较高，因而成为实验室定量分析维生素 C的主要方法。因此，本文利用维生素C的还原性，将Fe3+转化为Fe2+，Fe2+可以与K3[Fe(CN)6]反应生成可溶性普鲁士蓝，采用分光光度法测定普鲁士蓝在一定波长处的吸光度间接测定番茄中维生素C的含量。

1 实验部分

1.1 实验仪器与试剂

紫外可见分光光度计(SPECOPD50型)；电子天平(BS110S)；循环水式多用真空泵(巩义市科瑞仪器有限公司)。维生素C(AR，天津市致远化学试剂有限公司)；三氯化铁(AR，天津市百世化工有限公司)；铁氰化钾(AR，天津市天泰精细化学品有限公司)；乙酸(36%，天津市天力试剂有限公司)。

样品：番茄。

1.2 实验样品处理

称取一定量新鲜、经初步处理的番茄肉，加入适量2 %的乙酸，捣碎。用定量滤纸抽滤，进一步用0.45 μm滤膜抽滤直至滤液呈无色透明，以除去色素的影响。

2 结果与讨论

2.1 吸收波长的选择

准确移取1.500 mmol/L 三氯化铁溶液7 mL，放入比色皿中，加入维生素C标准溶液或样品提取液适量，加入1.500 mmol/L铁氰化钾溶液4 mL，用2次蒸馏水稀释至 12.5 mL。室温放置 50min。参比溶液选择试剂空白，在500～900 nm范围内，扫描了维生素C与三氯化铁及铁氰化钾反应生成可溶性普鲁士蓝的吸收光谱曲线，如图1。

图1 标准样品反应生成的普鲁士蓝吸光度与波长的关系

由图1可以看出，波长从400 nm开始到750 nm，吸光度一直在增加，而750 nm以后，吸光度开始减小，因此本文选择750 nm作为检测波长。

2.2 三氯化铁用量的选择

三氯化铁要把蔬菜中的维生素C氧化完全，故三氯化铁要过量，而三氯化铁本身也有一定的吸光度，因此不得无限过量。本文分别测定了三氯化铁用量从2～9 mL变化的吸光度，得到一系列吸光度的数值，以三氯化铁的体积为横坐标，吸光度为纵坐标作图，见图2。

图2 普鲁士蓝吸光度与三氯化铁用量的关系

从图2中可以看出，随着三氯化铁体积的增加，吸光度先增加后稍有减少，当三氯化铁溶液用量为6 mL时，生成的普鲁士蓝吸光度达到最大，增加三氯化铁用量，溶液的吸光度几乎保持不变，说明三氯化铁已与维生素C反应完全，故本试验选择三氯化铁的用量为6.0 mL。

2.3 铁氰化钾用量的选择

本文改变铁氰化钾用量，从 1～5 mL的吸光度，得到一系列吸光度数值，以铁氰化钾用量为横坐标，以吸光度为纵坐标，作图，见图3。从图3可以看出看出，当铁氰化钾用量为4 mL时，溶液吸光度达到最大，继续增加铁氰化钾用量，溶液的吸光度几乎保持不变，说明铁氰化钾已经与还原生成的Fe2+反应完全，故本文选择铁氰化钾的用量为4 mL。

图3 普鲁士蓝吸光度与铁氰化钾用量的关系

2.4 反应时间的选择

维生素C易被氧化，与三氯化铁在常温下就能反应，反应生成的Fe2+与铁氰化钾生成可溶性普鲁士蓝的反应也在常温下就能进行，本试验选择在常温下进行反应，研究实验反应时间对溶液吸光度的影响，反应时间从10min到60min，测得一系列数据，以时间为横坐标，吸光度为纵坐标作图，见图4。

图4 普鲁士蓝吸光度与反应时间的关系

由图4可以看出当反应时间为50min时，溶液吸光度达到最大，续延长反应时间，吸光度几乎不变，表明反应已经完全，故本文选择反应时间为50min。

2.5 标准曲线

配制维生素C含量分别为0.4、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0、4.8、5.6 mg/mL的标准溶液，按照最优试验方法进行吸光度的测定，并做标准曲线，见图5。当维生素C含量在0.12～5.6 mg/mL之间符合线性关系。线性回归方程为D=0.1298C(mg/mL)+0.6164。相关系数R=0.9882。

图5 普鲁士蓝吸光度与维生素C标准样品浓度的关系

2.6 样品测定

按样品处理方法对番茄进行处理，按上述最优方法进行测定，并进行了回收率试验，实验结果见表2。

表2 样品测定结果

结果表明100 g番茄中维生素C的含量为16.64 mg，回收率为98.20 %。

3 结论

本文利用维生素C的还原性将Fe3+还原生成Fe2+，Fe2+能与铁氰化钾反应生成可溶性普鲁士蓝，采用分光光度法测定该物质的吸光度，从而间接测定维生素C的含量。最佳条件为测定波长为750 nm，三氯化铁的用量为6 mL，铁氰化钾的用量为4 mL，反应时间为50min。当维生素C含量在0.12～5.6 mg/mL之间符合线性关系。线性回归方程为D=0.1298C(mg/mL)+0.6164。测得番茄中的维生素C含量为16.64 mg/100 g。本方法具有仪器简单、灵敏度高、线性范围较宽、测定速度快等特点。

[1] 荆晓娟,杜冀晖,贺克俭.维生素C在肿瘤治疗中的作用研究进展[J].医学综述,2010,16(4): 554-557.

[2] 龙 勇,孙 谦,冯靖媛,等.提高果蔬维生素C含量研究进展[J].食品工业科技,2014(1):385-389.

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[11] 张胜义,凤志祥,忻 旸.溴酸钾示波电位滴定法测定维生素C[J].安徽大学学报:自然科学版,1987,28(4): 57-60.

(本文文献格式：赵俊英，赵俊明.分光光度法测定番茄中维生素C的含量[J].山东化工,2017,46(15):93-94,96.)

Determination of Vitamin C in Tomato

ZhaoJunying1,ZhaoJunming2

(1.College of Chemistry and Engineering,Longdong University,Qingyang 745000,China;2.Shandong Huayu University of Technology,Dezhou 253000,China)

In this paper,the content of vitamin C in tomato was determined by spectrophotometry. the principle of this method: the reduction of vitamin C can be trivalent iron into divalent iron,divalent iron and potassium ferricyanide reaction to generate soluble prussian blue. determination of vitamin C content in tomatoes by measuring the absorbance of the blue at 750nm. the results showed that the content of vitamin C in tomato was 16.64 mg/100 g.

vitamin C;spectrophotometry;tomato

2017-05-31

赵俊英(1981—)，女，山东德州人，讲师，硕士学位，主要从事无机分析测试。

O657.3

A

1008-021X(2017)15-0093-02