23 763例新生儿听力筛查联合耳聋基因检测在临床中的应用

李天洁，梁建梅，王向东，王清泽，秦丽欣，杨宏洁，封纪珍*

(1.河北省石家庄市妇幼保健院优生遗传科，河北 石家庄 050081；2.河北省石家庄市妇幼保健院妇二科,河北 石家庄 050081；3.河北省石家庄市平安医院功能科,河北 石家庄 050021；4.河北省辛集市妇幼保健院检验科,河北 石家庄 052360；5.河北省石家庄市妇幼保健院保健部,河北 石家庄 050081)

·论著·

23 763例新生儿听力筛查联合耳聋基因检测在临床中的应用

李天洁1，梁建梅2，王向东3，王清泽4，秦丽欣2，杨宏洁5，封纪珍1*

(1.河北省石家庄市妇幼保健院优生遗传科，河北 石家庄 050081；2.河北省石家庄市妇幼保健院妇二科,河北 石家庄 050081；3.河北省石家庄市平安医院功能科,河北 石家庄 050021；4.河北省辛集市妇幼保健院检验科,河北 石家庄 052360；5.河北省石家庄市妇幼保健院保健部,河北 石家庄 050081)

目的通过对石家庄市23 763例新生儿听力筛查及耳聋基因检测数据的分析，探讨听力筛查联合耳聋基因检测在临床中的应用价值。方法新生儿于出生后3 d同步进行听力筛查及常见耳聋基因检测。其中听力筛查采用初筛耳声发射(otoacoustic emission，OAE)和复筛OAE+自动听性脑干反应两步法，常见耳聋基因检测采用荧光聚合酶链式反应法(荧光PCR)，最后对联合筛查结果进行统计分析。结果23 763例新生儿中有20 443例通过了听力初筛，初筛通过率为86.03%(20 443/23 763)；3 087例参加复筛的新生儿中有2 964例通过了复筛，复筛通过率为96.02%(2 964/3 087)。23 763例新生儿中有960例携带常见耳聋基因突变，随机人群常见耳聋基因突变率为4.04%(960/23 763)；123例未通过听力筛查的新生儿中有20例携带常见耳聋基因突变，高危人群携带率为16.26%(20/123)，高危人群组常见耳聋基因突变携带率高于随机人群组(P<0.05)。最终在37例进行听力学诊断的新生儿中确诊中度耳聋1例，重度耳聋4例，确诊为听力损失的5例新生儿中有1例为235delC纯合突变型，1例为235delC/299-300delAT复合杂合突变型，2例为IVS7-2A>G纯合突变型，1例为IVS7-2A>G/2168A>G复合杂合突变型。结论将联合筛查应用于临床可以扩大听力障碍的防治范围，有效提高新生儿耳聋的检出率，有助于提早发现新生儿听力障碍并实施早期个性化靶向预防，为患儿提供有针对性的医疗咨询与干预。

听力检查；基因检测；婴儿，新生

听力障碍是新生儿常见的出生缺陷，听力障碍在新生儿期的发生率为1‰～1.86‰[1]。听觉是语言发育的基础，听力障碍会影响语言发育，严重者还有行为异常，给患儿的交流和学习带来困难[2]。新生儿听力筛查工作的广泛开展使得人们能早日发现听力障碍患儿，极大程度降低了因聋致哑的发生率。常见耳聋基因检测有助于明确听力障碍患儿的遗传学病因，并能提早发现迟发性耳聋，避免药物性耳聋，以达到预防后天耳聋发生的目的。因此，将听力筛查联合耳聋基因检测应用于临床有助于听力障碍的早发现、早诊断、早治疗[3]，这对降低出生缺陷、提高人口素质有着及其重要的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年1月—2017年5月在河北省石家庄市妇幼保健院出生并进行听力筛查联合常见耳聋基因检测的新生儿23 763例，男性12 398例，女性11 365例。

1.2 筛查方法 新生儿出生3d后采用初筛耳声发射(otoacousticemissionOAE)进行听力初筛，未通过初筛的新生儿于出生42d采用OAE+自动听性脑干反应(automatedauditorybrainstemresponse,AABR)进行听力复筛，未通过复筛的新生儿于出生3个月进行听力学诊断。常见耳聋基因检测于新生儿出生后3d采足跟血3滴于专用滤纸片上自然晾干，应用荧光PCR法对常见耳聋基因GJB2(235delC、299-300delAT)、SLC26A4(IVS7-2A>G、2168A>G)、mtDNA12SrRNA(1555A>G)进行检测。

1.3 随访方法 对于目标随访对象定期召回检查，不能回院者定期电话随访。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件分析数据，计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 听力筛查结果 23 763例新生儿中20 443例通过了听力初筛，初筛通过率为86.03%(20 443/23 763)。初筛未通过的3 320例新生儿中有3 087例于出生后42d接受了听力复筛，其中2 964例通过了复筛，复筛通过率96.02%(2 964/3 087)。未通过复筛的123例新生儿家属被告知于新生儿3个月时进行听力学诊断，仅有37例前来确诊，最终在37例进行听力学诊断的新生儿中确诊5例听力损失，其中3例为前庭导水管扩张综合征，2例为先天遗传性耳聋。

2.2 常见耳聋基因检测结果 23 763例新生儿(随机人群组)中共检出960例耳聋基因突变携带者，随机人群常见耳聋基因突变携带率为4.04%(960/23 763)；未通过听力筛查的123例新生儿(高危人群组)中有20例携带常见耳聋基因突变，高危人群常见耳聋基因突变携带率为16.26%(20/123)。高危人群组常见耳聋基因突变携带率高于随机人群组，差异有统计学意义(χ2=46.445，P=0.000)。见表1，2。

确诊为听力损失的5例新生儿中有1例为235delC纯合突变型，1例为235delC/299-300delAT复合杂合突变型，2例为IVS7-2A>G纯合突变型，1例为IVS7-2A>G/2168A>G复合杂合突变型。其中携带235delC杂合/299-300delAT杂合复合杂合突变型的新生儿为中度耳聋，其余4例均为重度耳聋。

表1 23 763例新生儿常见耳聋基因突变结果Table 1 Mutation results of common deafness gene in 23 763 newborns

表2 123例未通过听力筛查的新生儿耳聋基因突变结果Table 2 Mutation results of deafness genes in 123 infants unpassed the hearing screening

3 讨 论

3.1 听力筛查联合耳聋基因检测意义重大 OAE是一种声能量，它产生于耳蜗，并经过听骨链和鼓膜传导到外耳道[4]，只有在中耳功能正常的前提下才能检测到此声信号。OAE的临床意义为提供了一条检测耳蜗放大功能和外毛细胞功能完整性的途经，但它并不能检测出听觉中枢及神经传导通路有无病变[5]。AABR则是OAE的有效补充[6],能全面反映耳蜗、听神经传导通路和脑干听觉功能状态。因此，临床常用初筛使用OAE，未通过者使用AABR进行复筛的联合筛查方式以提高检测的准确率[7]。但是即便OAE联合AABR进行检测，听力筛查只能反映筛查当时的听力情况，不能反映筛查时尚无表型的耳聋，耳聋基因检测则进一步提高了听力筛查的检出率，不但可以提前检出迟发性耳聋和药物性耳聋，而且可以对患者进行遗传咨询与生活指导[8]。本研究共计联合筛查23 763例新生儿，受试者来源于石家庄市区及周围各县区，所得听力筛查通过率及耳聋基因携带率有地域代表性，基因筛查中以GJB2基因235delC位点突变频率最高，在先天遗传性耳聋患者检测时应首先考虑筛查该位点。

3.2 复筛通过率高的原因分析 本研究未通过初筛的新生儿3 320例中有3 087例于产后42 d接受了听力复筛，2 964例通过了AABR筛查，复筛通过率为96.02%(2 964/3 087)。对于通过复筛的2 964例新生儿而言，有可能是因为新生儿外耳道和中耳腔存在羊水、胎脂、胎性残积物滞留，对传入的声刺激和传出的反应信号造成衰减，导致耳声发射能量减弱或消失，造成了听力筛查“未通过”的假象。随着吃奶、哭闹等带动软骨运动，可以使一部分羊水和胎性残积物排除，从而在产后42 d复筛时顺利通过[9]。另外，早产儿和低体质量儿听力传导和神经系统发育可能不成熟[10]，住院期间听力筛查未通过属暂时性，随着身体各器官的发育，产后42 d复查时听力筛查通过率会明显提高。

3.3 耳聋基因检测对临床的指导意义

3.3.1 提早确诊时间、提高确诊率 新生儿耳聋基因检测可以将遗传性耳聋的确诊时间提前到出生后2周，并避免了不确定因素的影响，提高了诊断效率[11]，提高了患儿家长对遗传性耳聋的认识。耳聋基因检测还可对出生时通过了听力筛查但未通过基因检测的新生儿行进一步基因诊断及听力学监测[12]，避免迟发性耳聋和药物性耳聋的发生。

3.3.2 未通过听力筛查的新生儿是高危人群 本研究结果显示高危人群组常见耳聋基因突变携带率高于随机人群组(P<0.05)。说明未通过听力筛查的新生儿是携带耳聋基因突变的高危人群，应引起家长的高度重视，应对患儿家长进行遗传性耳聋的宣教及育儿指导，对携带有耳聋基因突变的新生儿应定期进行听力学检测，密切关注其听力变化情况。

3.3.3 特殊病例跟踪 本研究中有1例235delC纯合突变型新生儿通过了听力筛查并于后期3年的随访及听力学检测中均证明听力发育良好，其父母均为235delC杂合突变型且纯音听阈测试结果正常，三人基因检测结果均得到测序验证。有研究显示通过了听力筛查的携带有GJB2纯合突变基因型的新生儿最终确诊听力损失的时间为12～60个月[13]，但这只是基于欧美人群高发的35delG位点。之后国内也曾有携带235delC纯合突变的新生儿在出生时通过了新生儿听力筛查的报道[14]。无论是35delG还是235delC，其致聋特点均是因碱基的缺失导致了基因的框移突变，使翻译过程过早终止，从而引发蛋白质功能障碍，导致听力损失[15],因此，不排除该新生儿患有迟发性耳聋的可能，对此家长也应引起重视，定期对新生儿进行听力检测，并跟踪随访。

综上所述，将新生儿听力筛查联合耳聋基因检测应用于临床，能发现部分听力筛查不能发现的迟发性耳聋和药物性耳聋高危患儿，扩大重点随访-干预对象，有效提高随访率并指导临床提早作出预警，做到早发现、早诊断、早治疗，降低聋哑患儿的发生率，具有长远的现实意义[16]。

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(本文编辑：赵丽洁)

Clinical application of hearing screening combined with deafness gene detection in 23 763 neonates

LI Tian-jie1, LIANG Jian-mei2, WANG Xiang-dong3, WANG Qing-ze4, QIN Li-xin2, YANG Hong-jie5, FENG Ji-zhen1*

(1.DepartmentofEugenicsandGenetics,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China； 2.DepartmentofGynaecology,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China； 3.DepartmentofFunctional，thePinganHospitalofofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050021，China； 4.DepartmentofClinicalLaboratory，theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofXinjiCity，HebeiProvince，Xinji052360，China；5.DepartmentofHealth,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China)

ObjectiveToexplorethevalueofhearingscreeningcombineddeafnessgenesdetectioninclinicalapplicationbyanalyzingthedatafrom23 763newbornsinShijiazhuang.MethodsNewbornbabiesundergosimultaneoushearingscreeningandcommondeafnessgenetestingat3dafterbirth.Thetwo-stepscreeningmethodwasusedinhearingscreening.Otoacousticemission(OAE)wasusedatthebeginningofthescreenandOAE+automatedauditorybrainstemresponsewasusedonthosewhofailedthefirstscreening.CommondeafnessgenesweredetectedbyfluorescentPCR.Finallyweanalyzedthestatisticaldatasofcombinedscreening.Results20 443fromthe23 763newbornspassedfirsthearingscreeningandthepassingratewas86.03%(20 443/23 763). 3 087newbornsreceptthesecondhearingscreeningand2 964passedit.Thesecondpassingratewas96.02%(2 964/3 087). 960newbornscarriedmutationsofcommondeafnessgenesandthecarrierratewas4.04%(960/23 763)fromtherandompopulationof23 763.Thecarrierratewas16.26%(20/123)inthose123infantsunpassedthehearingscreeningwhowerecalledhighriskpopulation.Significationdifferenceswereobservedbetweenthetwogroupsofrandomandhighrisk(P<0.05).Finally5caseswerediagnosedashearinglossinthe37newbornswhowererecalledforaudiologicaldiagnosis.Wefounda235delChomozygousmutationanda235delC/299-300delATcompoundheterozygousinGJB2geneand2casesofIVS7-2A>GhomozygousmutationandaIVS7-2A>G/ 2168A>GcompoundheterozygousinSLC26A4geneamongthe5hearingloss.The235delC/299-300delATcompoundheterozygouswasdiagnosedasmoderatedeafnessandtheotherswereprofoundhearingloss.ConclusionThesynchronousdetectionforclinicalapplicationcouldexpandthescopeofdeafnesspreventionandimprovethedetectionrateofneonataldeafnesseffectively.Itcontributestotheearlydetectionofneonatalhearingdisordersandprovidesearlyindividualizedtargetedprevention.Itcanprovidetargetedmedicaladviceandinterventionforchildrenwithhearingdisorders.

hearingtests；genetictesting；infant,newborn

2017-07-12；

2017-08-16

河北省医学科学研究重点课题(20170216)

李天洁(1982-)，女，河北安国人，河北省石家庄市妇幼保健院主管检验师，医学硕士，从事耳聋基因等新生儿疾病及孕产妇疾病的筛查研究。

*通讯作者。E-mail：litianjie616@163.com

R764.04

A

1007-3205(2017)09-1054-04

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.09.015