研究欧洲花楸的抑菌作用

舒艳　徐文利　孙晓闪　陕倩倩　李方园　盖红辉

摘 要：欧洲花楸廉价易得，且易于晒干保存。因此，课题组对花楸中的抑菌物质进行分离提取及进行抑菌实验。利用水提醇沉的方法，进行花楸中黄酮素的提取；利用煮沸浓缩方法进行花楸中多糖的提取。并对其相关性质进行研究取得可喜成果。

关键词：花楸；提取；应用

中图分类号：S792.25 文献标志码：A 文章编号：2095-2945（2017）25-0028-02

日益严重的化学合成物质对环境的污染和毒性问题，使得人们对植物天然产物的需求越来越关注。天然植物中的活性成分已成为人们研究的主要对象之一。欧洲花楸廉价易得，易于晒干保存，具有很好的研究价值。针对此问题我们小组成员对欧洲花楸的抑菌作用进行了相应的研究。

1 欧洲花楸的性质及其用途

花楸是原生于北半球凉爽温带区的灌木小树。大多数花楸都会结出亮橙色至红色的浆果串，同时花楸是欧洲树种之一，往北最远生长在北极区的挪威，并且已经在北美广泛种植。长久以来，花楸浆果被用来制作果冻、果酱以及蜜饯类食品，花楸也可以用来制作茶饮及各种各样的酒精饮品。经过实验我们发现花楸浆果是非常好的黃酮素和多糖的来源。

2 欧洲花楸的活性物质提取最佳条件探究

2.1 花楸中黄酮素的最佳提取条件

在本实验中主要是根据试验中提取物的吸光度来测定提取物的浓度，用来确定提取活性物质的最佳提取条件，利用水提醇沉的方法提取花楸的活性物质。捣碎晒干的花楸果实，称取1g花楸于25ml锥形瓶中，分别加入相同体积的体积分数为50%，60%，70%，80%，90%的乙醇溶液，一起分别在在温度为50，55，60，65，70，75，80，85摄氏度水浴加热一小时，进行单因素，且进行40次的对比实验。在加入的体积分数为50%的乙醇溶液在50℃时测得吸光度为0.344；在55℃时测得吸光度为0.368；在60℃时测得吸光度为0.422；在65℃时的吸光度为0.459；在70℃时测得吸光度为0.673；在75℃时测得吸光度为0.851；在80℃时的吸光度为0.779；在85℃时测得吸光度为0.658；在85℃时测得吸光度为0.610，所以在该条件下提取活性物质的最佳温度为75℃。在乙醇体积分数为60%的条件下，当温度为50℃时测得的吸光度为0.466；在55℃时测得的吸光度为0.466；在60℃时测得的吸光度为0.469；在65℃时测得的吸光度为0.513；在温度为70℃时测得的吸光度为0.644；在温度为75℃时测得的吸光度为0.860；在80℃时测得的吸光度为0.684；在温度为85℃时测得的吸光度为0.433；所以在该条件下的最佳提取温度为75℃；当乙醇体积分数为70%条件下，温度为50℃时的吸光度为0.459；温度为55℃时测得的吸光度为0.462；温度为60℃测得的吸光度为0.479；温度为65℃测得的吸光度为0.483；当温度为70℃时测得的吸光度为0.553；温度为75℃时测得的吸光度为0.893；温度为80℃时测得吸光度为0.694；温度为85℃测得吸光度为0.644，所以在该条件下的最佳提取条件为75℃。在乙醇体积分数为80%条件下，温度为50℃时测得吸光度为0.501；温度为55℃时测得吸光度为0.513；温度为60℃时测得吸光度为0.544；温度为65℃时测得吸光度为0.611；温度为70℃时测得吸光度为0.677；温度为75℃时测得的吸光度为0.931；温度为80℃时测得吸光度为0.659；温度为85℃时测得吸光度为0.649，所以在该条件的最佳提取温度为75℃。当乙醇体积分数为90%时，温度为50℃时测得的吸光度为0.487；温度为55℃时测得的吸光度为0.520；温度为60℃时测得的吸光度为0.553；温度为65℃时测得的吸光度为0.672；温度为70℃时测得的吸光度为0.716；温度为75℃时测得吸光度为0.723；温度为80℃时测得吸光度为0.621；温度为85℃时测得吸光度为0.411，所以在该条件最佳提取温度为75℃。综合以上的实验数据分析知提取花楸的最佳条件为乙醇体积分数为80%，最佳的温度为75℃。在75℃，80%乙醇水浴加热条件下，我们进行了料液比（花楸比乙醇体积）为1：12，1：14，1：16，1：18，1：20的实验，结果表明料液比为1：12的提取物所测得的吸光度为0.651；料液比为1：14的提取液所测吸光度为0.554；料液比为1：16的吸光度为0.498；料液比为1：18的吸光度为0.699；料液比为1：20所测得的吸光度为0.629。分析实验数据可得提取黄酮素的最佳料液比为1：18。同时在料液比为1：18，乙醇体积为80%，温度为60℃，65℃，70℃，75℃，80℃，85℃，90℃，95℃，100℃每个温度条件下，同时水浴加热时间为60min，80min，100min的水浴加热实验，在温度为60℃下，60min时所测吸光度为0.611；80min时所测吸光度为0.623；100min时吸光度为0.613，所以在60℃时最佳的水浴加热时间为80min。在温度为65℃时，水浴加热时间为60min时吸光度为0.635；水浴加热时间为80min时吸光度为0.652；水浴加热时间为100min时吸光度为0.630，所以在65℃时的最佳水浴加热时间为80min。在温度为70℃时，水浴加热时间为60min时吸光度为0.655；水浴加热时间为80min时吸光度为0.650，在水浴加热时间为100min时吸光度为0.636。综上，在70℃时，最佳的水浴加热时间为60min。当温度为75℃，水浴加热时间为60min时吸光度为0.691；当水浴加热时间为80min时测得吸光度为0.949；当水浴加热时间为100℃时所测得吸光度为0.677。在温度为80℃时，当水浴加热时间为60min时测得吸光度为0.726；当水浴加热时间为80min时测得吸光度为0.838；当水浴加热时间为100℃时测得吸光度为0.663，所以的在温度为80℃时的最佳水浴加热时间为80min；在温度为85℃时，当水浴加热时间为60min时测得的吸光度为0.669；当水浴加热时间为80min时，测得的吸光度为0.772；当水浴加热时间为100min时测得的吸光度为0.756，所以在85℃时的最佳的水浴加热时间为80min；在温度为90℃的条件下，当水浴加热时间为60min时测得的吸光度为0.495；当水浴加热时间为80min时测得的吸光度为0.556；当水浴加热时间为100min时测得的吸光度为0.498。综上在温度为95℃时的最佳水浴加热时间为80min。在温度为100℃时，当水浴加热时间为60min时测得的吸光度为0.486；当水浴加热时间为80min时测得的吸光度为0.479；当水浴加热时间为100min时，测得的吸光度为0.367，综上得当温度为100℃时最佳的水浴加热时间为80min。通过以上实验数据表明在温度为70℃时最佳水浴加热时间为60min，其吸光度为0.655，而其他组的最佳水浴加热时间为80min，且在温度为75℃时吸光度为最大（0.949）。综上对比分析知提取花楸的活性物质最佳水浴加热时间为80min。通过实验我们分别利用料液比，乙醇浓度，温度，及提取时间的单因素进行花楸中活性物质（黄酮素）的提取，发现提取黄酮素的最佳条件为75摄氏度，80%乙醇，料液比为1：18，水浴加热时间为80分钟。endprint

2.2 花楸中多糖的提取

我们将洗净的晒干花楸称取100g于烧杯中，然后进行煮沸浓缩（煮沸时间为1h），然后将提取液进行分离，萃取，浓缩，收集多糖的提取液。同时进行三组实验，排除不必要的误差。实验发现花楸中多糖提取物较易取得，将提取的多糖收集于锥形瓶中作为抑菌实验的备用品。

2.3 进行花楸活性物质的抑菌实验

为了研究欧洲花楸果实乙醇提取物的体外抑菌特性，测定了提取物对一系列供试细菌和真菌的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度。查阅文献以金黄色葡萄球菌及大肠杆菌为例，了解提取物抑菌时间及抑菌率的关系。结果表明提取物有较强的抑制作用，其最低抑菌浓度较低。121℃湿热处理30min后，抑菌效应下降不大，说明花楸提取物具有良好的热稳定性及紫外光稳定性，其抑菌作用随抑菌时间的延长而增强，实物防腐实验效果良好。

同时我们以花楸中黄酮素含量为指标，以提取温度、提取时间、提取次数、料液比为因素，利用正交试验法进行试验设计，对传统水提醇沉的方法提取花楸多糖和黄酮素的工艺进行优化研究。用实验室的手段确定了从花楸中提取黄酮素的最佳条件，并用D101型大孔吸附树脂针对提取液进行吸附，并且从其中提取出纯净的黄酮等干品，为接下来的一系列实验提供了基础。接下来又采用了对比分析，分别将普通保鲜剂和欧洲花楸提取物进行对比，常见的抑菌剂和花楸提取物进行对比，实验表明提取的黄酮对食品具有很好的抑菌保鲜作用。在试验中，我们将提取的多糖和黄酮素提取物分别作用于新鲜的蛋糕上，同时将同样大小的蛋糕上面不添加任何保鲜物质作为空白对照。实验发现添加黄酮素或多糖的那组实验蛋糕保鲜时间更长，不容易被坏掉。同时我们将含有黄酮素的蛋糕和正常蛋糕分别喂生理体重状况相同的小鼠，发现添加黄酮素的和正常蛋糕一样对小鼠无害。因此，黄酮素及多糖具有较强的抑菌作用且对小鼠无害。

3 结束语

综上所述，花楸中的活性物质具有很强的抑菌作用，且花楸提取物天然无公害，因此具有广泛的实用价值和经济价值。经查阅相关文献发现，花楸中的黄酮素还具有抗氧化，抗高血压，抗肿瘤，降血脂的功效。因为传统的抑菌剂和防腐剂都是化学制品，对人体有一定的伤害。国际上食品防腐劑和抑菌剂正向天然无毒的趋势发展，筛选抑菌的天然物质已经越来越受到重视。花楸果实具有很高的杀菌能力并且无毒，再加上花楸果实的成本低，从而降低抑菌剂和防腐剂的成本，所以花楸果实可以实现工业化生产并运用于食品杀菌保鲜。

参考文献：

[1]江苏新医学院.中药大辞典（上海）[M].上海：上海人民出版社，1979：335.

[2李迪民，陈坚，王岩.天山花楸水煎提取液药理学研究[J].中草药，1996，26（6）：302.endprint