醋蒸五味子高效液相色谱特征指纹图谱研究

沈黎

（安徽省阜阳市食品药品稽查支队，安徽 阜阳 236000）

·实验研究·

醋蒸五味子高效液相色谱特征指纹图谱研究

沈黎

（安徽省阜阳市食品药品稽查支队，安徽 阜阳 236000）

目的 建立醋蒸五味子高效液相色谱(HPLC)特征指纹图谱分析方法。方法 采用赛默飞Hypersil GOLD色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 m），流动相为甲醇－水，梯度洗脱，流速为1.0 mL／min，检测波长为250 nm。在此条件下，绘制并分析不同来源10批醋蒸五味子的特征指纹图谱。结果 10批醋蒸五味子有8个共有峰，其HPLC指纹图谱基本一致，但共有峰面积的比值有一定差异。结论 通过HPLC法建立了醋蒸五味子的指纹图谱分析方法，该方法稳定、可靠，重复性好，为醋蒸五味子的质量评价提供了科学依据。

醋蒸五味子；高效液相色谱法；特征指纹图谱

醋蒸五味子为木兰科植物五味子[1]Schisandra chinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实的炮制品，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心功效，可用于治疗久嗽虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗盗汗、津伤口渴、内热消渴、心悸失眠等。五味子主要含木脂素、三萜、挥发油及有机酸等化学成分，其中针对木脂素和三萜[2－4]的研究最多。醋蒸五味子的主要成分为五味子醇甲[5]，其检测专属性较强。五味子指纹图谱文献报道较多[6－12]，但未见醋蒸五味子指纹图谱相关文献。本研究中采用高效液相色谱法，以五味子醇甲为参照指标，对10批不同来源的醋蒸五味子进行指纹图谱研究，并对其相似度进行比较，从而为醋蒸五味子的质量评价提供科学依据。现报道如下。

1 仪器与试药

Ultimate3000型高效液相色谱仪（美国赛默飞公司）；AP205型天平（瑞士梅特勒公司，精度0.01 mg），电子分析天平（德国赛多利斯公司，精度0.1 mg）；超声波清洗器（Elam公司）。超纯水（PURELAB Ultra公司）。

五味子醇甲对照品（中国食品药品检定研究院，批号为110726－201516，纯度为99.9%）；甲醇为色谱级；其他试剂为分析纯。试验用醋蒸五味子药材由安徽阜阳万生中药饮片厂提供，编号分别为CWWZ－01－01至CWWZ－01－10，收集时间均为2016年10月，产地分别为辽宁、辽宁、吉林、辽宁、黑龙江、黑龙江、吉林、辽宁、辽宁、黑龙江。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：赛默飞Hypersil GOLD色谱柱（250 mm× 4.6 mm，5 μm）；流动相：A为甲醇，B为水，梯度洗脱(0～6 min时 A为 30%～65%，6～30 min时 A为65%，30～50 min时A为65% ～90%，50～60 min时A为90%)；流速：1.0 mL／min；柱温：35.0℃；检测波长：250 nm；进样量：10 μL。

2.2 溶液的制备

对照品溶液：称取五味子醇甲对照品12.98 mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成每1 mL约含0.12 mg的对照品溶液。

供试品溶液：取本品粉末（过3号筛）约0.25 g，精密称定，置20 mL容量瓶中，加甲醇约18 mL，超声处理（功率250 W，频率20 kHz）20 min，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 方法学考察

取3号样品6份，按2.2项下方法制备供试品溶液，注入液相色谱仪，进样，测定供试品溶液中各色谱峰的保留时间，记录色谱图。结果表明，各主要色谱峰相对保留时间和其相对峰面积无明显变化，以S号峰为内标峰，其 RSD分别为0.4%和0.2%。

取3号样品6份，按2.2项下方法制备供试品溶液，注入液相色谱仪，进样，测定供试品溶液中各色谱峰的保留时间，记录色谱图；并每隔一定时间测定1次峰面积积分值，直至24 h。结果表明，各主要色谱峰相对保留时间和其相对峰面积无明显变化，以S号峰为内标峰，其 RSD分别为0.3%和0.1%。

图1 醋蒸五味子的指纹图谱

2.4 指纹图谱的建立

2.4.1 共有峰的确定

取收集到的10批醋蒸五味子，按2.2项下方法制备供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，10批样品测定所得到的色谱图，以1号样品为参照模板分析处理。结果见图1，共8个共有峰。10批醋蒸五味子样品的色谱指纹图谱与标准对照的指纹图谱的相似度均在0.9以上，符合指纹图谱研究的技术要求。

2.4.2 对照特征图谱的建立

取醋蒸五味子1－10号样品，按2.2项下方法制备供试品溶液，按拟订色谱条件进行分析，即得醋蒸五味子的对照特征图谱。结果见图2。

图2 醋蒸五味子对照特征图谱（其中S峰为五味子醇甲）

3 讨论

五味子是我国长期使用的补益类中药，其所含的木脂素类成分具有抗肝脏损伤、抗氧化作用，木脂素类成分与五味子质量息息相关。本研究中发现，不同批次醋蒸五味子的特征共有峰相对保留时间基本一致，但其相对峰面积存在一定差异，说明各地区收集的五味子所含化学成分基本相同，但含量有一定差异。本试验以专属性较强的五味子醇甲为参照指标，建立了醋蒸五味子的指纹特征图谱，为后续醋蒸五味子的质量控制研究提供了一定的依据。

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HPLC Characteristic Fingerprint of Schisandra Chinensis Stir－Baked with Vinegar

Shen Li
（Fuyang Food and Drug Inspection Detachment，Fuyang，Anhui，China 236000）

Objective To establish an HPLC characteristic fingerprintmethod for Schisandra Chinensisstir－baked with vinegar.M ethods Thermo Fisher Hypersil GOLD column（250 mm×4.6 mm，5 μm）was adopted，the mobile phase was methanol water with gradient elution，the flow rate was 1.0 mL／min，the detection wavelength was 250 nm.Under these conditions，the characteristic fingerprints of 10 batches ofSchisandra Chinensis stir－baked with vinegar were drawn and analyzed.Results 10 batches ofSchisandra Chinensis stir－baked with vinegar had a total of 8 peaks，the HPLC characteristic fingerprints were basically the same，but the ratios of the total peak area had some differences.Conclusion The method of characteristic fingerprint of Schisandra Chinensis stir－baked with vinegar is established by HPLC.The method is stable，reliable and reproducible，which can provide scientific basis for the quality evaluation of Schisandra Chinensis stir－baked with vinegar.

Schisandra Chinensis stir－baked with vinegar；HPLC；characteristic fingerprint

R284.1

A

1006－4931(2017)16－0013－02

2017－02－08)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.16.004

沈黎，大学本科，主管药师，主要从事食品药品稽查和检验工作，(电话)0558－2183021(电子信箱)244125604＠qq.com。