胃肠间质瘤基因突变与临床病理特征、免疫组化表达分析

葛运贞

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.16.035

[摘要] 目的 分析胃肠间质瘤基因突变与临床病理特征、免疫组化表达情况。方法 利用免疫组化方式，分析方便选取该院于2011年12月—2016年12月收治的200例GISTs者以及100例非GISTs者基因表达和突变情况。 结果 CD117，DOG1，IGF1R的阳性表达率为：96.0%，93.0%以及6.0%。100例非GISTs肿瘤样本CD117以及DOG1的阳性表达率为17.0%和10.0%（P<0.05）。130例存在c-KIT基因突变。GISTs者外显子表达，CD117和DOG1表达情况和c-KIT以及PDGFRA基因突变无相关性，IGF1R于野生型GISTs中阳性率比突变型GISTs高（P<0.01）。不同种类的肿瘤位置之间差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 联合检测CD117以及DOG1能够提升GISTs的准确程度。IGF1R可能为野生型GISTs特异性的免疫组化指标以及潜在性治疗靶点。IGF1R可能为野生型GISTs特异性的免疫组化指标以及潜在性治疗靶点。对预测GISTs者使用酪氨酸激酶抑制药物的治疗效果和预后有着相当重要的指导价值。

[关键词] 胃肠间质瘤；基因突变；病理特征；免疫组化；表达情况

[中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）06（a）-0035-03

Analysis of Gene Mutation of Gastrointestinal Stromal Tumors and Clinical Pathological Features and Immunohistochemical Expression

GE Yun-zhen

Department of Pathology， Linyi Economic and Technological Development Zone People's Hospital， Linyi， Shandong Province， 276023 China

[Abstract] Objective To analyze the gene mutation of gastrointestinal stromal tumors and clinical pathological features and immunohistochemical expression. Methods The gene expression and mutation situation 200 cases of GISTs patients and 100 cases of non- GISTs patients from December 2011 to Dcember 2016 were analyzed by the immunohistochemical method. Results The positive expression rates of CD117，DOG1，IGF1R was respectively 96.0%，93.0%， 6.0%， and the positive expression rate of CD117 and DOG1 in 100 non- GISTs patients was 17.0% and 10.0%（P<0.05）， and 130 cases were with gene mutation， and the CD117 and DOG1expressiona and c-KIT and PDGFRA gene mutation had no correlation， and the positive rate of IGF1R in mild type GISTs was higher than that of mutation type GISTs（P<0.01）， and the difference between different tumors was obvious（P<0.05）. Conclusion The combined test of CD117 and DOG1 can improve the accuracy of GISTs， IGF1R may be the immunohistochemical index of mild type GISTs specificity and potential treatment target， which is of important guidance value of preventing the treatment effect of oxyphenylaminopropionic acid suppressing drug and prognosis.

[Key words] Gastrointestinal stromal tumor； Gene mutation； Pathological features； Immunohistochemical； Expression

胃肠道间质瘤为一种特殊型、独立细胞，属其起源并非神经元或间质，其可能为一种特殊种类及细胞[1]。在此同时具备干细胞特征，就临床功能来看，主要为胃肠道平滑肌起搏细胞，与整个消化道蠕动存在相关性[2]。为了全面认识胃肠间质瘤，并在日常工作中全面掌握其診断方式，结合实际情况，该文方便选择2011年12月—2016年12月该院收治的200例胃肠间质瘤患者为研究对象，全面分析其基因突变与临床病理特征、免疫组化表达情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选择该院收治的200例胃肠间质瘤患者为研究对象。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化染色 使用Abcam公司生产的CD117，DOG1，IGF1R抗体，进行免疫组化染色。

1.2.2 核酸提取 对GISTs者蜡块进行处理。每个蜡块取8 μm组织，选择5条，完成脱蜡之后，使用DNA试剂盒，结合说明书步骤，完成沉淀、吸附以及洗脱等具体步骤，提取出DNA样本，实施纯度检测。在260 nm/280 nm位置测量吸光值，具体为1.8以上。

1.2.3 基因突变检查 该实验使用美国西格诺公司生产的DNA质谱阵列基因分析设备，对患者基因突变情况进行检测。这种方式以基质借助辅助激光解析电离飞行时间质谱技术得以实现。

1.3 统計方法

该实验使用SPSS 21.0统计学软件分析和处理数据，对计量资料使用t检验，计数资料使用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 GISTs者的CD117，DOG1，IGF1R表达详情

CD117和DOG1的染色主要为细胞质，少数定位在细胞膜。IGF1R主要在细胞膜。以上3种均为弥漫性分布。两组的CD117，DOG1，IGF1R表达详情见表1。

表1 两组患者的CD117，DOG1，IGF1R阳性表达详情

2.2 CD117，DOG1，IGF1R和胃肠间质瘤的病理特征关系

CD117的表达和肿瘤位置以及组织学种类相关；DOG1表达和肿瘤规格以及危险程度相关。

在肠道来源的GISTs患者中，CD117阳性率显著比其他位置高。且在上皮型以及梭形病理类型中呈现为高表达趋势。IGF1R和组织学类型，危险程度，核分裂象等均无关。

2.3 肿瘤生长方式以及规格

腔内型 28例，突向消化道腔内，肌壁间 102例，同时向黏膜以及浆膜面隆起，表面光滑/溃疡，浆膜下和其他位置70 例，肿瘤表现为结节样增长，直径规格为0.2～31.3 cm.

2.4 基因变异分析情况

2.4.1 c-KIT基因突变情况 200例患者中，130例在存在c-KIT基因突变。仅有1例患者的CD117免疫组化呈现为阴性。 外显子11突变108例，外显子9突变64例， 外显子13突变10例，外显子17突变17例。

2.4.2 PDGFRA基因突变 PDGFRA基因突变人数为44例。外显子18 D842V突变者10例，外显子12 V561D突变者34例。

2.5 c-KIT以及PDGFRA基因突变病理关系情况

PDGFRA以及c-KIT基因突变和年龄，性别，肿瘤情况，组织学类型，核分裂像以及危险程度之间差异无统计学意义（P>0.05）。不同种类的肿瘤位置之间差异有统计学意义（P<0.05）。胃部和小肠在病变者大都为c-KIT突变，结肠和其他部位以PDGFRA基因突变为主。

2.6 c-KIT以及PDGFRA基因突变和CD117，DOG1，IGF1R关联性

CD117和DOG1表达情况和c-KIT以及PDGFRA基因突变不存在相关性，IGF1R于野生型GISTs中阳性率比突变型GISTs高（P<0.01）。见表2。

表2 c-KIT以及PDGFRA基因突变和CD117，DOG1，IGF1R关联性

注：*P<0.05。

3 讨论

CD117为c-KIT基因的蛋白表达物之一[2-4]。大约有83%～95%的GISTs中呈现为表达趋势。其为诊断GISTs的特异性指标之一。值得说明的是，大约有5%的GISTs患者CD117表达为阴性，另外，CD117在多种肿瘤细胞中可呈现出表达趋势，进而提升了诊断难度。该组的CD117阳性表达率为96.0%，和国内报道相似[5]，国内报道的CD117为97.52%。

既往报道证实[6]，和CD117相比，DOG1阳性表达量稍高，该组案例则显示，DOG1在GISTs表达阳性率为93.0%，比CD117低。在100例非GISTs肿瘤样本中，CD117以及DOG1的阳性表达率分别为17.0%（34/200）和10.0%（20/200）。两组数据的CD117和DOG1阳性表达情况差异有统计学意义（P<0.01）。以上结果证实，CD117和DOG1能够提升疾病诊断率，两者联合检测，可取得相对显著效果。

深度研究证实[7]，CD117的表达和肿瘤位置以及组织学种类相关；DOG1表达和肿瘤规格以及危险程度相关[8]。在梭形以及上皮型呈现出高表达趋势。由此可见，两者联合检查对于差异化病理特征判断有着一定现实意义。上述基因表达和c-KIT以及PDGFRA基因突变情况不存在相关性，证实其不能作为预测疾病基因突变的指标。在GISTs患者中，c-KIT以及PDGFRA基因突变能够指导TKIs小分子靶向治疗[11]。

该研究中还证实，不同种类的肿瘤位置之间差异有统计学意义（P>0.05）。胃部和小肠在病变者大都为c-KIT突变，结肠和其他部位以PDGFRA基因突变为主。已知的TKIs对于差异化基因突变位点的GISTs存在差异性。

综上所述，联合检测CD117以及DOG1能够提升GISTs的准确程度，这一点在CD117内表达中被尤为体现。上述两者和患者的临床病理特点存在相关性。肿瘤表现为结节样增长，IGF1R可能为野生型GISTs特异性的免疫组化指标以及潜在性治疗靶点。结合肿瘤发生位置和基因突变检测全面结合，对于预测GISTs病患使用酪氨酸激酶抑制药物的治疗效果和预后有着相当重要的指导价值。

[参考文献]

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（收稿日期：2017-03-09）