中华枸杞组培快繁技术研究*

2017-09-07吴海红吕春晶王丽波

辽宁农业科学 2017年4期

关键词：河沙草炭外植体

李丹，吴海红，岳玲，吕春晶，王丽波

（1.辽宁省农业科学院花卉研究所，辽宁沈阳 110161； 2.辽宁省农业科学院果树研究所，辽宁熊岳115009）

中华枸杞组培快繁技术研究*

李丹1，吴海红1，岳玲1，吕春晶2，王丽波1

（1.辽宁省农业科学院花卉研究所，辽宁沈阳 110161； 2.辽宁省农业科学院果树研究所，辽宁熊岳115009）

试验以中华枸杞带嫩芽的茎段作为外植体开展组培快繁技术研究，通过不同激素浓度配比对外植体芽诱导培养、增殖培养和生根培养各个阶段最佳培养基组合进行研究。试验表明：芽诱导培养基以Ms＋6-BA 0.5＋IAA 0.1为最佳；芽增殖以Ms＋6-BA 0.5＋IAA 2.0为最佳；生根培养以1/2Ms＋NAA 0.1-0.5为最佳，栽培基质以草炭∶河沙＝1∶1为宜。

中华枸杞；植物激素；组织培养

枸杞（Lycium chinense），落叶小灌木，茄科，枸杞属，17世纪中叶被引种到法国，其后在欧洲、地中海沿岸国家及美洲国家相继栽培和发展。枸杞为名贵的中药材，又是良好的滋补品。近年来，枸杞又发展成为保健饮料和食品的加工原料，需求量日益增加。中华枸杞分布在我国东北、河北、山西、陕西等地区。中华枸杞用种子繁殖，其后代分离严重，选出的优良植株，靠分蘖繁殖很慢，用常规扦插方法，存在繁殖材料来源有限，成活率低等问题。本试验以辽宁省农业科学院引进的中华枸杞的嫩芽作为外植体，采用组培的方法扩繁，具有用材少，繁殖系数高，速度快等优点。

1 材料与方法

1.1 材料选择

材料于2015年7月采于辽宁省农业科学院院内，选生长旺盛、健康的中华枸杞植株，采当年生的嫩枝作为外植体。

1.2 外植体处理

选用优良单株当年生嫩枝，剪去叶片，只留有嫩芽，用洗衣粉水洗去表面污垢，用流水冲洗30 min左右。将嫩枝剪成2 cm左右带1个芽的小段，放入75%乙醇溶液中浸泡5～10 s，用无菌水冲洗，用滤纸吸干，再放入0.1%的氯化汞溶液中消毒，芽消毒时间设计3、5、7 min，用无菌水冲洗3～4次，将带芽的茎段两端与氯化汞接触处各切掉0.5 cm，接种到诱导培养上。

1.3 培养基选择

1.3.1 诱导培养基选择

以Ms为基本培养基，分别添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg／L和 IAA 0.1、0.5、1.0 mg／L浓度的激素，共计9个组合，pH值调为5.8，添加3% 浓度的绵白糖。将处理好的外植体接种到以上培养基中，每瓶接种一个芽。

1.3.2 增殖培养基

以Ms为基本培养基，分别添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg／L和 IAA 0.5、1.0、2.0 mg／L浓度的激素，共计9个组合，pH值调为5.8，添加3% 浓度的绵白糖。将诱导出的愈伤组织切成0.5 cm见方的小块，接种到增殖培养基中，每瓶接种1块。

1.3.3 生根培养基

以1／2 Ms为基本培养基，分别添加 NAA0、0.1、0.5、1.0 mg／L，共计 4个组合，添加 2%浓度的绵白糖。待不定芽长到2 cm左右时切下接种到生根培养基中，每瓶接种4个芽，接种20瓶，14 d后统计生根情况。

1.3.4 生根苗移栽

待瓶苗生有2～3条以上根时即可进行移栽，移栽基质分别设定草炭、草炭∶河沙1∶1、草炭∶蛭石1∶1、河沙四种组合，14 d后观察成活率。

2 结果与分析

2.1 外植体灭菌时间选择

如表1所示，枸杞芽的最佳灭菌时间是5 min，时间过短芽表面的菌不能完全杀死，时间过长由于芽的组织比较嫩，氯化汞会把芽的生长点破坏掉，使芽不能萌发，也不能产生愈伤组织。

表1 外植体灭菌时间的选择

2.2 诱导培养基的选择

将灭完菌的芽接种到6-BA与IAA的9个组合中（见表2），每个组合中均有愈伤组织长出，但数量和质地有很大差别，高浓度的6-BA的组合中长出的愈伤组织大都产生了玻璃化的现象，只有少量的芽长出，6-BA 0.5与IAA 0.1的组合长出的愈伤组织呈绿色，质地紧密有多量的芽长出，由此可见，这配比组合有利于枸杞的愈伤组织的诱导。

2.3 芽增殖培养基的选择

将带有芽的愈伤组织切成带芽小块，每瓶接种1块愈伤组织，每个组合接种40瓶，芽数随机，15 d后统计增殖芽数。高浓度的6-BA与低浓度的IAA组合有利于芽的增殖，高浓度的IAA与低浓度的6-BA组合有利于芽的生长，在生产中应选择既有利于芽分化又有利于生长的激素，以6-BA 0.5＋IAA 2.0的组合效果最佳。

2.4 生根培养基的选择

将超过2 cm的芽切下接种到生根培养基中，以1／2 MS为基本培养基，不添加任何激素均能生根，但生根率较低，添加NAA 0.1～0.5效果最好，生根率可达98%。

2.5 栽培基质的选择

选择生有2～3条根，生长健壮的苗进行移栽，移栽前2 d把瓶盖打开炼苗，移栽时将苗根部的琼脂清洗干净，防止滋生霉菌导致根系腐烂。由图1可以看出，草炭∶河沙＝1∶1的基质适合枸杞组培苗的生长，移栽后苗注意遮荫，待14 d左右苗完全成活后，撤掉遮荫。