β-环糊精包合厚朴、苍术和枳实挥发油的工艺研究

曾上敏，秦斯民，曹华玲

(广东食品药品职业学院，广东 广州 510520)

β-环糊精包合厚朴、苍术和枳实挥发油的工艺研究

曾上敏，秦斯民，曹华玲

(广东食品药品职业学院，广东 广州 510520)

目的: 优选复芪益气颗粒中挥发油的β-环糊精包合工艺。方法: 以挥发油利用率和包合物收得率作为综合指标，采用正交试验法对挥发油β-CD包合物的工艺进行优化，并采用TLC法和显微法对包合物进行了分析。结果: 当油与β-环糊精的用量为1：8 ( mL：g)，包合温度为45 ℃，包合时间为2h，β-CD与加水量的比例为1：10(g：mL)，所形成的包合物得到了TLC试验和显微证实。结论: 本实验为确定厚朴、苍术和枳实混合挥发油的合理包合工艺提供了实验依据。

厚朴；苍术；枳实；挥发油；β-环糊精；包合工艺

复芪益气颗粒为临床经验方，由黄芪、山药、厚朴、苍术、枳实等8味药材组成，具有补脾固肾，益气养阴之功效，用于气阴不足、内热消渴、体倦乏力所致的消渴病。方中厚朴、苍术和枳实均含较多量挥发油，是其重要的药理活性成分之一[1-3]，具有抗胃溃疡、抗病毒、抗炎、降糖[4]的作用。挥发油具有对光和热不稳定，为避免挥发油在制剂生产过程中的损失，增加制剂稳定性，提高挥发油的利用率，本文采用饱和水溶液法制备挥发油的β-CD包合物，并采用正交试验法对各影响因素进行考察，以挥发油利用率和包合物收得率作为综合指标对包合工艺进行优选，并且用薄层色谱法和显微镜法对包合物进行验证。

1 仪器与试药

1.1 仪器

SHZ-D型循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限公司)；DF-101S集热式温热加热磁力搅拌器(巩义市英屿予华仪器厂)；RE旋转蒸发仪( 上海亚荣生化仪器厂)；挥发油提取器 (上海玻璃仪器厂)；DZF-6050型真空干燥箱(上海惊宏实验设备有限公司)；BX51型奥林巴斯显微镜(日本奥林巴斯株式会社)。

1.2 试药

2 方法与结果

2.1 厚朴、苍术和枳实混合挥发油的制备

称取一定量的厚朴、苍术和枳实，加12倍体积水溶液浸泡0. 5 h，按《中国药典》2015年版一部附录[5]提取挥发油6h，收集挥发油成分，并用乙醚萃取提取液三次，加无水硫酸钠脱水[6]，氮吹除去乙醚，最终得到棕黄色挥发油。

2.2 正交优化试验设计

在单因素实验上，确定油与β-CD的比例(mL：g)、β-CD与加水量的比例(g：mL)、包合温度(℃)和包合时间(h)为主要影响因素，以挥发油利用率、包合物率为综合指标，采用 L9(34) 正交试验法对上述四个因素进行综合考察，因素水平见表1。

表1 正交试验因素水平表

2.3 包合物的制备[7]

称取相应倍数量的β-CD，加入适量蒸馏水置于沸水浴加热溶解成β-CD溶液，精密量取挥发油，用无水乙醇稀释(油：醇=2：1)，用移液管将挥发油稀释液注入β-CD饱和溶液中，恒温搅拌，取出于冰箱冷藏24h，抽滤，用石油醚I洗涤，冻干，得β-CD包合挥发油的包合物。

2.4 挥发油加标回收试验

女人通过几层关系找到了结识“田科”的途径，她是在等待时机，必须是绝好的时机，不能失败的时机，而且要一下子便抓住，这对于自己复仇计划的成功是有好处的。

取挥发油的乙醇溶液(油：醇=2：1)置于250mL圆底烧瓶中，加200mL蒸馏水提取挥发油，至挥发油不增为止。平行提取3次，平均得油量0. 97 mL( n = 3) ，回收率为97. 0%。

2.5 挥发油利用率及包合物得率的测定

将干燥包合物精密称定，置于装有沸石的圆底烧瓶中，加水300 mL，按2. 1 项下方法连接挥发油测定器，加热6 h，至油量不增时停止加热，放冷0. 5 h时读数，即得提取挥发油体积。挥发油提取率和包合率见表2，方差见表3。以挥发油提取率和包合率对试验条件进行综合评分。

综合得分=挥发油提取率评分+包合率评分

挥发油提取率=包合物中挥发油量/(油的加入量×加标回收率)×100%

挥发油利用率评分=(0.7/最大挥发油利用率×挥发油利用率)×100

包合物得率=包合物的质量/(β-CD +投油量)×100%

包合物得率评分=(0.3/最大包合物得率含量×包合物得率)×100

表2 挥发油β-CD包合物制备工艺优选正交试验安排及结果

表3 方差分析表

注：F0.05(2，2)=19.000

由表2直观分析可知，影响包合效果的顺序为A>D>C>B，即油与β-CD的比例影响最大，其次是包合温度，再其次是搅拌时间，最后是β-CD与加水量的比例；表3方差分析结果表明，油与β-CD用量比例对包合影响显著，β-CD与加水量的比例，包合时间和包合温度均无显著性影响，因此，从节约原料和制备时间考虑，最终确定最佳包合条件为A2B2C2D1，即β-CD用量为挥发油的8倍量，包合温度 45 ℃，包合时间2. 0 h，加水量为β-CD用量的10倍。

2.6 包合工艺验证试验

按正交试验筛选出最佳工艺条件A2B2C2D1进行验证实验，结果见表4。

表4 验证试验结果

结果表明，正交试验所确定的β-CD包合挥发油工艺稳定。

2.7 包合物的质量研究[8-9]

2.7.1 薄层色谱法

取混合挥发油适量，按最佳包合工艺条件制备β-CD包合物。取混合挥发油β-CD包合物适量，加5mL乙酸乙酯浸泡30min，过滤后的溶液为包合物供试品溶液I；再取混合挥发油- β-CD包合物，按挥发油提取法提取挥发油，取0.1 mL挥发油加1 mL乙酸乙酯混匀制备成包合物供试品溶液II；取0.1mL混合挥发油加1.0 mL乙酸乙酯混匀为混合挥发油对照溶液Ⅲ；取β-CD适量，按包合物供试品溶液Ⅱ方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2]试验，分别吸取上述 5种溶液点于同一硅胶G板上，以石油醚 ( 60～ 90℃) - 醋酸乙酯 ( 9：1)展开, 取出，晾干，喷以5%香草醛-硫酸溶液, 105℃加热至斑点清晰。

见图1。结果表明，供试品溶液Ⅱ在与对照品色谱相应的位置具有相同的蓝色荧光斑点，而供试品溶液Ⅰ与阴性对照品溶液色谱中均未见任何斑点 (见图 1) ，表明混合挥发油进入了β-环糊精分子内部形成了包合物。

2.7.2 显微镜法

分别取β-CD、挥发油包合物用水溶解，滴于载玻片上，用光学显微镜观察。β-CD 在显微镜下呈板块状结晶，而挥发油包合物无明显结晶状，并呈不规则粉末状，表明β-CD确实与挥发油形成包合物，结果见图2。

图2 β-CD和β-CD包合物的显微镜结果图

4 讨论

本实验采用饱和溶液法制备颗粒中挥发油的β-CD包合物，具有操作方便、包合率高、等优点。将该包合技术应用于挥发油包合于β-CD空腔内，使挥发油由液态变为粉末状，以便于制剂的制备；此方法可以有效避免挥发油与外界分子接触、有效的降低了挥发油挥发油在制剂中的扩散， 提高了挥发油溶解性和稳定性，保证了挥发油制剂的质量。 挥发油与β-CD 投料比对工艺影响极为显著，包合时间和包和温度对工艺影响显著。当挥发油与β-CD 投料比为1∶8，包合温度为45 ℃，包合时间为2 h时，挥发油包合物包合率最高，工艺稳定性较好。并用TLC法证实挥发油β-CD 包合物已经形成。

[1] 付梅红，朱东海，方 婧，等. 苍术的化学、分子生药学和药理学研究进展[J].中国中药杂志，2009，34(20):2699-2672.

[2] 张 红，孙明江，王 凌. 枳实的化学成分及药理作用研究进展[J].中药材，2009，32(11):1787-1790.

[3] 殷帅文，何旭梅，郎锋祥，等. 厚朴化学成分和药理作用研究概况[J]. 贵州农业科学，2007，35(6):133-135.

[4] 刘国生，孙 备，明 亮. 苍术挥发油与水溶性成分的主要药理作用比较[J] 安徽医科大学学报，2003，38(2):124-126.

[5] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(1部)[M]. 北京：化学工业出版社，2010：附录，41，63.

[6] 李成舰，夏新华，彭买姣．β-环糊精包合白术、肉豆蔻挥发油的工艺研究[J]． 湖南中医药大学学报，2007，27( 4) :21-22

[7] 魏小亮，胡久梅，毛 霞. 正交设计法优选川芎挥发油的β-环糊精包合工艺[J]．中国实验方剂学杂志，17(5):46-49.

[8] 金 勇，尚丽霞，张英俊，等. 清热达郁颗粒中挥发油包合工艺研究[J]．时珍国医国药，21(9):2408-2409.

[9] 朱 缨，俞迪佳．蛇床子挥发油羟丙基-β-环糊精包合工艺优选[J]．中国实验方剂学杂志，18(17):28-31.

(本文文献格式：曾上敏，秦斯民，曹华玲，等.β-环糊精包合厚朴、苍术和枳实挥发油的工艺研究[J].山东化工，2017，46(10)：52-54.)

2017-03-28

曾上敏(1988—)，助教，从事药物制剂方面的研究。

R283.6

A

1008-021X(2017)10-0052-03