急性胰腺炎患者血清微管相关蛋白1轻链3水平变化及意义

吴海龙，孙建兵，王建祥

(武汉市普爱医院，武汉430030)

急性胰腺炎患者血清微管相关蛋白1轻链3水平变化及意义

吴海龙，孙建兵，王建祥

(武汉市普爱医院，武汉430030)

目的 观察急性胰腺炎(AP)患者血清微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)水平变化，探讨其临床意义。方法 选择轻型AP患者(MAP组)31例和重症AP患者(SAP组)31例，于发病24 h内抽取血清样本，另选择31例健康者作为对照组。检测血清淀粉酶(Ams)、MAP1-LC3水平，对AP患者的腹部CT进行评分。结果 与对照组比较，MAP组、SAP组血清Ams、MAP1-LC3水平及腹部CT评分均升高(P均<0.05)，其中SAP组较MAP组上述指标升高(P均<0.05)；血清MAP1-LC3水平与腹部CT评分呈正相关(r=0.977，P<0.01)，与Ams呈正相关。结论 AP患者发病早期血清MAP1-LC3水平明显升高，并与AP的病情严重程度呈正相关关系；血清MAP1-LC3可能是早期预测AP严重程度的有效标记物。

急性胰腺炎；自噬；微管相关蛋白1轻链3

急性胰腺炎(AP)起病急、变化快、并发症多，病死率高达20%[1～4]。目前临床上对AP的处理主要是对症支持治疗，仍缺乏特异、有效的治疗措施。目前对AP发病的中心环节胰酶异常的激活机制尚不明确。研究认为，AP的病理基础为胰酶原在胰腺细胞内异常的激活，从而引起胰腺的自我消化，进一步引起局部及全身炎症反应[5～7]。自噬与AP的发生、发展密切相关，微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)是自噬体形成及胞质到空泡靶向囊泡必需的蛋白。本研究通过检测AP患者的血清MAP1-LC3水平，分析血清MAP1-LC3水平与AP严重程度的关系，探讨AP发病的机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2016年1～12月我院收治的AP患者62例，男39例、女23例，年龄(68.2 ± 3.7)岁，均符合中华医学会外科分会胰腺外科学组AP诊治指南中的标准。分为轻型AP(MAP组)、重症AP(SAP组)各31例。患者均在发病24 h内入院，既往无严重的心、脑、肺、肾、肝等基础疾病，术前均未接受生物、免疫治疗并有完整的临床资料。另选择性别、年龄相匹配的健康志愿者31例作为对照组。

1.2 血清淀粉酶(Ams)、MAP1-LC3水平检测 采集AP患者发病24 h内及对照组空腹静脉血标本，离心取上清液，分装入EP管中，-80 ℃保存。使用全自动生化分析仪测定血清Ams水平；双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清MAP1-LC3水平，试剂盒购自武汉优尔生(USCN)科技股份有限公司。

1.3 腹部CT检查方法 AP患者于入院24 h内行腹部增强CT检查，采用改良的CT严重指数评分(MCTSI)标准评分。胰腺炎症反应评分中，正常胰腺为0分，胰腺和(或)胰周炎性改变为2分，单发或多个积液区或胰周脂肪坏死为4分。胰腺坏死评分中，无胰腺坏死为0分，坏死范围≤30%为2分，坏死范围>30%为4分。以胰腺炎症反应评分+胰腺坏死评分计算CT评分。

2 结果

2.1 三组血清Ams、MAP1-LC3水平比较 MAP组和SAP组血清Ams、MAP1-LC3水平均高于对照组，SAP组高于MAP组(P均<0.01)。

表1 三组血清Ams、MAP1-LC3水平比较

注：与对照组比较，*P<0.01；与MAP组比较，#P<0.01。

2.2 三组腹部CT评分比较 对照组、MAP组及SAP组腹部CT评分分别为(0.090±0.021)、(2.409±0.347)、(6.862±0.878)分，MAP组和SAP组腹部CT评分均高于对照组，SAP组高于MAP组(P均<0.01)。

2.3 血清MAP1-LC3与血清Ams、腹部CT评分的相关性 相关性分析显示，血清MAP1-LC3与腹部CT评分呈正相关(r=0.977，P<0.01)，与血清Ams呈正相关(r=0.765,P<0.05)。

3 讨论

AP起病急、变化快、并发症多、病死率高，一直是临床治疗的难点，及时、准确、高效地对AP患者进行合理诊治尤为重要。多数研究认为，AP的病理基础是胰酶原在胰腺细胞内非正常的激活，引起胰腺自我消化，进一步引起局部及全身炎症反应。但胰腺细胞内的酶原具体是如何激活的，目前尚不完全清楚。AP时自噬的改变是近年的研究热点。AP早期阶段的特征性改变是胰腺细胞胞质内出现许多空泡[8]，空泡中含有活化的胰酶。随着自噬相关研究的进展，证实AP早期出现的空泡结构就是自噬空泡[9,10]。自噬与AP的发生、发展密切相关，过度自噬不仅导致AP早期的胰酶异常激活，还可介导炎症的病理生理过程。过度自噬导致线粒破坏，引起线粒体活性氧簇产生增多，导致炎症小体激活。

自噬相关信号转导通路错综复杂。MAP1-LC3是自噬形成调控的主要因子之一，对自噬的发生和发展有着重要的调节作用。MAP1-LC3在自噬体的形成及膜来源中发挥作用[11,12]。有研究[13,14]通过对分离胰腺细胞、动物模型和人体组织的研究，发现AP时自噬量受损，胰腺腺泡内大量异常自噬空泡堆积；自噬的异常增多是导致酶原的激活的诱因，认为自噬导致胰腺腺泡细胞空泡的形成以及酶原的激活，最终诱发了AP的形成。MAP1-LC3是自噬调控的重要分子机制之一，MAP1-LC3的表达与自噬相互促进，血清MAP1-LC3水平增高可以间接反映AP患者自噬的过度激活。AP的发病与过度自噬密切相关，而MAP1-LC3是自噬的重要调控蛋白。本研究发现，SAP组血清Ams水平高于MAP组，MAP组、SAP组发病早期血清MAP1-LC3水平明显升高，且SAP组较MAP组血清MAP1-LC3水平增高；AP患者的血清MAP1-LC3水平和血清Ams腹部CT评分呈正相关，提示AP患者发病早期血清MAP1-LC3水平与AP的病情严重程度呈正相关，血清MAP1-LC3可能是早期预测AP严重程度的有效标记物。因此可以通过减少MAP1-LC3表达而抑制胰腺腺泡细胞自噬的发生，从而减少胰蛋白酶原的激活以及AP时胰腺组织水肿、出血及坏死的发生[15]，MAP1-LC3可能作为药物治疗AP的特异性靶点之一。

综上所述，AP患者发病早期血清MAP1-LC3水平明显升高，并与AP的病情严重程度呈正相关，MAP1-LC3可能是早期预测AP严重程度的有效血清标记物。

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