狼疮性肾炎患者血清白介素—6、白介素—10水平及临床意义

黄欢

[摘要] 目的 探讨狼疮性肾炎患者血清白介素-6、白介素-10水平及临床意义。 方法 选择2014年1月～2016年6月在我院诊断为狼疮性肾炎患者40例为实验组，其中20例患者处于活动期，缓解期患者20例，另选择同期健康体检志愿者20例为对照组。检测三组血清IL-6及IL-10水平。 结果 实验组活动期IL-6及IL-10水平显著高于缓解期及对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。缓解期IL-6及IL-10水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。实验组活动期Trge水平显著低于缓解期以及对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；实验组活动期CD19+CD69+显著高于缓解期以及对照组，缓解期显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 狼疮性肾炎活动期患者血清IL-6、IL-10以及B淋巴细胞水平显著升高，Treg水平下降，其可以作为临床判断狼疮性肾炎活动程度的相关指标。

[关键词] 白介素-6；白介素-10；狼疮性肾炎

[中图分类号] R593.242 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）13-248-04

[Abstract] Objective To explore levels and clinical significance of serum interleukin-6 and interleukin-10 of patients with lupus nephritis. Methods 40 patients who were diagnosed as lupus nephritis in our hospital from January 2014 to June 2016 were selected as the experimental group.Among whom，20 patients were in active stage and 20 patients were in remission stage.20 healthy volunteers during the same period were selected as the control group.Serum interleukin-6 and interleukin-10 levels of three groups were detected. Results Serum interleukin-6 and interleukin-10 levels in active stage of the experimental group were higher than those in remission stage and those of the control group.The difference was statistically significant（P<0.05）.Serum interleukin-6 and interleukin-10 levels in remission stage were significantly higher than those of the control group.The difference was statistically significant（P<0.05）.Trge level in active stage of the experimental group was significantly lower than that of the remission stage and the control group.The difference was statistically significant（P<0.05）.CD19+CD69+ in active stage of the experimental group was significantly higher than that of the remission stage and that of the control group.And the remission was significantly higher than the control group.The difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion Levels of serum IL-6，IL-10 and B lymphocyte of patients with lupus nephritis are significantly increased while Treg was decreased.They can be regarded as related index to judge the activity of lupus nephritis in clinic.

[Key words] Interleukin-6；Interleukin-10；Lupus nephritis

系统性红斑狼疮（SLE）是一种多发于青年女性的累及多臟器的自身免疫性炎症性结缔组织病，早期、轻型和不典型的病例日渐增多。本病病因至今尚未肯定，大量研究显示遗传、内分泌、感染、免疫异常和一些环境因素与本病的发病有关。狼疮性肾炎的发病机制还不十分清楚，涉及多种因素，目前学界认为狼疮性肾炎由免疫复合物介导，B细胞功能亢进，T细胞功能异常，自身免疫耐受丧失。细胞因子在狼疮性肾炎的发生及发展过程中也发挥了重要的作用[1-2]。本研究分析IL-6及IL-10对狼疮性肾炎的影响。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年1月～2016年6月在我院诊断为狼疮性肾炎患者40例为实验组。纳入标准：狼疮肾炎诊断明确，血肌酐低于176.8μmol/L。排除标准：合并其他自身免疫性疾病者，合并严重感染者，合并其他系统实质性病变的患者，肌酐>176.8μmol/L。其中20例患者处于活动期，男4例，女16例，年龄16～60岁；病理分型：Ⅱ型1例，Ⅲ型4例，Ⅳ型13例，Ⅴ型2例。缓解期患者20例，男5例，女15例，年龄15～58岁；病理分型：Ⅱ型2例，Ⅲ型3例，Ⅳ型13例，Ⅴ型2例。另选择同期健康体检志愿者20例为对照组，其中男6例，女14例，年龄18～60岁。排除合并呼吸、神经、循环、血液、内分泌系统疾病的患者。缓解期与活动期患者病理分型比较差异无统计学意义，三组性别比、平均年龄比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经过医院医学伦理会同意，所有纳入研究对象对本次研究知情同意，并签署知情同意书。

1.2 检测方法

采集晨起空腹静脉血3mL，离心后-20℃保存待测。采用酶联免疫分析方法检测IL-6及IL-10水平。比较三组血清IL-6及IL-10水平。检测外周血中调节性T细胞Treg以及B淋巴细胞活化指标CD19+CD69+水平。Treg细胞检测：晨起采集空腹静脉血2mL，肝素抗凝，PBS1：1稀释，加入淋巴分离管，2500转/min离心20min。收集细胞，加PBS液2mL震荡，1200转/min离心min，弃上清，加PBS 2mL震荡，1200转/min离心5min，弃上清。蒸馏水与Buffer液按照9：1稀释，加入弃上清的标本中，分为2管，其中一管加FITC标记CD4抗体，为阴性管，另一管加CD4抗体、CD25抗体、CD127抗体为阳性管，避光静置15min，每管加400μL Buffer液，用流式细胞仪检测。B淋巴细胞活化指标CD19+CD69+水平检测：标本分离同Treg细胞；阴性对照管加10μL FITC标记CD19，阳性组加10μL的FITC标记的CD19抗体，10μL的PE标记的CD69抗体，5μL的AnnexinV，避光孵育15min，加400μL Buffer液，用流式细胞仪检测。

1.3 统计学处理

采用SPSS12.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以（）表示，采用t检验及F检验，计数资料以百分比表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清IL-6及IL-10水平

实验组活动期IL-6及IL-10水平显著高于缓解期及对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。缓解期IL-6及IL-10水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 各组外周血Trge以及CD19+CD69+水平

实验组活动期Trge水平显著低于缓解期以及对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；实验组活动期CD19+CD69+显著高于缓解期以及对照组，缓解期显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

系统性红斑狼疮的发生与遗传、环境因素以及雌激素水平有关。外来的抗原引起人体B细胞活化，在易感者因免疫耐受减弱，B细胞通过较差反应与模拟外来抗原的自身抗原结合，并将抗原呈递给T细胞，使之活化，在细胞活化刺激下，B细胞得以产生大量不同类型的自身抗体，造成大量组织损伤[3-4]。其发病与致病性自身抗体、致病性免疫复合物以及T细胞核NK细胞功能失调等有关。致病性自身抗体IgG型，与自身抗原有很高的亲和力。抗血小板抗体可导致血小板减少，抗红细胞抗体可导致红细胞破坏，溶血性贫血，抗SSA抗体可导致新生儿心脏传导阻滞，抗磷脂抗体可导致抗磷脂抗体综合征，抗核糖抗体可导致神经精神狼疮。受损的器官出现苏木子小体，洋葱皮样改变。狼疮性肾炎在系统性红斑狼疮中的发生率较高，大约有80%的系统性红斑狼疮患者肾脏有受累。狼疮性肾炎在系统性红斑狼疮中属于重症，死亡率居于系统性红斑狼疮的第一位或者第二位。并且狼疮性肾炎治疗困难，单纯激素治疗难以控制病情。狼疮性肾炎影响肾小球，血清学指标异常。调节性T细胞通过抑制T细胞免疫应答、抑制B细胞应答从而抑制系统性红斑狼疮的发生。Treg细胞再生能够重建自身免疫耐受，预防自身免疫性疾病的发生。在本次研究中，狼疮肾炎活动期患者Treg水平显著低于缓解期以及对照组。在本次研究中，狼疮性肾炎活动期患者B细胞异常增殖，缓解期也显著高于对照组，说明B细胞参与了狼疮性肾炎的发生及发展过程。系统性红斑狼疮的发病机制复杂，辅助性T细胞激活B细胞，B细胞产生致病作用抗DNA抗体，抗DNA抗体以及免疫复合物损伤肾小球，体内呈异常核小体。

IL-6存在与人类第7号染色提上，多种细胞可合成，包活化的T淋巴细胞以及B淋巴细胞。IL-6的靶细胞很多，包括静止的T淋巴细胞、肝细胞、巨噬细胞、活化的B淋巴细胞等，生物效应也复杂[5]。IL-6本身并不能刺激相應的细胞分泌细胞因子，生理浓度下对免疫细胞自分泌影响也较弱。IL-6刺激肝细胞可加速其合成急性期蛋白，作用于T淋巴细胞，刺激其表面IL-2受体表达，加强IL-1对Th细胞有丝分裂的作用。IL-6还能够促进B淋巴细胞的增殖及分化，产生抗体[6-7]。IL-6能够促进骨髓造血，合成糖皮质激素等。IL-6受体分布在白细胞亚群中以及肝细胞上，其与受体结合后可活化相应的细胞，产生大量自身抗体。研究显示SLE患者血清中IL-6水平升高，并且与狼疮活动程度有正相关的关系。在本次研究中，狼疮性肾炎活动期患者IL-6水平显著高于缓解期以及对照组，缓解期患者也显著高于对照组，提示IL-6参与了狼疮性肾炎的发生，同时与狼疮性肾炎的活动性有关，可作为活动性指标之一。

IL-10最早由Mossman及其同事发现，最早由Th2细胞克隆在体外培养的情况下产生的一种细胞因子，后来被命名为IL-10。随后研究发现IL-10基因与EBV基因组有一段开放读码区高度同源，而EBV基因组该区编码的蛋白为vIL-10。IL-10 是一种酸性蛋白，通常以二聚体的形式存在。其主要由T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核/巨噬细胞、角质细胞等产生[8]。IL-10与其他细胞因子无明显的顺序同源性，人IL-10对人细胞以及小鼠细胞均有作用。在单核细胞存在时，IL-10能够直接抑制T淋巴细胞的增殖以及细胞素的产生。IL-10抑制细胞免疫应答，抑制Th1产生IL-2、IFN-γ[9-10]。Th2细胞产生IL-10能增强体液免疫应答。Th1细胞产生的IFN-γ能下调Th2克隆抑制IL-10产生，而Th2细胞产生的IL-10能够下调Th1克隆抑制IFN-γ等。IL-10能够抑制CTL产生IFN-γ，下调MHC Ⅱ类抗原。单核细胞是产生IL-10的主要细胞。IL-10抑制NO的产生。IL-10能够抑制单核细胞表面MHCⅡ类分子的表达[11-13]。IL-10能够抑制NK细胞的作用，还能够抑制Th1细胞产生IL-12，后者能过激活NK细胞活性。IL-10能够促使B细胞增殖及分化，而成熟的B细胞才能分泌IL-10[14-15]。IL-10参与了系统性红斑狼疮的发生过程，在系统性红斑狼疮患者体内IL-10可异常升高，IL-10基因与SLE的易感性有关，与SLE细胞凋亡异常关系密切。在SLE不同时期，IL-10对炎症细胞具有不同的效应。在本次研究中，活动期狼疮性肾炎患者血清IL-10水平显著高于缓解期及对照组，而缓解期也显著高于对照组，这提示IL-10参与了狼疮性肾炎的发生及发展，其水平可以反映狼疮肾炎的活动程度，可以作为临床上判断狼疮性肾炎的活动性指标之一。

综上所述，狼疮性肾炎患者血清IL-6及IL-10、B淋巴细胞显著升高，Trge水平显著下降，尤其活动期患者，更为明显。临床上可以将IL-6及IL-10、B淋巴细胞以及Trge水平作为判断狼疮性肾炎活动程度的指标。

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（收稿日期：2017-03-23）