白花蛇舌草乙醇提取物抗炎作用研究

高红瑾 陆姗姗

白花蛇舌草乙醇提取物抗炎作用研究

高红瑾 陆姗姗

目的 观察白花蛇舌草乙醇提取物(EEHD)的抗炎作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型［选昆明种小鼠50只, 随机分成五组, 每组10只, 分别按125、250、500 mg/(kg·d)剂量给试验组灌胃白花蛇舌草乙醇提取物, 连续8 d；对照组灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d), 连续8 d；空白组灌胃生理盐水0.5 ml/(kg·d), 连续8 d］和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)致小鼠腹腔白细胞增多模型［选小鼠50只,随机分成五组, 每组10只, 分别按125、250、500 mg/(kg·d)剂量给试验组灌胃白花蛇舌草乙醇提取物,连续8 d；对照组灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d), 连续8 d；空白组灌胃生理盐水0.5 ml/(kg·d), 连续8 d］研究白花蛇舌草抗炎作用。结果 连续灌胃给药8 d, 与空白组比较, 对照组及250、500 mg/(kg·d)试验组对二甲苯所致小鼠耳肿胀有抑制作用(P＜0.05)。与空白组比较, 对照组及500 mg/(kg·d)试验组能显著抑制CMC-Na 引起的小鼠腹腔白细胞游走(P＜0.05)。结论 白花蛇舌草具有显著的抗炎作用。

白花蛇舌草；提取物；抗炎

白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd., HD)为茜草科植物,有清热解毒、利尿消肿、活血止痛等功效。白花蛇舌草的化学成分很丰富, 有黄酮类化合物、蒽醌类、萜类、甾醇类等, 其药理作用主要有抗肿瘤、调节免疫、抗菌抗炎、抗氧化等作用, 内服多用于治疗恶性肿瘤、阑尾炎、肝炎、泌尿系统感染、支气管炎、扁桃体炎、喉炎等疾病, 外用可治疗毒蛇咬伤、痈肿疔疮等。本文研究了白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd., EEHD)在抗炎方面的药理作用, 为其进一步开发利用提供实验依据。

1 材料与方法

1. 1 实验动物 昆明种小鼠, 体重18～24 g, 雌雄各半, 购于吴氏实验动物中心, 合格证号SCX(闽)20042002, 试验动物于室温条件下自由饮水采食, 所喂饲料为全价条状饲料, 购于吴氏实验动物中心。

1. 2 药物与试剂 白花蛇舌草乙醇提取物, 淡黄色颗粒粉末状, 由福建医科大学药学院提供, 每1克提取物含生药20 g。二甲苯(无锡市展望化工试剂有限公司, 批号150420), 阿司匹林片(合肥久联制药公司, 批号20140109)。

1. 3 方法

1. 3. 1 对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响［1］选昆明种小鼠50只, 体重18～22 g, 雌雄各半。随机分成五组, 每组10只,分别按125、250、500 mg/(kg·d)剂量给试验组灌胃白花蛇舌草乙醇提取物, 连续8 d；对照组灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d),连续8 d；空白组灌胃生理盐水0.5 ml/(kg·d), 连续8 d。分别于末次给药后2 h, 在小鼠左耳两面涂以100%二甲苯0.03 ml, 右耳不涂, 致炎后45 min处死小鼠, 沿耳廓基线剪下两耳, 用8 mm直径打孔器制备小鼠耳片, 用电子秤称重,以两耳重量之差作为肿胀度。

1. 3. 2 对小鼠腹腔白细胞游走的影响［2］选小鼠50只,雌雄各半, 随机分成五组, 每组10只, 分别按125、250、500 mg/(kg·d)剂量给试验组灌胃白花蛇舌草乙醇提取物, 连续8 d；对照组灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d), 连续8 d；空白组灌胃生理盐水0.5 ml/(kg·d), 连续8 d。末次给药后1 h, 每只小鼠腹腔注射1% CMC-Na 1 ml, 3 h后将小鼠处死, 小鼠腹腔注射生理盐水1 ml, 轻揉腹部, 抽取腹腔液滴于血细胞计数板上, 镜下进行白细胞计数。

1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示, 各组间比较采用单因素方差分析, 用Levene法先进行方差齐性检验, 方差齐用Tukey HSD检验, 方差不齐用Games-Howell法检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 与空白组比较,对照组及250、500 mg/(kg·d)试验组对二甲苯所致小鼠耳肿胀有抑制作用(P＜0.05)。见表1。

表1 对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(, mg)

表1 对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(, mg)

注：与空白组比较,aP＜0.05

组别剂量［mg/(kg·d)］只数耳重差空白组 10 17.11±2.63对照组10010 7.70±5.42a试验组12510 14.51±4.95 25010 9.94±4.27a50010 8.55±3.16a

2. 2 对小鼠腹腔白细胞游走的影响 与空白组比较, 对照组及500 mg/(kg·d)试验组能显著抑制CMC-Na 引起的小鼠腹腔白细胞游走(P＜0.05)。见表2。

表2 对小鼠腹腔白细胞游走的影响(, ×106/L)

表2 对小鼠腹腔白细胞游走的影响(, ×106/L)

注：与空白组比较,aP＜0.05

组别剂量［mg/(kg·d)］只数白细胞数空白组 1015.51±2.50对照组10010 10.53±2.10a试验组1251013.18±1.90 2501012.32±3.90 50010 10.46±0.90a

3 讨论

炎症是由有害的刺激产生的一个重要的防御机制, 但也会带来很大的损害, 如造成关节炎、哮喘和免疫失调。当前,临床常用抗炎药仍存在许多问题, 如胃部不适、心脏风险,因此寻找安全和有效的抗炎药物仍然是临床医师的目标。急性炎症时炎症因子能刺激机体产生细胞因子, 导致毛细血管渗出、组织水肿、低血压、发热等不良反应［3］。作者选择二甲苯致耳廓肿胀、CMC-Na 致腹腔炎症这两种常见的炎症模型, 发现白花蛇舌草乙醇提取物具有显著的抗炎作用。

白花蛇舌草是一种广泛使用的中药。目前, 已经从白花蛇舌草中分离鉴定蒽醌类、黄酮类、萜类等69种化合物［4］。它具有多种药用特性, 包括抗氧化、抗炎和抗癌作用［5］。然而, 由于传统的中药化学成分的复杂性, 使得它很难向世界传播［6-10］, 所以单一有效成分的抗炎机制值得进一步研究。同时, 这些有效成分经口服的吸收情况, 值得进一步利用生物药物分析的方法开展实验研究。

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Study on the anti-inflammatory effect of ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd.

GAO Hong-jin, LU Shan-shan. Department of Pharmacy, Fujian Provincial Hospital, Fuzhou 350001, China

Objective To observe the anti-inflammatory effect of ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd. (EEHD). Methods Xylene-induced mouse ear swelling model ［a total of 50 Kunming mice were randomly divided into five groups, with 10 mice in each group. The ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd. was administered to the experimental group respectively at the dose of 125, 250 and 500 mg/(kg·d) for 8 days. The control group

intragastric administration of aspirin 100 mg/(kg·d) for 8 days. The blank control group received intragastric administration of 0.5 ml/(kg·d) physiological saline for 8 days］ and sodium carboxymethyl cellulose (CMC-Na) on murine peritoneal leukocyte proliferation model ［ A total of 50 mice were randomly divided into five groups, with 10 mice in each group. The ethanol extract of Hedyotis diffusa was administered to the experimental group respectively at the dose of 125, 250 and 500 mg/(kg·d) for 8 days. The control group received intragastric administration of aspirin 100 mg/(kg·d) for 8 days. The blank control group received intragastric administration of 0.5 ml/(kg·d) physiological saline for 8 days.］ were used to study the anti-inflammatory effect of ethanol extract of Hedyotis diffusa. Results After 8 d of intragastric administration, the control group and 250, 500 mg/(kg·d) experimental group had inhibitory effect on Xylene-induced mouse ear swelling comparing with the blank control group (P＜0.05). The control group and 500 mg/(kg·d) experimental group can significantly inhibit CMC-Na-induced mouse intraperitoneal leukocyte migration, comparing with the blank control group (P＜0.05). Conclusion Hedyotis diffusa Willd. has significant anti-inflammatory effect.

Hedyotis diffusa Willd.; Extract; Anti-inflammatory

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.15.113

2017-06-14］

350001 福建省立医院药学部(高红瑾)；福建医科大学药学院(陆姗姗)