苏姜猪血清HSL、MDH活性变化规律的研究

陶 勇，任善茂，倪黎纲，张君胜，周春宝，赵旭庭，经荣斌

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300；2.扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州 225009)



苏姜猪血清HSL、MDH活性变化规律的研究

陶 勇1，任善茂1，倪黎纲1，张君胜1，周春宝1，赵旭庭1，经荣斌2

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300；2.扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州 225009)

【目的】探讨苏姜猪激素敏感酯酶(HSL)和苹果酸脱氢酶(MDH)的变化规律。【方法】本试验采用酶联免疫法测定了70头不同月龄、公母各半、健康无病的苏姜猪血清HSL和MDH活性。【结果】①苏姜猪血清HSL活力在不同月龄之间、同一月龄不同性别之间的差异均较大，2月龄达到高峰(9.05 U/mL)，继而开始下降，4月龄达到最低值(7.08 U/mL)，然后再次回升。②苏姜猪血清MDH活性在2月底达到最低值(518.17 mU/mL)，然后逐渐上升。6月龄MDH活力与其他月龄间差异均极显著(P<0.01)，5月龄与3月龄间差异极显著(P<0.01)。相同月龄不同性别之间血清MDH活性变化差异较大，但总体变化趋势一致。试验结果需要在今后的生产及试验过程中加以验证。【结论】血清HSL活性先上升，在2月龄时达到高峰，然后开始下降，4月龄达到最低值后再次回升。血清MDH活性总体呈现出逐渐升高的趋势。

苏姜猪；激素敏感酯酶；苹果酸脱氢酶；变化规律

【研究意义】激素敏感酯酶(Hormone-sensitive lipase，HSL)是细胞中脂肪分解的限速酶，在能量平衡调控过程中起着重要的作用，能够降解甘油三酯、胆固醇酯、其他脂质及水溶性底物，产生甘油和脂肪酸[1-2]。苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase，MDH)是生物糖代谢的关键酶之一，在细胞多种生理活动中起着非常重要的作用，能够催化苹果酸与草酰乙酸之间的可逆转换[3]。【前人研究进展】Kazala等对牛的研究结果表明，HSL水平与肌内脂肪含量和大理石纹存在相关，并建议将其作为早期选种的一个指标[4]。王倩等研究发现，在生长期随着体重的增加，野猪与杜洛克杂交F1代猪HSL活性均显著地高于莱芜黑猪的活性(P<0.05，90 kg除外)，且在35 kg时，野杜F1代猪和莱芜黑猪差异极显著(P<0.01)[5]。Stelmanska等研究结果证明，在猪脂肪组织中MDH从35 kg体重时开始下降，到屠宰时活性降到最低点[6]。杨海玲等研究结果表明，莱芜黑猪肌肉组织中的MDH与肌内脂肪呈极显著正相关(P<0.01)[7]。以上研究表明，HSL和MDH在动物体内脂质、能量代谢中发挥着关键作用，但关于这两种脂肪代谢酶在苏姜猪组织中的发育性变化的研究却鲜有报道。【本研究切入点】鉴于此，本试验研究了苏姜猪血清中HSL、MDH 2种酶活性随着年龄的变化规律。【拟解决的关键问题】为改善苏姜猪肌肉风味、提高营养品质、开展持续选育及生产管理提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验猪选择

试验用苏姜猪由江苏苏姜种猪有限公司提供，分别选择初生、1月龄、2月龄、3月龄、4月龄、5月龄、6月龄，发育良好、健康无病的苏姜猪各10头，公母各半。所有试验猪进行常规饲养管理，每天喂料2次，自由饮水。

1.2 测定项目与方法

在相应日龄上午，每头试验猪空腹采集5 mL血液，制备血清，-20 ℃保存备用。血清激素敏感酯酶、苹果酸脱氢酶活性由上海常斤生物科技有限公司采用酶联免疫法检测。

1.3 统计分析方法

所有数据采用SPSS13.0进行统计分析，多重比较采用Duncan氏法，分析结果以平均值±标准误表示。

2 结果与分析

2.1 苏姜猪血清HSL活性变化规律

不同月龄苏姜猪HSL活力不同(表1)，其中4月龄活力最低，2月龄活力最高。苏姜猪血清HSL活力2月龄出现高峰，然后开始下降，4月龄达到最低值后再次回升。统计分析表明，3月龄间与4、5月龄间HSL活力差异均极显著(P<0.01)，4月龄与初生、1月龄间差异极显著(P<0.01)，4月龄与2、6月龄间差异显著(P<0.05)，2月龄与5、6月龄间差异显著(P<0.05)，3月龄与6月龄间差异显著(P<0.05)，其余各月龄间差异均不显著(P>0.05)。

相同月龄苏姜猪公母间血清HSL活性变化差异较大，但在3月龄之后变化趋势基本一致，在4月龄达到最低值(表2)。苏姜猪公母猪血清HSL活性除了4月龄之间差异不显著外，其余各月龄间差异均达到了显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)水平。

表1 不同月龄苏姜猪HSL、MDH活力

表2 相同月龄不同性别苏姜猪血清HSL、MDH活力

2.2 苏姜猪MDH活性变化规律

不同月龄苏姜猪血清MDH活力不同，其中2月龄活力最低，6月龄活力最高(表1)。苏姜猪血清MDH活力在2月底达到最低值，然后缓慢上升。统计分析表明，6月龄MDH活力与其他月龄间差异均极显著(P<0.01)，5月龄与3月龄间差异极显著(P<0.01)，其余各月龄间差异均不显著(P>0.05)。

相同月龄苏姜猪公母间血清MDH活性变化差异较大，但在2月龄之后的总体变化趋势是一致的(表2)。苏姜猪血清MDH活性在初生、2月龄、4月龄、5月龄公母间差异均达到了极显著(P<0.01)水平，其余月龄间差异不显著(P>0.05)。

3 讨 论

3.1 苏姜猪HSL活性变化规律

脂肪是有机体的重要的能量贮备物质，机体许多生理功能的正常发挥离不开脂肪的协同作用，但是如果机体摄入过多的脂肪，就会导致与肥胖有关疾病的产生。激素敏感酯酶(Hormone-sensitive lipase，HSL)，又称作甘油三酯脂肪酶，是脂肪分解过程中的限速酶，能够水解甘油三酯成甘油和脂肪酸以满足机体的需要，其活性的高低对动物脂肪的沉积具有重要的影响[8]。苏姜猪虽然含有姜曲海猪、枫泾猪等地方猪血统，但它是一个经过长期继代选育而成的瘦肉型新猪种[9]，因而可以推测苏姜猪具有较强的脂肪分解能力。本试验中，苏姜猪在3月龄左右时血清HSL活性达到最高值，然后缓慢降低，在4月龄时达到最低值(7.08 U/mL)，这是否预示着苏姜猪在早期能够有效地水解甘油三酯，释放出脂肪酸满足机体新陈代谢的需要。另外，苏姜猪母猪血清HSL活性在1月龄时还有一个高峰值(9.68 U/mL)，这可能与样本量较少有关系，需要进一步进行试验验证。

3.2 苏姜猪MDH活力变化规律

苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase，MDH)是生物体三羧酶循环中的一个重要的氧化还原酶，广泛存在于动植物、细菌等生物体中，其活性提高表示细胞内有氧氧化能力的提高。马兰等[10]研究表明，藏羚羊骨骼肌中MDH 活性显著高于藏绵羊和绵羊，说明藏羚羊尽管生活在高寒缺氧地区，但是其骨骼肌细胞仍然能得到丰富的氧供应，有氧代谢比例高，并非处于缺氧状态。本试验中，苏姜猪血清MDH活性在整个测试阶段呈现逐渐上升的趋势，说明苏姜猪机体内有氧代谢的能力随着日龄增加而逐渐增强，能够满足日益增加的生长需要。而苏姜母猪在初生至2月龄间，血清MDH活性有个下降过程(最低值483.10 mU/mL)，这是否预示着苏姜猪母仔猪在早期生长速度比公仔猪慢，这需要在生产中进行验证。

4 结 论

综上所述，苏姜猪血清HSL、MDH活性随着月龄的增长而表现出一定的规律。血清HSL活性先上升，在2月龄时达到高峰，然后开始下降，4月龄达到最低值后再次回升。血清MDH活性总体呈现出逐渐升高的趋势。这些规律可能与苏姜猪含有姜曲海猪、枫泾猪等地方猪血统相关，需要在今后的生产及试验过程中加以验证。

[1]王咏波，陈璐璐. 激素敏感性脂肪酶研究新进展[J]. 中华糖尿病杂志，2005，13(2)：154-156.

[2]强巴央宗，商 鹏，杨 涛，等. 藏猪激素敏感脂肪酶(HSL)基因遗传多样性分析[J]. 西南农业学报，2012，25(5)：1904-1906.

[3]汪新颖，王 波，侯松涛，等. 苹果酸脱氢酶的结构与功能[J]. 生物学杂志，2009，26(4)：69-72.

[4]Kazala E C, Jennifer L P, Fred J L, et al. Hormone-sensitive lipase activity in relation to fat content of muscle in Wagyu hybrid cattle[J]. Livestock Production Sci, 2003, 79: 87-96.

[5]王 倩，尹逊河，王元虎，等. 长白山野猪与杜洛克猪杂交1代猪肌内脂肪代谢酶HSL和MDH活性的发育性变化规律及其对肌内脂肪沉积影响的影响[J]. 中国畜牧兽医，2013，40(2)：121-124.

[6]Stelmanska E, Korczynska J, Swierczynski J. Tissue-specific effect of reseeding after short and long term caloric restriction on malice enzyme gene expression in rat tissues[J]. Department of Biochemistry, 2004, 51(3): 805-814.

[7]杨海玲，曾勇庆，魏述东，等. 莱芜猪脂肪代谢酶活性的发育性变化及其对肌内脂肪沉积的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2005, 36(11): 1150-1154.

[8]罗建学，兰玉倩，杨桂秀，等. 激素敏感脂肪酶基因研究进展[J]. 生物技术世界，2015(3)：189-190.

[9]倪黎纲，赵旭庭，朱淑斌，等. 苏姜猪杂交配合力测定与分析[J]. 西南农业学报，2015，28(5)：2255-2258.

[10]马 兰，杨应忠，格日力. 藏羚羊骨骼肌肌红蛋白含量及乳酸脱酶、苹果酸脱氢酶活力的研究[J]. 中国应用生理学杂志，2012，28(2)：118-121.

(责任编辑 陈 虹)

Study on Change Rules of HSL and MDH Activity in Serum of Sujiang Pig

TAO Yong1, REN Shan-mao1, NI Li-gang1, ZHANG Jun-sheng1, ZHOU Chun-bao1, ZHAO Xu-ting1, JING Rong-bin2

(1.Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Jiangsu Taizhou 225300, China;2.College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Jiangsu Yangzhou 225009, China)

【Objective】The present study was conducted to explore the change rules of HSL and MDH. 【Method】70 heads of different month and health Sujiang pigs were selected，and the activities of HSL and MDH in serum were analyzed with ELISA. 【Result】(i) The difference of HSL activity in serum of Sujiang pigs between different months, different sexes in same age, were bigger, which reached the peak (9.05 U/mL) at the second month and then began to decline, reached the lowest value (7.08 U/mL) at the fourth month and then went up again. (ii) The activity of MDH in serum of Sujiang pig declined the lowest value (518.17 mU/mL) at the second month, and then gradually increased. The differences of MDH activities between the sixth month and other months were very significant (P<0.01), and that was also very significant between the fifth month and the third month (P<0.01). The difference of MDH activity was larger between different sexes at the same month, but the overall change trend was consistent.【Conclusion】Therefore, the activity of serum HSL firstly increased, reached the peak at the 2ndmonth, then began to decline, and finally recovered again after reaching the lowest value at the 4thmonth. The activity of serum MDH showed a gradually upward trend.

Sujiang pig; Hormone-sensitive lipase; Malate dehydrogenase; Change rule

1001-4829(2017)7-1672-03

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.036

2016-07-10

江苏省农业三新工程项目(SXGC[2015]303)；江苏农牧科技职业学院重点资助课题(NSFZD1401)

陶 勇(1975-)，男，博士，副教授，主要研究方向为地方猪品种遗传资源的保护、开发与利用，E-mail：tyrsm1975tt@126.com。

S828

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