胸腔积液中葡萄糖转运蛋白-1和生存蛋白表达在鉴别诊断肺腺癌、恶性间皮瘤和反应性间皮细胞增生中的意义

马秦榕 郑锦花 魏亚敏 李美琼 田 佳 杨飞城

(桂林医学院附属医院病理科， 广西 桂林 541001)



胸腔积液中葡萄糖转运蛋白-1和生存蛋白表达在鉴别诊断肺腺癌、恶性间皮瘤和反应性间皮细胞增生中的意义

马秦榕 郑锦花 魏亚敏 李美琼 田 佳 杨飞城

(桂林医学院附属医院病理科， 广西 桂林 541001)

目的 探讨葡萄糖转运蛋白(GLUT)-1和生存蛋白(Survivin)表达在诊断肺腺癌、恶性间皮瘤及反应性间皮细胞增生患者胸腔积液中的临床意义。方法 用免疫组化法检测肺腺癌、恶性间皮瘤、反应性间皮细胞增生各30例胸水沉渣组织中GLUT-1 和Survivin的表达。结果 肺腺癌、恶性间皮瘤、反应性间皮细胞增生的样本中GLUT-1阳性率分别为86.7%、83.3%、6.7%；而Survivin阳性率分别为80.0%、76.7%、30.0%。GLUT-1和Surivin在肺腺癌和恶性间皮瘤中染色弥漫性和染色强度方面无统计学差异(P>0.05)，但其与反应性间皮细胞增生的样本差异显著(P<0.01)。结论 GLUT-I和Surivin可以将反应性间皮细胞增生从肺腺癌和恶性间皮瘤中鉴别出来，但是无法鉴别恶性间皮瘤和肺腺癌。

腺癌；间皮瘤；间皮细胞；人葡萄糖转运蛋白1

恶性间皮瘤是一种来源于浆膜间皮细胞(多数为胸膜)的原发性恶性肿瘤。由于恶性间皮瘤、肺腺癌、良性间皮细胞增生的细胞形态学相似，没有一种特异的方法能将恶性间皮瘤从肺腺癌和良性间皮细胞增生中鉴别〔1〕,尤其是胸腔积液样本中将会更加困难。本文拟评估葡萄糖转运蛋白(GLUT)-I和生存蛋白(Survivin)作为诊断标志物在鉴别恶性间皮瘤、肺腺癌和反应性间皮细胞增生的价值。

1 材料与方法

1.1 一般资料 选取2008年1月至2016年12月桂林医学院附属医院90例患者的样本。肺腺癌30例，恶性间皮瘤(上皮型)30例和反应性间皮细胞增生30例，其中肺腺癌患者女11例，男19例，中位年龄66.5岁；恶性间皮瘤患者女13例，男17例，中位年龄65.2岁；反应性间皮细胞增生患者女8例，男22例，中位年龄40.5岁。所有病例在抽取胸腔积液前未经过放、化疗；所有的肺腺癌和恶性间皮瘤患者均由活检确诊。

1.2 方法 取胸水100 ml，3 000 r/min离心10 min，弃上清液，加入95%酒精静置1～2 h，取沉淀物加入4%中性甲醛液固定，常规脱水、石蜡包埋、4 μm切片，由自动染色装置(Autostainer Link 48,Denmark)进行GLUT-1和Survivin染色处理。

1.3 结果判定标准 GLUT-1和Survivin染色在光学显微镜下评分。GLUT-1的阳性标准是细胞膜呈棕黄色；Survivin阳性标准是胞质或胞核呈棕黄色。所有病例均按照GLUT-1和Survivin 的染色阳性百分率(弥漫程度)和染色强度进行评分。评分标准：胞膜、胞质或胞核阳性细胞数目>50%为；10%～50%为；<10%为+；背景染色计为0。此外，染色强度也进行评分(+～)：弱染色(+)，中度染色()，强染色()。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0进行方差分析、Tukey检验和Spearman相关性分析。

2 结 果

2.1 GLUT-1、Survivin的阳性率 肺腺癌GLUT-1阳性率为86.7%(26/30，+6例，4例,16例)；恶性间皮瘤为83.3%(25/30，+6例，9例，10例)；反应性间皮细胞增生为6.7%(2/30，仅+2例)。GLUT-1的敏感性和特异性：肺腺癌分别为86.7%和80.0%；恶性间皮瘤分别为83.3%和83.3%。Survivin阳性率：肺腺癌80.0%(24/30，+2例，7例，15例)；恶性间皮瘤76.7%(23/30，+1例，2例，20例)；反应性间皮细胞增生30.0%(9/30，+4例，3例，2例)。肺腺癌Survivin的灵敏性和特异性分别为80.0%和54.5%；恶性间皮瘤分别为76.7%和58.3%。肺腺癌和恶性间皮瘤GLUT-1和Survivin染色的弥漫性无统计学差异(P=0.360,0.679)，但反应性间皮细胞增生与其相比有统计学差异(均P=0.000)。

2.2 GLUT-1和Survivin在恶性间皮瘤、肺腺癌及反应性间皮细胞增生中染色强度 恶性间皮瘤中GLUT-1染色强度：7例(23.3%)，18例(60.0%)，未染色5例(16.7%)；Survivin 染色强度：+9例(30.0%)，10例(33.3%)，4例(13.3%)，未染色7例(23.3%)。肺腺癌中GLUT-1染色强度：+2例(6.6%)，7例(23.3%)，17例(56.6%)，未染色4例(13.3%)；Survivin染色强度：+6例(20.0%)，14例(46.6%)，4例(13.3%)，未染色6例(20.0%)。反应性间皮细胞增生中，GLUT-1染色强度仅+2例(6.6%)；Survivin染色强度，+4例(13.3%)，4例(13.3%)，1例(3.3%)。见图1，图2。

图1 GLUT-1免疫组化表达(×400)

2.2 GLUT-1和Survivin在恶性间皮瘤、肺腺癌和反应性间皮细胞增生中阳性弥漫程度和染色强度的相关性 GLUT-1和Survivin在染色弥漫性和染色强度均有明显的相关性(r=0.929,0.922；均P<0.01)。

图2 Survivin免疫组化表达(×400)

3 讨 论

肺腺癌患者的早期临床症状是胸腔积液，这些患者往往已经失去了手术和活检的机会。恶性间皮瘤是一种罕见的肿瘤，它来源于浆膜表面，尤其是胸膜、腹膜和心包膜，并且与石棉接触相关〔2〕,恶性间皮瘤具有多种细胞形态学特点。反应性间皮细胞增生可由感染、肺栓塞、气胸、胶原血管病、外伤、手术、非特异性炎症反应或靠近胸膜的肺部肿瘤引起。因其具有细胞丰富，细胞形态异型，可见核分裂，细胞坏死等类似肿瘤性病变特点〔3〕，所以很难通过小样本活检特别是胸腔积液鉴别良性间皮细胞增生和恶性间皮瘤。

肿瘤细胞的增殖与葡萄糖的新陈代谢和能量利用率有关〔4〕。葡萄糖的摄取由GLUT调节。GLUT-1是GLUT家族中的一个成员，主要功能是转运葡萄糖进入上皮细胞。GLUT-1在红细胞膜、血脑屏障以及周围神经的神经鞘膜中明显的高表达，而在大多数上皮组织中则不表达或者表达极低〔5〕。

GLUT-1在许多不同来源的肿瘤中高度表达，例如乳腺、膀胱、肾脏和头颈部肿瘤。本研究结果证实GLUT-1可能成为鉴别反应性间皮细胞增生和恶性间皮瘤的有效生物标志物。

Survivin作为细胞凋亡抑制基因家族中的一个成员，在抑制细胞凋亡和调节细胞增殖方面发挥重要作用。Survivin位于肿瘤细胞的细胞核和细胞质，这可能与它调节有丝分裂前期〔6～8〕和抗凋亡〔9〕的功能有关。Survivin参与抑制胚胎性组织和肿瘤细胞的凋亡，但是它在正常已分化组织中并不表达〔10〕。这种表达的倾向性和双向调节功能使其有可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点。而且，Survivin的表达与几种人类恶性肿瘤的疾病进展和预后差相关，因此其可能成为判断疾病预后的因子〔11〕。

有学者研究101例恶性乳头状间皮瘤患者，分析Survivin 的核表达与细胞增殖、治疗后肿瘤细胞凋亡以及患者生存期的相关性〔12〕，结果显示Survivin 的表达与总生存期无关，但是Survivin 的高表达与肿瘤治疗相关，表明Survivin 有可能成为恶性间皮瘤的预后判断因子。Sun等〔13〕研究了经外科手术切除的373例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的Survivin 表达情况，评

估了Survivin的表达与NSCLC的临床病理特征、分子特征及其预后的相关性。结果显示Survivin的表达与肺腺癌的血道侵犯、淋巴结转移及肿瘤复发有关。但是本研究结果提示，Survivin和GLUT-1无法鉴别恶性间皮瘤和肺腺癌。

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11 AltieriDC.Survivin and IAP proteins in cell-death mechanisms〔J〕.Biochem J,2011;430(2):199-205.

12 Hmeljak J,Erculj N,Dolžan V,etal.Is Survivin expression prognostic or predictive in malignant pleural mesothelioma〔J〕.Virchows Arch,2013;463(3):315-21.

13 Sun PL,Jin Y,Kim K,etal.Survivin expression is an independent poor prognostic marker in lung adenocarcinoma but not in squamous cell carcinoma〔J〕.Virchows Arch,2013;463(3):427-36.

〔2017-05-22修回〕

(编辑 袁左鸣/滕欣航)

广西医疗卫生适宜技术开发与推广应用项目(No.S201601)；桂林市科学研究与技术开发计划项目(No.2016012706-8)；广西区卫计委自筹经费科研课题(No.Z2015414)

郑锦花(1970-)，女，博士，主任医师，主要从事胸部肿瘤鉴别诊断及综合治疗研究。

马秦榕(1991-)，女，在读硕士,主要从事肺腺癌鉴别诊断及预后评估方面研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)14-3415-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.14.015