DEC1、LXRβ在动脉硬化性脑梗死患者血清中的水平及其临床意义

施静静 陈涛 刘毅 金泉伟 王婧蕾 徐杰



DEC1、LXRβ在动脉硬化性脑梗死患者血清中的水平及其临床意义

施静静 陈涛 刘毅 金泉伟 王婧蕾 徐杰

目的 探讨分化型胚胎软骨发育基因1(differentiation type embryonic cartilage development genes 1, DEC1)、肝X受体β(Liver X receptor β, LXRβ)在动脉硬化性脑梗死患者血清中的水平及其临床意义。方法 选择2013年3月～2015年12月本院的60例急性脑梗死患者为研究对象，选择2013年3月～2015年12月健康人群60例为对照组，检测入组对象血清DEC1、LXRβ水平。结果 脑梗死组血清DEC1水平高于对照组(P<0.01)，脑梗死组血清LXRβ水平低于对照组(P<0.01)。随着脑梗死患者病情的加重，血清DEC1水平呈不断升高趋势(P<0.05)；随着患者功能障碍程度的加重，血清DEC1水平不断升高(P<0.05)。随着急性脑梗死患者脑梗死病情的加重，血清LXRβ水平不断降低(P<0.05)；随着急性脑梗死患者功能障碍程度的加重，血清LXRβ水平不断降低(P<0.05)。急性脑梗死患者血清DEC1水平与LXRβ水平呈负相关(r=-0.331，P=0.009)。结论 DEC1、LXRβ可能参与了急性脑梗死的发病及病情进展，且DEC1可能通过负向调控LXRβ进而在急性脑梗死发病、病情加重、功能障碍程度加重过程中发挥作用。

脑梗死 分化型胚胎软骨发育基因1 肝X受体β

脑梗死为常见的脑缺血性病变，其发病机理主要是脑部缺血缺氧引起的脑组织坏死或软化[1]。脑梗死患者可出现言语障碍、智力障碍、功能障碍等常见临床症状，患者往往伴发糖尿病、高血压病等基础性疾病[2]。在中国脑梗死作为最常见的心脑血管疾病之一，其发病率逐年攀升，尤其高发于45～70岁人群[3-4]。分化型胚胎软骨发育基因1(differentiation type embryonic cartilage development genes 1,DEC1)在人体很多重要组织中广泛表达，在神经元发育生长、脂质代谢、细胞增殖分化及免疫反应过程中亦发挥一定作用[5]。肝X受体β(Liver X receptor β,LXRβ)的一个亚型在脂质代谢紊乱、神经炎症中起重要作用。有研究显示，DEC1对LXRβ具有一定的调控作用[6]。有关DEC1、LXRβ与急性脑梗死关系的研究较少，本研究旨在探讨DEC1、LXRβ与动脉硬化性脑梗死发病及病情进展的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年3月～2015年12月被本院神经内科收治的60例急性脑梗死患者为研究对象(脑梗死组)，符合急性脑梗死的诊断标准[7]；脑梗死病例的选择排除有代谢性疾病、严重肝肾疾病、帕金森病、免疫性疾病、消耗性疾病的患者；患者年龄51～80岁，平均年龄(62.12±5.62)岁，男36例，女24例，病程2～7年，平均病程(3.15±0.87)年，体质量指数(23.16±2.35)kg/m2。选择2013年3月～2015年12月在本院门诊体检健康人群60例为对照组，年龄51～80岁，平均年龄(63.24±5.57)岁，男33例，女27例，体质量指数(24.32±3.24)kg/m2。脑梗死组患者按照美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分[7]，NIHSS评分>5分，20例，NIHSS评分≤5分，40例。Barthel指数(BI)评分总分为100分，0～45分为重度功能障碍，46～70分为中度功能障碍，71～95分为轻度功能障碍，96～100分为完全可自理。将60例脑梗死患者按BI评分[7]分为三类：轻度功能障碍15例，中度功能障碍24例，重度功能障碍21例。脑梗死组和对照组年龄、性别、体质量指数等资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经入组对象签署知情同意书，并获本院伦理委员会审批通过。

1.2 标本采集 于清晨空腹时抽取入组对象外周血标本4 mL，3 500 r/min离心后冻存于-80 ℃，备用。

1.3 检测DEC1、LXRβ水平 采用双抗体夹心ELISA法检测DEC1、LXRβ水平，试剂盒购于武汉博士德生物技术有限公司。双抗体夹心ELISA法步骤如下：(1)包被。用0.05 M pH9，碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10 μg/mL，在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1 mL，4 ℃过夜；次日弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3 min；(2)加样。加一定稀释的待检样品0.1 mL于上述已包被之反应孔中，置37 ℃孵育1 h，然后洗涤；(3)加酶标抗体。于各反应孔中加入新鲜稀释的酶标抗体0.1 mL，37 ℃孵育0.5～1 h，洗涤；(4)加底物液显色。于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1 mL，37 ℃ 10～30 min；(5)终止反应。于各反应孔中加入2 M硫酸0.05 mL；(6)结果判定。在ELISA检测仪上于450 nm处以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

1.4 统计学处理 使用SPSS 18.0，计量资料行t检验或单因素方差分析，相关性分析采用Pearson检验；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 脑梗死组和对照组血清DEC1、LXRβ水平比较

脑梗死组血清DEC1水平高于对照组(P<0.01)，脑梗死组血清LXRβ水平低于对照组(P<0.01)(表1)。

表1 脑梗死组和对照组血清DEC1、LXRβ水平比较)

注：与对照组比较，*P<0.01

2.2 急性脑梗死患者血清DEC1、LXRβ水平与各临床指标的关系

随着急性脑梗死患者病情的加重，血清DEC1水平呈不断升高趋势(P<0.05)；随着患者功能障碍程度的加重，血清DEC1水平不断升高(P<0.05)。随着急性脑梗死患者病情的加重，血清LXRβ水平不断降低(P<0.05)；随着急性脑梗死患者功能障碍程度的加重，血清LXRβ水平不断降低(P<0.05)。血清DEC1、LXRβ水平与急性脑梗死患者年龄、性别、不同循环梗死区部位未表现出明显的相关性(P>0.05)(表2)。

2.3 相关性分析

急性脑梗死患者血清DEC1水平与LXRβ水平呈负相关(r=-0.331，P=0.009)。

3 讨 论

脑梗死为神经内科最常见的心脑血管疾病[8]，患者体内存在多种生化指标的变化[9-10]。脂质代谢紊乱在脑梗死发病过程中起重要作用。Raimund 等[8]的研究发现，脑梗死患者存在严重的脂质代谢紊乱，而和脂质代谢相关的生化指标较正常人群出现明显的波动和改变。DEC1亦称为分化型胚胎软骨发育基因，为BHLH家族成员，广泛分布于心脏、呼吸道、消化道等人体常见组织[11]，其在神经元发育生长、脂质代谢、细胞增殖分化及免疫反应过程中均发挥一定作用[12]。本研究探讨了DEC1与脑梗死的关系。本研究结果显示，脑梗死患者血清DEC1水平明显高于健康人群，表明DEC1可能参与了脑梗死的发病。此外，本研究亦发现随着脑梗死病情和功能障碍程度的不断加重，血清DEC1水平呈不断升高趋势，这表明DEC1可能参与了脑梗死的病情进展。本研究还发现，DEC1与脑梗死患者的年龄及性别无明显相关性。表明DEC1在脑梗死病情发展及功能障碍中扮演重要角色。本研究结果与Seino等的研究结果[11]一致。Seino等[11]在研究中亦发现DEC1的表达与脑梗死病情及功能障碍有关。

表2 急性脑梗死患者血清DEC1、LXRβ水平与临床指标的关系

LXRβ为LXRs亚型之一，位于19号染色体，与LXRα具有同源性[13]。LXRβ在神经发育、脂质代谢、炎症反应中均发挥作用[14-15]。本研究亦对LXRβ在脑梗死发病及进展中的作用进行了探讨。本研究发现，LXRβ可能亦与脑梗死的发病有关，脑梗死患者血清中LXRβ水平明显低于健康人群。随着脑梗死患者病情的加重、功能障碍程度的加重，LXRβ亦呈不断降低。同样，LXRβ与脑梗死患者的年龄及性别亦无明显相关性。

本研究亦发现，脑梗死患者血清DEC1、LXRβ水平呈负相关，这表明DEC1、LXRβ在脑梗死的发病及病情进展中可能共同起作用。相关研究亦证实，DEC1对LXRβ具有调节作用[14]。LXRβ的缺失或表达减少可加重功能障碍的程度，加重脑梗死病情。因此，本研究推测，DEC1通过负向调控LXRβ进而在急性脑梗死发病及病情加重、功能障碍程度加重过程中发挥作用，但具体信号通路仍然有待下一步深入探讨。

本研究的不足在于研究规模较小，且未对DEC1如何调控LXRβ进而调控急性脑梗死病情进展的具体信号通路进行深入探讨。因此，本研究打算对此进行进一步深入探讨。

综上所述，本研究显示，DEC1、LXRβ可能参与了急性脑梗死的发病及病情进展，且DEC1可能通过负向调控LXRβ进而在急性脑梗死发病及病情加重、功能障碍程度加重过程中发挥作用。

[1] Jiao L,Chu C,Zhou S.Prognostic value of copeptin in patients with acute stroke[J].Expert Rev Neurother,2015,15(5):563-570.

[2] 华威,吴鹤,周敏,等.重组人促红细胞生成素对脑梗死后少突胶质细胞的保护作用[J].中华病理学杂志,2015,44(5):323-328.

[3] 张亚,刘艺,王珊珊,等.脑梗死后脑水肿的研究进展[J].中华老年心脑血管病杂志,2015,17(3):331-333.

[4] 陈佳,梁燕玲,郑翾,等.超声介导微泡携带激肽原酶靶向治疗技术对实验性急性脑梗死后神经再生及血管新生的影响[J].中华神经科杂志,2015,48(1):55-60.

[5] 张媚,熊莉君,喻小红.初发脑梗死患者同型半胱氨酸、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α水平与并发焦虑抑郁状态的相关性研究[J].中华实验外科杂志,2014,31(4):887-888.

[6] Krupinski J,Kaluza J,Kumar P,et al.Role of angiogenesis in patients with cerebral ischemic stroke[J].Stroke,1994,25(9):1794-1798.

[7] 中华医学会神经病学分会.中华医学会神经病学分会脑血管病学组.中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014[J].中华神经科杂志,2015,48(4):246-257.

[8] Helbok R,Schiefecker AJ,Beer R,et al.Early brain injury after aneurysmal subarachnoid hemorrhage: a multimodal neuromonitoring study[J].Crit Care,2015,19(1):75.

[9] 龚如,万杰清,樊翊凌,等.急性脑梗死患者外周血内皮祖细胞水平变化及其临床意义[J].中华创伤杂志,2014,30(7):725-729.

[10]孔德燕.腔隙性脑梗死患者脑微出血与循环内皮微粒的相关性研究[J].中华老年心脑血管病杂志,2015,17(6):610-612.

[11]Seino H,Wu YY,Morohashi S,et al.Basic helix-loop-helix transcription factor DEC1 regulates the cisplatin-induced apoptotic pathway of human esophageal cancer cells[J].Biomedical Research-Tokyo,2015,36(2):89-96.

[12]Sato F,Muragaki Y,Zhang Y.DEC1 negatively regulates AMPK activity via LKB1[J].Biochem Biophys Res Commun,2015,467(4):711-716.

[13]Nomura S,Endo-Umeda K,Aoyama A,et al.Styrylphenylphthalimides as novel Transrepression-Selective liver X receptor (LXR) modulators[J].ACS Med Chem Lett,2015,6(8):902-907.

[14]Nian S,Gan X,Tan X,et al.Discovery and synthesis of a novel series of liver X receptor antagonists[J].Chem Pharm Bull (Tokyo),2015,63(8):628-635.

[15]Kim CY,Lee JS,Kim HD,et al.Lower extremity muscle activation and function in progressive task-oriented training on the supplementary tilt table during stepping-like movements in patients with acute stroke hemiparesis[J].J Electromyogr Kinesiol,2015,25(3):522-530.

(2016-05-16收稿 2016-06-13修回)

The expression of serum DEC1 and LXRβ in atherosclerotic cerebral infarction and its clinical significance

ShiJingjing,ChenTao,LiuYi,etal.

DepartmentofNeurology,AnkangCentralHospital,Ankang725000

Objective To detect the expression of serum differentiation type embryonic cartilage development genes 1(DEC1)and liver X receptor β(LXRβ) in atherosclerotic cerebral infarction, and explore its clinical significance.Methods 60 patients with acute cerebral infarction from March 2011 to December 2015 in our hospital were selected as the research object,and 60 healthy people from March 2013 to December 2015 were selected as control group.The concentration of serum DEC1 and LXRβ in all cases was detected.Results The serum level of DEC1 in acute stroke group was significantly higher than in the control group (P<0.01).The serum level of LXRβ in the acute stroke group was significantly lower than in the control group (P<0.01).With the deterioration of patients’ condition,the serum level of DEC1 was rising (P<0.05).When the patients’ dysfunction was aggravating,the serum level of DEC1 was rising (P<0.05).With the deterioration of patients’ condition,the serum level of LXRβ trended to decrease (P<0.05).As the patients’ dysfunction was aggravating,the serum level of LXRβ trended to decrease (P<0.05).The serum level of DEC1in patients with acute stroke had a negative correlation with that of LXRβ(r=-0.331，P=0.009).Conclusion DEC1 and LXRβ are involved in the onset of acute cerebral infarction and its progression.DEC1 plays a role in the pathogenesis of acute cerebral infarction,its deteriorating process and the aggravation of patients’ dysfunction through negatively regulating LXRβ.

Stroke Differentiation type embryonic cartilage development genes 1 Liver X receptor β

725000 陕西省安康市中心医院神经内科[施静静 陈涛(通信作者) 刘毅 金泉伟 王婧蕾 徐杰]

R743.1

A

1007-0478(2017)01-0024-04

10.3969/j.issn.1007-0478.2017.01.006