散发型阿尔茨海默病患者血清IL-18水平的研究

敖娟，汤俊芬

（广州市第一人民医院南沙医院，广东 广州 511400）

散发型阿尔茨海默病患者血清IL-18水平的研究

敖娟，汤俊芬

（广州市第一人民医院南沙医院，广东 广州 511400）

目的探讨外周血清IL－18水平与散发型阿尔茨海默病 （AD）的相关性及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）直接检测AD组 （n＝73）和同期年龄、性别、教育与之相匹配的正常对照组 （n＝51）的外周血清中IL－18水平，根据MMSE评分和教育年限将AD组分为轻、中、重度三组。结果AD组与正常对照组的外周血清IL－18水平分别为 （338．75± 135．31）pg／mL和 （226．02±108．73）pg／mL，AD组显著高于正常对照组 （P＜0．01）；AD组的IL－18水平与AD的严重程度呈正相关，即重度 ＞中度＞轻度，组间差异均有统计学意义 （P＜0．05），IL－18水平与AD患者的MMSE评分呈负相关 （r＝－0．490，P＜0．001）。结论散发型AD患者外周血清中IL－18水平较正常人升高，且与疾病严重程度有关。

IL－18；阿尔茨海默病；免疫炎性反应

阿尔茨海默病 （Alzheimer disease，AD）又称为老年性痴呆，是老年人常见的神经系统变性疾病。目前，AD的病因尚未明确，众多因素可能与其相关，如年龄、环境、遗传、神经毒性、神经递质系统功能障碍、免疫炎性反应等。研究表明免疫炎性反应在AD的发生、发展中起着重要作用，IL－18作为一种炎性因子，可能参与了衰老、神经炎症、神经退行性变等的病理过程［1］。IL－18参与AD的发病可能是通过激活的小胶质细胞释放IL－18等炎性因子，而IL－18又能反馈性促进β淀粉样蛋白沉积、激活小胶质细胞，从而导致 AD的发生［2－3］。本研究通过测定AD患者和正常对照组外周血清中IL－18水平，比较AD组与正常对照组外周血清中IL－18表达水平的差异，以探讨IL－18在AD发病机制中所起的作用。

1 资料与方法

1．1 研究对象AD组来自于广州市第一人民医院、广州市第一人民医院南沙中心医院自2013年10月至2016年10月的门诊与住院患者，共 73例，年龄为61～83岁，其中男性 38例，女性35例，均符合DSM－IV、NINCDS／ADRDA的诊断标准且没有家族史。正常对照组来自于广州市第一人民医院南沙中心医院健康体检中心，共51例，年龄、性别、学历均与AD组相匹配，年龄在 64～83岁之间，其中男性 26例，女性 25例，无记忆障碍主诉，且检查无认知障碍，MMSE评分在27～30分之间。AD组和正常对照组彼此间均无血缘关系，均无任何感染或炎性反应的症状和体征，无主要的内科疾病和自身免疫性疾病；CRP水平≤20 mg／L。

1．2 研究方法采用酶联免疫吸附实验方法 （ELISA）测定血清IL－18水平，试剂盒由美国eBioscience公司提供。抽血当日进行血清分离，并将血清于－80℃冰箱进行编号保存，实验结果用SM－3型酶标仪 （北京天石医疗公司生产）于450 nm及630 nm波长处进行双波长测定，操作严格按试剂盒说明书进行。

1．3 观察指标统计AD组和正常对照组的性别、年龄、教育、BMI值、血压、清晨空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、MMSE评分等，检测AD组与正常对照组的外周血清IL－18水平。

1．4 统计学分析数据采用SPSS 18．0统计软件包进行统计分析。计量资料采用两独立样本t检验，统计结果以均数 ±标准差表示。疾病关联分析采用Pearson相关分析。P＜0．05表示差异有统计学意义，P＜0．01表示差异有显著统计学意义。

2 结果

2．1 AD组和正常对照组的基线资料比较AD组 （73例）和正常对照组 （51例）的性别、年龄、教育、BMI值、血压、清晨空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白经比较，差异均无统计学意义 （P＞0．05）。正常对照组和AD组的MMSE评分为 （28．94±0．88）分和 （17．75±6．06）分，差异有统计学意义 （t＝15．544，P＝0．000＜0．01）。

2．2 外周血清中IL－18水平与AD的相关性分析正常对照组和 AD组外周血清中 IL－18的水平分别为 （226．02±108．73）和 （338．75±135．31）pg／mL，AD组显著高于正常对照组，差异有统计学意义 （t＝4．938，P＝0．000＜0．01）。根据MMSE评分及受教育年限将AD组分为轻、中、重度三组，其外周血清IL－18水平分别为 （283．73±86．63）pg／mL、 （360．29±130．72）pg／mL、 （555．20±192．22）pg／mL，中度组显著高于轻度组（t＝2．829，P＝0．006），重度组显著高于轻度组 （t＝3．111，P＜0．05），亦显著高于中度组 （t＝2．944，P＝0．006），差异均有统计学意义。

2.3 外周血清中IL-18水平与MESS评分的相关性分析AD患者外周血清中IL－18的水平与MMSE评分呈负相关关系 （r＝－0．490，P＜0．001，图1），随着MMSE评分的降低，AD患者的IL－18水平逐渐升高，提示IL－18水平与AD患者的疾病严重程度呈正相关。

图1 AD患者外周血清IL－18与MMSE评分的相关性分析

3 讨论

免疫炎性反应一直是近来研究的热点，大量证据表明，免疫炎性反应在AD的发生、发展中起到重要作用，但是炎性反应在AD的病理过程中具体起着怎样的作用目前仍不清楚［1］。流行病学调查显示，NSAIDs可能对AD患者起到保护作用，这说明神经炎性反应可能与AD有关。

以往众多证据［4－5］表明 IL－1α、 IL－1β、 IL－6、 TNF－α等炎性因子会增加AD的发病风险，除此之外，IL－1超家族的另一成员IL－18在 AD患者脑组织中的水平是升高的［5］，IL－18在体内具有广泛的分布，在中枢神经系统，如海马、纹状体、下丘脑、小脑、大脑皮质均可检测到［6］。IL－18的作用是多样化的，它能够促进T细胞增殖、诱导细胞免疫反应并分泌IFN－γ、INF－α、IL－1β等炎性因子，并通过增强TH1和NK的细胞毒性，以及FasL的表达来介导细胞毒性反应。IL－18无论是对免疫调节、抗感染还是慢性炎症性疾病都发挥了非常重要的作用［7］。IL－18对免疫炎性反应和神经免疫反应的作用是双向的，它在自身免疫性疾病、局部缺血、外伤、中枢神经系统感染等疾病中既有保护作用，也有损害作用。

在本研究中，AD患者的外周血清中IL－18水平显著高于正常对照组，差异有统计学意义 （P＜0．05）。蛋白的表达涉及转录、翻译诸多环节，且IL－18与炎性反应、肿瘤、免疫、内分泌等疾病相关，因此患者的个体情况可能对结果产生很大的影响，故选择受试者时应尽可能排除干扰因素，以保证结果的可靠性。本研究中，AD组的IL－18水平与AD的严重程度呈正相关，即重度 ＞中度 ＞轻度，组间差异有统计学意义。既往研究［8］表明，IL－18对INF－γ有强烈的诱生能力，从而促进趋化因子、巨噬细胞炎性蛋白、IL－8等因子的产生，而这些因子又能够反过来促进IL－18的生成，这样就有可能导致一个恶性循环，从而加重病情，这与本研究中外周血清中IL－18水平与AD的严重程度呈正相关是一致的，因此推测IL－18可能参与了AD的发生与发展，检测AD患者外周血清中IL－18的水平，可在一定程度上反映AD患者的免疫应答程度。

[1] Wyss-Coray T,Rogers J.Inflammation in Alzheimer disease-a brief review of the basic science and clinical literature[J].Cold Spring Harb Perspect Med,2012,2(1):a006346.

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[3] Sugama S,Cho BP,Baker H,et al.Neurons of the superior nucleus of the medial habenula and ependymal cells express IL-18 in rat CNS [J].Brain Res,2002,958(1):1-9.

[4] Déniz-Naranjo MC,Munoz-Fernandez C,Alemany-Rodríguez MJ,et al.Cytokine IL-1 beta but not IL-1 alpha promoter polymorphism is associated with Alzheimer disease in a population from the Canary Islands,Spain[J].Eur J Neurol,2008,15(10):1080-1084.

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[8] Okamura H,Tsutsui H,Komatsu T,et al.Cloning of a new cytokine that induces IFN-gamma production by T cells[J].Nature,1995, 378(6552):88-91.

（责任编辑：钟婷婷）

Study on the Level of Serum Interlukin-18 in Peripheral Blood of Patients with Sporadic Alzheimer's Disease

AO Juan,TANG Junfen
(Nansha Hospital of Guangzhou First People's Hospital,Guangzhou 511400,China)

ObjectiveTo study the correlation of interleukin-18(IL-18)in peripheral blood with sporadic Alzheimer's disease(AD) and its clinical significance.Methods73 cases of AD patients(AD group)and 51 cases of normal control group with matched age,gender and education at the same period were selected.ELISA was used to detect the IL-18 level in peripheral blood of both groups.AD patients were divided into the mild group,moderate group and severe group according to their MMSE score and education years.ResultsThe IL-18 level in peripheral blood of AD group was(338.75±135.31)pg/mL,significantly higher than(226.02±108.73)pg/mL of normal control group(P<0.01).The IL-18 level in AD group was directly proportional to the severity of AD,suggesting that IL-18 level was highest in severe group,following by moderate group,and then mild group(intra-group comparison,all P<0.05).The IL-18 level was negatively correlated with MMSE score in AD patients(r=-0.490,P<0.001).ConclusionsThe IL-18 level in peripheral blood is higher in AD patients than in normal individuals,also,it's related to the severity of AD.

Interleukin-18(IL-18);Alzheimer's disease(AD);Immune inflammatory reaction

R742

：A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.08.1109

2017－04－07

敖娟 （1986－），女，江西新余人，硕士研究生学历，医师，研究方向：痴呆。