检测未成熟粒细胞在脓毒症诊断中的应用价值

马 科，张娅娟，詹明华，连晶晶，李宝亮

(河北北方学院附属第一医院 a.检验科; b.医务处， 张家口 075000)



检测未成熟粒细胞在脓毒症诊断中的应用价值

马 科a，张娅娟b，詹明华a，连晶晶a，李宝亮a

(河北北方学院附属第一医院 a.检验科; b.医务处， 张家口 075000)

目的 分析未成熟粒细胞(immature granulocyte，IG)在脓毒症诊断中的检测价值。方法 选取河北北方学院附属第一医院2016年9月至12月间就诊健康体检人员50例、非脓毒症感染患者44例和脓毒症患者56例，抽取静脉血液标本检测未成熟粒细胞(IG#，IG%)、降钙素原(PCT)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)含量进行统计分析，应用受试者工作特征曲线分析检测未成熟粒细胞(IG#和IG%)在脓毒症诊断中的应用价值。结果 脓毒症患者和非脓毒症感染患者血液中未成熟粒细胞(IG#，IG%)、降钙素原(PCT)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)含量均显著高于正常健康人员，脓毒症患者未成熟粒细胞(IG#和IG%)含量虽高于非脓毒症感染患者，但无统计学差异。检测未成熟粒细胞(IG#，IG%)诊断脓毒症的曲线下面积(area under the curve，AUC)依次为0.862、0.867，当IG#和IG%参数cut-off值为0.065、0.75时，敏感度为0.679、0.768，特异性为0.980、0.840，约登指数为0.659、0.608，阳性似然比为33.95、4.80，阴性似然比为0.33、0.28。结论 检测未成熟粒细胞为脓毒症诊断监测的一个新的炎症指标，但检测未成熟粒细胞并不能用于区分患者感染的严重程度。

未成熟粒细胞;受试者工作特征曲线;脓毒症

脓毒症(sepsis)指由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，是感染、烧伤、创伤、休克等急危重患者的严重并发症，临床患者死亡率较高，是ICU患者死亡的主要原因[1-3]。脓毒症早期发现困难，确诊时患者病情已发展至危重，尽管临床采取抗感染治疗、早期目标导向治疗(early goal-directed therapy，EGDT)等多种治疗方案，脓毒症的死亡率依然较高，治疗费用高且医疗资源消耗巨大[4-6]。

目前临床诊断脓毒症的检测项目主要有降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、血细胞计数和血培养，由于脓毒症患者病情复杂，依据现有检测方法确诊脓毒症较病情发展相对滞后，尤其是早期脓毒症(early-onset sepsis，EOS)诊断十分困难，一旦确诊病程已进入中晚期阶段，能为临床提供一种快速、准确鉴别诊断脓毒症的检测项目，第一时间给予患者治疗显得极其重要[7-8]。早期研究发现，脓毒症患者血液中中性杆状核粒细胞含量增高，临床把患者中性杆状核粒细胞计数与白细胞总数比率超过10%作为脓毒症、感染性疾病诊断的炎症指标。近期研究发现，感染、脓毒症患者病程早期骨髓释放早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞等未成熟粒细胞(immature granulocyte，IG)进入外周血中，检测未成熟粒细胞作为炎症指标在感染疾病、脓毒症的诊断治疗过程中发挥作用[9-10]。未成熟粒细胞在人外周血中含量极低，计数常低于0.1(109/L)，应用传统显微镜涂片镜检方法不能准确计数未成熟粒细胞，新一代全自动血液分析仪应用核酸荧光染色技术，可准确计数高荧光强度的未成熟粒细胞[11-12]。本研究应用Sysmex XN-2000全自动血细胞分析仪检测患者外周血未成熟粒细胞绝对值(IG#)和百分比(IG%)，探讨未成熟粒细胞在脓毒症诊断治疗中的应用价值，丰富脓毒症的检测方法，为脓毒症的早期诊断、治疗提供实验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取河北北方学院附属第一医院2016年9月至12月间健康体检人员外周血标本50例作为正常对照组，其中男26例，女24例，年龄22～60岁，平均年龄(32.5±9.8)岁；非脓毒症感染患者44例作为非脓毒症组，其中男21例，女23例，年龄30～61岁，平均年龄(43.2±10.8)岁；脓毒症感染患者56例作为脓毒症组，其中男30例，女26例，年龄35～65岁，平均年龄(45.5±10.5)岁。所有人员对本次研究的具体情况均知情同意，符合本院医学伦理委员会标准。

1.2 脓毒症诊断标准

患者感染引发全身炎症反应，经实验室检验证实有细菌感染或有高度可疑感染灶，同时具备以下2项或2项以上体征：(1)体温>38 ℃或<36 ℃；(2)外周血白细胞计数>10.0×109/L或<4.0×109/L；(3)中性杆状核粒细胞计数比>10%；(4)心率>90次/min；(5)呼吸频率>20次/min或动脉二氧化碳分压(PaCO2)<32 mmHg。

1.3 仪器和试剂

血细胞计数仪器选取Sysmex XN-2000全自动血细胞分析仪，使用原厂配套试剂及Sysmex专用质控品(Sysmex e-Check) 进行检测，采集标本使用EDTA-K2抗凝管保存。PCT使用UPT上转发光免疫分析仪测定，标本使用肝素锂抗凝管保存。

1.4 标本采集与检测

标本采集依据《全国临床检验操作规程(第4版)》要求，抽取患者静脉血液标本2ml置于EDTA-K2抗凝管中检测白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、未成熟粒细胞含量(IG#，IG%)，同时抽取3ml静脉血标本置于肝素锂抗凝管中检测降钙素原(PCT)，标本采集后2小时内完成检测。试验期间每天采用质控物对仪器进行监测，质控结果符合要求。

1.5 检测IG含量在脓毒症诊断中的作用

抽取正常对照组、非脓毒症组和脓毒症组三组人员静脉血液标本检测未成熟粒细胞(IG#，IG%)、降钙素原(PCT)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)含量，IG#和IG%参数数据使用非参数检验(kruskal-wallis H检验)分析，PCT、WBC和NEUT参数数据使用独立样本t检验分析，比较各组之间检测指标差异。绘制受试者工作特征曲线 (receiver operating characteristic curve，ROC曲线)，计算IG#和IG%参数的曲线下面积(AUC),分析检测IG#和IG%诊断脓毒症的灵敏度、特异性、约登指数等指标，探讨检测未成熟粒细胞在脓毒症诊断中的应用价值，为脓毒症的早期诊断和治疗提供依据。

1.6 数据整理与统计学处理

2 结果

3组患者血液IG#、IG%、PCT、WBC和NEUT水平比较：脓毒症感染患者和非脓毒症感染患者血液IG#、IG%、PCT、WBC和NEUT水平均显著高于正常非感染患者(P<0.01)，脓毒症患者血液IG#、IG%、WBC和NEUT水平虽高于非脓毒症感染患者，但无统计学差异(P>0.05)，脓毒症患者PCT水平显著高于非脓毒症感染患者(P<0.01)，见表1。

表1 脓毒症组、非脓毒症组和正常对照组3组患者检测指标

a) 与正常对照组比较，P<0.01; b) 与脓毒症组比较，P<0.01

运用受试者工作特征曲线对未成熟粒细胞IG#和IG%参数进行分析，曲线下面积(area under the curve，AUC)依次为0.862、0.867，当IG#和IG%参数cut-off值为0.065、0.75时，敏感度为0.679、0.768，特异性为0.980、0.840，约登指数为0.659、0.608，阳性似然比为33.95、4.69，阴性似然比为0.33、0.28，见表2、图1。

表2 未成熟粒细胞IG#及IG%参数的曲线下面积(AUC)

图1 IG#和IG%参数的ROC曲线

3 讨论

尽管对脓毒症发病机制的研究取得了很大的进展，近年临床患者因感染引发脓毒症比率逐年增高，脓毒症病死率依然高于30%。脓毒症早期诊断对于疾病的预防与治疗显得极其重要，是脓毒症治疗方案的首要目标。第一时间给予患者早期有效的抗菌药物治疗不仅可以降低脓毒症的病死率，还能大幅降低医疗费用。基于这些原因，寻找一种新颖的脓毒症早期诊断指标是脓毒症疾病研究领域的一个热门[13-15]。

在研究中，我们筛选出脓毒症患者、感染的非脓毒症患者以及正常健康人员抽取静脉血液标本，通过检测未成熟粒细胞(IG#、IG%)、降钙素原、血细胞计数等检测指标，分析检测未成熟粒细胞诊断脓毒症的灵敏度、特异性、约登指数等指标，探讨未成熟粒细胞作为一个新颖的炎症检测指标在脓毒症诊疗中的应用价值。研究发现，脓毒症患者与非脓毒症感染患者外周血中未成熟粒细胞含量与正常健康人比较存在显著性差异，未成熟粒细胞绝对值(IG#)和百分比(IG%)均高于正常健康人。在脓毒症患者和非脓毒症感染患者之间，未成熟粒细胞绝对值(IG#)和百分比(IG%)比较不存在显著`性差异，表明未成熟粒细胞(IG#、IG%)可以作为一个新型的炎症指标用于感染性疾病的临床诊断，但未成熟粒细胞(IG#、IG%)不能用于区分感染的严重程度。运用受试者工作特征曲线 (receiver operating characteristic curve，ROC曲线)分析检测IG#和IG%诊断脓毒症的曲线下面积(AUC)依次为0.862、0.867，当IG#和IG%参数cut-off值为0.065、0.75时，敏感度为0.679、0.768，特异性为0.980、0.840，约登指数为0.659、0.608，阳性似然比为33.95、4.80，阴性似然比为0.33、0.28。结果表明，脓毒症患者检测未成熟粒细胞(IG#、IG%)的敏感性、特异性较高，诊断效果显著，未成熟粒细胞可用于脓毒症疾病诊断。

综上，脓毒症感染患者未成熟粒细胞含量明显升高，检测未成熟粒细胞为脓毒症感染疾病诊断监测的一个新的炎症指标，但检测未成熟粒细胞并不能用于区分患者感染的严重程度。

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(责任编辑 杨继森)

The Application Value of Monitoring Immature Granulocytes in Patients with Sepsis

MA Kea, ZHANG Yajuanb, ZHAN Minghuaa, LIAN Jingjinga, LI Baolianga

(a.Department of Laboratory Medicine; b.Department of Medical, the First Affiliated Hospital of Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China)

Objective To explore the application value of immature granulocytes(IG) in patients with sepsis. Methods Blood samples were routinely taken from clinical patients in the First Affiliated Hospital of Hebei North University from September to December 2016. Three groups of patients have been analyzed and compared: healthy people(n=50), patients with local infections(n=44), and patients with sepsis(n=56).The absolute and percentage number of immature granulocyte (IG# and IG%), procalcitonin (PCT), leukocyte (WBC) and neutrophile granulocyte (NEUT) were analyzed,then we drew the receiver operating characteristic curve (ROC curve) to evaluate the function of immature granulocytes in sepsis. Results Compared with healthy people, the levels of IG#,IG%, PCT, WBC and NEUT were significantly higher in patients with local infections and patients with sepsis. But there was no statistical difference of immature granulocytes between patients with sepsis and those with local infections. The area under curve (AUC) of IG# and IG% were 0.862,0.867, respectively. When the cut -off values of IG# and IG % were presented as follows: 0.065,0.75, Sensitivity values were 0.679,0.768, Specificity values were 0.980, 0.840, Youden index were 0.659,0.608, and positive likelihood ratio were 33.95,4.80 and negative likelihood ratio were 0.33,0.28. Conclusion Immature granulocyte could be a new and powerful indicator for diagnosing and screening sepsis, not discrimination of infections severity.

immature granulocyte; the receiver operating characteristic curve; sepsis

10.11809/scbgxb2017.07.040

2017-03-10；

2017-03-30

河北省张家口市科学技术和地震局科学技术研究与发展计划项目(1421093D)；河北省医学科学研究重点课题计划项目(20170795)

马科(1977—)，男，硕士，主要从事临床检验方面的研究。

format:MA Ke, ZHANG Yajuan,ZHAN Minghua,et al.The Application Value of Monitoring Immature Granulocytes in Patients with Sepsis[J].Journal of Ordnance Equipment Engineering,2017(7):184-187.

R4

A

2096-2304(2017)07-0184-04

本文引用格式：马科，张娅娟，詹明华，等.检测未成熟粒细胞在脓毒症诊断中的应用价值[J].兵器装备工程学报，2017(7):184-187.