不同基质对低温保鲜人参的影响

贾璐璐+李琼+王慧斌+许永华

[摘要] 该文以鲜人参为试验材料，利用采收地土壤、蛭石、珍珠岩和蛭石与珍珠岩1∶1处理， 以室外生长人参为对照，在4 ℃保鲜处理6个月，测定人参体内SOD，POD酶活、人参皂苷及蛋白含量，考察不同贮藏介质对人参保鲜贮藏的影响。研究结果表明：采用珍珠岩保鲜处理，贮藏6个月后人参的外观品相完好，且具有成活能力，SOD，POD活性较低，皂苷及蛋白得以有效贮存。利用珍珠岩在4 ℃保存，人参所受逆境侵害较小，是适宜鲜参贮藏运输的条件。

[关键词] 人参；保鲜；贮藏；珍珠岩

[Abstract] The SOD and POD enzyme activities were detected， ginseng saponin content and protein concentration at 4 ℃ preservation on fresh ginseng by different substrates were determined. The results showed that the appearance of the ginseng and the survival ability were good after six months by perlite preservation. It has lower SOD， POD enzyme activity and higher saponins and protein contention. It is the best fresh storing conditions for ginseng by using perlite at 4 ℃ preservation.

[Key words] ginseng；freshness；storage；pearlite

人参Panax ginseng C.A.Mey.是五加科人参属重要药用植物。具有大补元气、补脾益肺、安神益智、生津等功效[1]。人民生活水平的不断提高以及对绿色食品的向往，对产品的内在质量要求也就愈来愈高，随着我国与国际接轨的形势要求，越来越要求色、形、味和成分含量俱佳的保鲜人参[2]，该文研究了不同基质处理对贮藏鲜人参SOD，POD，人参皂苷，蛋白含量的变化规律，为延长鲜参的货架期提供基础研究，为日益增大的鲜人参市场提供技术支撑。

1 材料

蛭石、珍珠岩、色谱乙腈、色谱甲醇、无水乙醇、磷酸盐缓冲液（pH 7.4）、双蒸水、试剂盒。

人参来自于吉林农业大学药用植物园种植的六年生人参，经吉林农业大学张连学教授鉴定为五加科人参属人参P. ginseng，为“大马牙”农家类型。于2015年10月25日采挖后置于潮湿土壤中保存备用。

仪器有岛津色谱工作站LC solution、紫外-可见光分光光度计、酶标仪、组织研磨仪、分析天平、低温离心机、人工培养箱、恒温鼓风干燥箱、漩涡混匀器、水浴锅。

2 方法

2015年11月2日，将人参从种植地取出，在土壤，珍珠岩-蛭石1∶1，珍珠岩，蛭石4种不同基质中，4 ℃下进行保鲜贮藏。至2016年5月3日截止，以2016年5月3日在吉林农业大学药用植物园采收的人参为对照组，于2016年5月4日，测定人参的地下部分及萌发茎叶中SOD，POD酶和人参皂苷、蛋白含量。

粗酶液的制备：取人参试验部分1.00 g经低温冷冻研磨后加0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液稀释（pH 7.4）到10%。充分混匀提取20 min，4 ℃条件下3 800 r·min^-1，离心15 min，取上清液为粗酶液。

2.1 SOD（超氧化物歧化酶）活性的测定 SOD（超氧化物歧化酶）试剂盒应用WST-1法：取粗酶液10 μL加入990 μL的磷酸盐缓冲液，稀释完成后充分混匀，测定孔和测定空白孔分别加入20 μL的待测样本，对照孔和对照空白孔分别加入20 μL双蒸水，对照孔和测定孔分别加入20 μL的酶工作液，对照孔和对照空白孔分别加入20 μL酶稀释液，测定孔、测定空白孔、对照孔、对照空白孔分别加入200 μL底物应用液。混匀，37 ℃孵育20 min，波长450 nm，酶标仪测定其吸光度。

2.2 POD（过氧化物酶）活性的测定 POD（过氧化物酶）试剂盒采用愈创木酚法：对照管分别加入缓冲液2.4 mL、促进剂0.3 mL、测定管加底物0.2 mL、对照管加双蒸水0.2 mL，对照管和测定管分别加入粗酶液0.1 mL。测定管和对照管均在37 ℃水浴准确反应30 min。然后测定管和对照管分别加入显色剂1.0 mL。充分混匀后，3 500 r·min^-1离心10 min，取上清液在420 nm下，1 cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度，并进行比较分析。

2.3 皂苷检测 人参根样品乙醚抽脂，利用索氏提取法80 ℃甲醇提取12 h，每秒1～2滴，旋转蒸发仪减压回收甲醇，色谱甲醇定容至8 mL，以Rg₁，Re，Rf，Rb₁，Rg₂，Rc，Rb₂，Rb₃，Rd为对照品，HPLC分析，进样量10 μL。Diamonsil C₁₈色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；柱温 50 ℃；检测波长 203 nm，流速1 mL·min^-1，流动相：乙睛-水梯度洗脱，0～3 min，28%乙腈；3～5 min，28%～30%乙腈；5～9 min，30%～35%乙腈；9～22 min，35%～37%乙腈；22～23 min，37%～28%乙腈；23～30 min，28%乙腈。

2.4 蛋白质含量检测 蛋白质浓度试剂盒应用考马斯亮蓝法：空白管加双蒸水0.05 mL，标准管加入0.05 mL蛋白对照品，测定管加入0.05 mL粗酶液，空白管、标准管、测定管分别加入考马斯亮蓝显色液3.0 mL，充分混匀，静置10 min，波长595 nm，光径1 cm，双蒸水调零，测定各管吸光度。

3 结果与分析

从2015年11月开始，通过在土壤，珍珠岩和蛭石混合物，珍珠岩，蛭石4种不同基质4 ℃条件下贮藏，2016年5月进行观察测定。所有试验人参的外观完好无损，芽孢和幼苗生长良好。

3.1 SOD，POD活性变化 通过测定SOD，POD 酶的变化，考察不同保鲜处理对于SOD，POD酶活性的影响，结果见表1。

结果表明：采用土壤保鲜处理的人参根部SOD活性显著大于其他处理，且处理组SOD酶活性均大于室外生长人参，其SOD酶活性大小为：土壤>蛭石珍珠岩>蛭石>珍珠岩>对照组；土壤中贮藏的人参根的POD活性最高，正常室外生长的人参根的POD活性最低。珍珠岩>对照组>蛭石>土壤>蛭石珍珠岩。萌发的茎叶测定结果显示，正常室外条件下幼苗的SOD活性最高，蛭石条件下幼苗的SOD活性最低。其SOD酶活性大小为：对照组>土壤>珍珠岩>蛭石珍珠岩>蛭石。

SOD，POD为植物保护酶类，当植物受到逆境侵害时，保护酶活性会显著升高。对于人参主根来说，任何保鲜过程都是对主根造成一种逆境伤害。珍珠岩保鲜能够降低人参在保鲜过程中所受逆境程度，降低保鲜过程中活性氧的产生，而对于人参茎叶，任何保鲜处理均能降低人参茎叶生长发育；同时能够降低人参生长活性，故在人参保鲜过程中应适当采用珍珠岩作为保鲜材料。

3.2 皂苷含量 通过测定人参皂苷的变化，考察不同保鲜处理对于皂苷成分含量的影响，色谱条件显示分离效果满足测定要求，按照保留时间（min）依次为Rg₁（5.697），Re（5.946），Rf（13.497），Rb₁（14.671），Rg₂（16.325），Rc（16.715），Rb₂（18.085），Rb₃（18.554），Rd（23.955），色谱图见图1，标准曲线见表2。

均符合药典规定，珍珠岩保鲜处理皂苷含量最高，土壤保鲜皂苷含量最低，其皂苷含量大小为，珍珠岩>对照组>蛭石珍珠岩>蛭石>土壤，分析认为，珍珠岩保鲜可以有效抑制人参有效物质分解，室外人参可以有效生长，吸收成分，转化营养，含量次之，土壤保鲜人参消耗自身成分，故含量最低，所以利用珍珠岩保鲜极具价值，这与酶活测定结果一致。

3.3 蛋白质浓度 通过测定蛋白质浓度的变化，考察储藏条件对于蛋白代谢的影响，分测3次取平均值，结果见表4。

结果显示，室外生长的人参根的蛋白浓度最高，土壤中人参根的蛋白浓度最低，对照组>蛭石>珍珠岩>蛭石珍珠岩>土壤。可能由于室外吸收养分转化自身成分致使含量增加，蛭石能够抑制在储存过程中蛋白质的分解，与上述珍珠岩最佳的结论有所差异，但这可能与逆境情况下人参体内能源物质氧化功能有关，其机制还需进一步研究。对于几种保鲜方式来说，虽然蛭石略高于珍珠岩，但二者含量差异不大，故从蛋白含量考虑，采用珍珠岩仍然有效。

4 结论与讨论

人参因其良好的药食两用价值而闻名于世，是我国名贵中药材。人参在工业应用较为广泛，以人参为主要原料的有药制品、日用品、化妆品、食用保健品等。但是由于新鲜人参容易腐烂，所以大大地增加了人参制品的应用成本以及增加了人参应用的困难。因此，本研究采用不同的基质低温保鲜技术对人参进行处理，抑制人参腐败微生物和生理活性，增加人参的应用范围，开发出低温有效的保鲜方法，保证人参的品质，为新鲜人参应用提供一定的理论基础。

在4种基质贮藏条件下，人参的外观品相完好，生长良好，11月初采收到第2年5月，SOD，POD活性中根部变化都以带土保鲜人参中最高，2016年5月在吉林农业大学药用植物园采收测人参的活性最低，说明土壤保鲜逆境影响最大，珍珠岩最低，逆境影响最小。以珍珠岩为基质保鲜的人参中皂苷、蛋白含量较高，参体外观品相完好，生长良好，且珍珠岩经济易得，所以本研究对延长人参的货架期提供了良好的参数。为鲜人参进一步应用提供了研究基础。故以珍珠岩在4 ℃保藏，可以作为鲜参贮藏的首选条件。

人參保鲜贮藏方法的一直是人参研究的热点之一。刘强等对人参贮藏工艺的研究表明，保温层保温厚度0.75 cm，密闭层为3层，降温变化速度为每小时0.2 ℃、贮藏冷冻时间为40 d。升温变化速度为每小时0.2 ℃升至4 ℃进行低温储藏的鲜人参，浆气饱满、色黄白、栽培成活率95%[3]。赵英等应用蜂胶生物保鲜剂对鲜人参进行保鲜贮藏，鲜人参的贮存可达1年以上，人参的气味、色泽、包装情况均无明显变化；人参皂苷和氨基酸总量与鲜人参的含量差异不明显。细菌分析符合国家卫生法规定标准[4]。本研究只是在同一时间进行了SOD，POD酶活，皂苷与蛋白含量的检测，后期还要进行不同时间、温度、湿度、人参与介质配比以及抑菌的相关研究，以进一步优化贮藏条件。但目前真正意义上让人参保持生理活性，并且持续生长发育长达7个月之久的方法并未见报道。

[参考文献]

[1] 中国药典.一部[S].2015： 8.

[2] 周锡龙，陆丽.鲜药的历史沿革、现状与对策[J].基层中药杂志，2001（6）：58.

[3] 刘强， 丁丽洁， 张达正，等. 鲜人参储藏工艺研究[J].人参研究，2013， 25（1）：25.

[4] 赵英，蔡荣春，范广志，等.鲜人参生物保鲜技术研究[J].农业与技术，1995（2）：36.

[责任编辑 吕冬梅]