气相色谱法测定碳酸饮料和果酱中4种对羟基苯甲酸酯

□ 李 莉 上海市酒类产品质量检验中心有限公司

气相色谱法测定碳酸饮料和果酱中4种对羟基苯甲酸酯

□ 李 莉 上海市酒类产品质量检验中心有限公司

建立了一种气相色谱法测定碳酸饮料和果酱中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯含量的检测方法。样品经无水乙醚提取，浓缩后用无水乙醇复溶，气相色谱上机测定。4种对羟基苯甲酸酯在4～300 μg/mL范围内校准曲线线性相关系数均大于0.99，方法检出限分别为0.076 0、0.072 8、0.063 3、0.062 5 mg/kg，加标实验回收率为90.11%～105.61%，精密度为0.05%～4.53%。

对羟基苯甲酸酯；气相色谱法；碳酸饮料；果酱

对羟基苯甲酸酯，又称尼泊金酯，主要包括对羟基苯甲酸甲酯（Methyl-paraben, MP）、对羟基苯甲酸乙酯（Ethyl-paraben, EP）、对羟基苯甲酸丙酯（Propyl-paraben, PP）、对羟基苯甲酸丁酯（Butylparaben, BP）、对羟基苯甲酸异丙酯（Isopropyl-paraben, IPP）和对羟基苯甲酸异丁酯（Isobutyl-paraben, IBP）等酯类。因其在不同的pH值为4～8条件下具有抑菌作用，且抗菌作用比苯甲酸和山梨酸强，被广泛用于食品保鲜和防腐，但是大量不当使用，一定程度上会造成人体健康损害，因此，建立高效、准确的检测方法显得非常必要[1-2]。我国在《GB 2760-2014食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中明确规定：果酱和碳酸饮料中对羟基苯甲酸酯类及其钠盐最大使用量分别为0.25 g/kg、0.2 g/kg。本文建立了气相色谱法测定碳酸饮料和果酱中的4种对羟基苯甲酸酯的方法，可应用于此类食品中对羟基苯甲酸酯的检测。

1 材料与方法

1.1 仪器

Agilent 7890B气相色谱仪（配FID检测器）；METTLER ME 204电子天平；旋转蒸发仪；KD200氮吹仪。

1.2 试剂、标准品

无水乙醚、无水乙醇（均为色谱纯）；盐酸、氯化钠、无水硫酸钠、碳酸氢钠（均为分析纯）；甲醇中对羟基苯甲酸甲酯溶液、对羟基苯甲酸乙酯溶液、对羟基苯甲酸丙酯溶液、对羟基苯甲酸丁酯溶液的标准物质（中国计量科学研究院，浓度均为1.00 mg/mL）。

1.3 实验方法

1.3.1 样品前处理

准确称取5 g左右样品，转移至125 mL分液漏斗中，用10 mL饱和氯化钠溶液分次洗涤小烧杯，合并洗涤液于125 mL分液漏斗，加入1 mL1∶1盐酸酸化，摇匀，分别以75 mL、50 mL、50 mL无水乙醚提取三次，每次2 min，放置片刻，弃去水层，合并乙醚层于250 mL分液漏斗中，加入10 mL饱和氯化钠溶液洗涤一次，再用碳酸氢钠溶液（10 g/L）30 mL洗涤三次，弃去水层。用滤纸吸去漏斗颈部水分，将有机层经过无水硫酸钠（约20 g）滤入浓缩瓶，经旋转蒸发仪浓缩近干，氮吹除去残留溶剂，准确加入2 mL无水乙醇复溶，气相色谱上机测定。

1.3.2 气相色谱条件

色谱柱：HP-5毛细管柱，30 m×320 μm×0.25 μm；升温程序：初温100 ℃保持1 min，20 ℃/min升温至170 ℃保持5 min，12 ℃/min升温至220 ℃保持1 min，10 ℃/ min升温至250 ℃保持6 min；进样口：温度220 ℃，分流进样，分流比10∶1；柱流速：2.0 mL/min；检测器：FID，温度260 ℃。

表1 校准曲线的数学方程、相关性与方法检出限表

表2 碳酸饮料和果酱中对羟基苯甲酸酯的加标回收率和精密度表（n=6）

2 结果与讨论

2.1 校准曲线线性范围和检出限

本方法校准曲线共7个点：4.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、300.0 μg/mL。对羟基苯甲酸甲酯溶液、对羟基苯甲酸乙酯溶液、对羟基苯甲酸丙酯溶液、对羟基苯甲酸丁酯溶液在4～300 μg/mL范围内校准曲线线性相关系数均大于0.99，说明线性较好。

依据标准GB/T 5009.1-2003 食品卫生检验方法 理化部分 总则附录A中色谱法检出限的定义：色谱仪最低响应值为S=3N（N为仪器噪音水平，本方法中浓度为5.0 μg/mL的标样，仪器噪音水平N为0.058 69），通过计算，对羟基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯的方法检出限见表1。

2.2 加标回收率和精密度

在精确称取的5.00 g样品（碳酸饮料、果酱）中分别加入4种对羟基苯甲酸酯标准溶液，加标浓度分别为2.0、20.0、200.0 mg/kg，加标实验平行测定6次取平均值（200 mg/kg加标浓度经稀释5倍后上机分析），样品（碳酸饮料、果酱）本底中4种对羟基苯甲酸酯均未检出，具体结果见表2。

3 结论

实验结果表明：4种对羟基苯甲酸酯在4～300 μg/mL范围内校准曲线线性相关系数均大于0.99，说明在此范围内线性良好。方法检出限分别为0.076 0、0.072 8、0.063 3、0.062 5 mg/kg，3水平加标实验（n=6）回收率为90.11%～105.61%，精密度为0.05%～4.53%。

本文采用的气相色谱法适用于碳酸饮料和果酱中对羟基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯的检测，方法检出限低、灵敏度高、回收率和精密度高，可有效测定碳酸饮料和果酱类食品中4种对羟基苯甲酸酯的含量。

[1]黄辉,曹小彦,彭新凯.气相色谱法快速测定槟榔中的对羟基苯甲酸酯[J].食品科技,2014,35(8):336-338.

[2]曹淑瑞,刘治勇,张雷,等.高效液相色谱法同时测定食品中6种对羟基苯甲酸酯[J].分析化学研究报告,2012,40(4):529-533.