深圳宝安区不同年龄健康儿童血清中CK-MB正常值参考区间的建立*

刘晓鸽 曾锦婷 王金生 潘小燕

深圳宝安区不同年龄健康儿童血清中CK-MB正常值参考区间的建立*

刘晓鸽①曾锦婷①王金生①潘小燕②

目的：建立深圳宝安区不同年龄健康儿童血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)正常值参考区间，为本地区儿童心肌损伤的诊断提供科学依据。方法：采用数表法随机选取2016年2月至2017年1月在医院体检的健康儿童3176名，按年龄分为＜1岁、1～3岁、4～6岁和7～15岁4组，并选择同期18～50岁健康成年人1549名，分别采用免疫抑制法检测血清中CK-MB含量，并对数据进行统计分析，CK-MB浓度水平呈偏态分布，采用百分位数(P95)作为参考区间的单侧上限，确定本区相应的生物参考区间，并比较分析不同年龄和性别儿童血清中CK-MB浓度水平之间的差异性。结果：同年龄的4组儿童男性与女性血清中CK-MB浓度水平比较，差异无统计学意义(t=1.293，t=0.962，t=0.529，t=0.415；P＞0.05)。4组儿童血清中CK-MB浓度水平检测，＜1岁组明显高于其他3组儿童，差异有统计学意义(t=5.915，t=12.657，t=8.615；P＜0.05)；1～3岁组高于4～6岁组和7～15岁组，差异有统计学意义(t=3.092，t=3.781；P＜0.05)；而4～6岁组与7～15组之间差异无统计学意义(t=1.385，P＞0.05)。健康成年人组血清中CK-MB浓度水平明显低于健康儿童组，差异有统计学意义(t=13.592，P＜0.05)。＜1岁组、1～3岁组和4～15岁组健康儿童血清中CK-MB正常值参考区间分别为0～58 U/L、0～45 U/L和0～37 U/L。结论：深圳宝安区健康儿童CK-MB浓度水平与性别无关，而与年龄相关，且随着年龄增长CK-MB水平呈下降趋势。建立本区不同年龄儿童血清中CK-MB正常值参考区间，可为儿童心肌损伤的诊断提供科学依据。

健康儿童；肌酸肌酶MB同工酶；免疫抑制法；参考区间；心肌损伤

血清中肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase isoenzyme-MB，CK-MB)作为心肌损伤诊断的一种特异性酶，对心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的诊断、治疗及疗效判断具有重要的价值，曾为心肌梗死、心肌炎及心肌损伤诊断的金指标[1-3]。免疫抑制法因其方法简单，适于自动化，是目前国内检测血清CK-MB活性最常用方法，但免疫抑制法试剂盒给出的CK-MB正常值参考区间未区分儿童和成年人，统一为0～24 U/ L，而实际检测中大部分健康体验儿童常出现CK-MB浓度水平高于正常值的现象，因此对儿童急性心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的诊断、治疗及疗效判断带来一定的误区，甚至易造成误诊或导致不必要的确诊项目检查，以致导致儿童因确诊项目检查而带来身体创伤，并增加医疗费用及家庭经济负担，浪费公共医疗资源。为此，本研究对深圳宝安区健康儿童血清中CK-MB进行调查分析，旨在建立深圳宝安区不同年龄健康儿童血清中CK-MB正常值参考区间。

表1 同年龄不同性别的4组儿童血清中CK-MB浓度水平比较±s，U/L)

表1 同年龄不同性别的4组儿童血清中CK-MB浓度水平比较±s，U/L)

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1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2016年2月至2017年1月在深圳市宝安区福永人民医院体检的健康儿童3176名，其中男性1495名，女性1681名；年龄0～15岁，平均年龄(6.75±5.82)岁；按不同年龄分为＜1岁组(852名)、1～3岁组(816名)、4～6岁组(803名)和7～15岁组(705名)。同期选择体检的健康成年人1549名，其中男性817名，女性732名；年龄18～50岁，平均年龄(35.09±11.32)岁。

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准：①所有体检儿童经体检科医生严格体格检查，均发育正常；②心电图(electrocardiogram，ECG)、B超检查均正常；③血常规检查白细胞(white blood cell，WBC)及分类计数均在正常范围内。

(2)排除标准：①近期上呼吸道感染史及肌内注射史；②有心肌、脑部、骨骼肌及皮肤炎症等疾病；③有剧烈活动、药物及非疾病因素的影响；④有急、慢性疾病、肝、肾疾病及心脏病家族史。

1.3 仪器与试剂

日立7600型全自动生化免疫分析仪、试剂、校准品及室内质控品均由日本日立公司提供；试剂盒由宁波美康生物科技股份有限公司提供。

1.4 标本采集与检测方法

(1)所有研究对象均于凌晨空腹按标本留取统一标准方法抽取静脉血2～3 ml于一次性无抗凝剂干燥管内，及时送检。

(2)收到标本于室温静置30 min后置于离心机内以3500 r/min离心5 min，分离血清用免疫抑制法测定CK-MB浓度水平，所有标本均于2 h内检测完毕。标本检测前对7600生化分析仪进行维护、保养和定校，然后进行室内质控物检测，待室内质控物检测结果均在质量控制数值范围内后，再行研究标本检测，所有操作均严格按仪器和实验室的标准作业程序(standard operating procedures，SOP)文件进行。

1.5 统计学方法

采用SPSS 20.0统计软件进行数据处理，计量资料采用均数±标准差(x-±s)表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义；因CK-MB浓度呈偏态性分布，参考区间建立采用百分位数(P95) (x＋1.96 s)作为参考区间的单侧上限。

2 结果

2.1 同年龄不同性别患者血清中CK-MB浓度水平比较

在4组同年龄组不同性别儿童中，检测血清中CK-MB浓度水平之间比较，＜1岁组、1～3岁组、4～6岁组和7～15岁组不同性别儿童的血清中CK-MB浓度水平差异均无统计学意义(t=1.293，t=0.962，t=0.529，t=0.415；P＞0.05)，见表1。

2.2 4组健康儿童血清中CK-MB含量比较

在4组健康儿童中，＜1岁组儿童血清中CK-MB浓度水平明显高于其他3组，差异有统计学意义(t=5.915，t=12.657，t=8.615；P＜0.05)；1～3岁组高于4～6岁组和7～15岁组，差异有统计学意义(t=3.092，t=3.781；P＜0.05)；而4～6岁组与7～15组之间比较差异无统计学意义(t=1.385，P＞0.05)，见表2。

2.3 健康儿童与健康成年人血清中CK-MB浓度比较

健康成年人血清中CK-MB含量均值为(10.84± 4.76)U/L，明显低于健康儿童的均值(25.62±7.32)U/L，两者比较差异有统计学意义(t=13.592，P＜0.05)。

2.4 血清中CK-MB浓度水平正常值参考区间

同年龄不同性别儿童血清中CK-MB浓度水平之间差异无统计学意义，将同年龄不同性别儿童CK-MB结果建立统一参考区间；4～6岁组与7～15岁组CK-MB浓度水平之间差异无统计学意义，总体水平稳定，将4～15岁年龄段儿童建立统一参考区间。CK-MB浓度测得结果呈偏态分布，采用单指标百分数法计算参考区间，结合CK-MB浓度临床意义取单侧上限，以95%分位数(+1.96 s)为参考区间上限。＜1岁组、1～3岁组和4～15岁组健康儿童血清中CK-MB正常值参考区间分别为0～58 U/L、0～45 U/L和0～37 U/L。

表2 四组健康儿童血清中CK-MB含量±s，U/L)

表2 四组健康儿童血清中CK-MB含量±s，U/L)

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3 讨论

血清中CK-MB是心肌细胞中的一种特异性酶，当心肌受损，心肌细胞破坏增加时，CK-MB释放入血，导致血清中CK-MB浓度水平增高，是心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的一个敏感性指标[4-7]。目前，CK-MB浓度水平检测仍是急性心肌损伤诊断的首选指标之一，其浓度水平升高可作为心肌炎诊断的特异性指标之一，颇受临床医生重视[8-10]。

肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)主要存在脑组织、胃肠道及子宫平滑肌中，脑组织中几乎全部为CKBB。如果血清中有存在导致CK-BB升高的因素，即可造成CK-MB假性升高。儿童，尤其是婴幼儿、学龄前儿童由于其血脑屏障发育不够完善，外周血中会出现很多CK-BB，浓度可明显高于成年人[11]；吴凤丽等[12]在CK同工酶电泳时也发现，儿童患者在电泳中出现大量的CK-BB。因此，采用免疫抑制法测得的CK-MB活性就会出现假阳性反应。本研究结果显示，＜1岁的健康儿童血清中CK-MB浓度水平明显高于其他年龄组的儿童，1～3岁组高于4～6岁组和7～15岁组，差异均有统计学意义，且随着儿童年龄的增长，CK-MB浓度也逐渐下降，但与儿童性别无关，这可能与儿童血脑屏障不断发育完善和血清中CK-BB逐渐减少有关。

CK-MB浓度水平测定方法颇多，传统方法有电泳及离子交换层析法，但由于其敏感性差和操作繁琐等原因，给检验和临床工作带来不便。酶质量测定法测定CK-MB浓度，效果很好，但试剂价格昂贵，很难普及，而免疫抑制法方法简单，便于自动化，是目前国内实验室应用最多的检测方法，其采用抗M亚基的抗血清，标本中的全部CK-MM活性和50%的CK-MB活性被抑制，而CK-MB和CK-BB中B亚基的活性则不受影响。成年人血清中因CK-BB含量甚微而可忽略不计，故将CK-BB活性测定值乘以2即可认为大致代表CK-MB的活性[13-16]。本研究结果显示，健康成年人血清中CK-MB浓度明显低于健康儿童，差异有统计学意义，这可能与成年人血脑屏障发育已完善，血清中CK-BB含量甚微有关。

CK-MB免疫抑制法检测试剂盒所提供的正常参考区间未区分年龄，统一为0～24 U/L。本研究结果显示，免疫抑制法检测健康儿童血清中CK-MB含量明显高于健康成年人，且不同年龄儿童血清中CK-MB含量之间有统计学差异。因此，应用免疫抑制法检测儿童血清中CK-MB浓度水平不能直接引用试剂盒所提供的参考区间，应建立不同年龄段儿童血清中CK-MB的正常值参考区间。

健康儿童血清中CK-MB浓度水平明显高于健康成年人，且不同年龄儿童之间也存在差异性。因此，采用免疫抑制法检测儿童血清中CK-MB浓度水平时不能直接引用试剂盒提供的正常参考区间，应及时建立本区健康儿童不同年龄段CK-MB水平正常值参考区间，以便更好地为本区儿童急性心肌梗死、心肌炎及心肌损伤的诊断提供科学依据。

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The establishment of normal reference range for serum CK-MB of healthy children in different age in baoan district of Shenzhen/LIU Xiao-ge, ZENG Jin-ting, WANG Jin-sheng, et al//China Medical Equipment, 2017,14(7):92-95.

Objective: To establish the normal reference range of serum creatine kinase isoenzyme MB (CK -MB) for healthy children of different age in Baoan district of Shenzhen so as to provide scientific reference for the myocardial injury of children in this district. Methods: 3176 cases were selected from healthy children

physical examination since February 2016 to January 2017 as random number table and they were divided into four groups as age stage (＜1 year old, 1-3 years old, 4-6 years old and 7-15 years old). Besides, 1549 healthy adults (18-50 years old) were selected in the research. The CK-MB concentration in all of these cases were detected by immune suppression method, and the statistical analysis of these data revealed that the concentration level of CK-MB was skewed distribution. The P95 was determined as the up limit of unilateral in the reference interval, and then the relevant biological reference range was determined as above data. The concentration of CK-MB among different age stages and that of CK-MB between different genders were compared. Results: In every age group, the difference of concentration of CK-MB between male and female was no significant (t=1.293, t=0.962, t=0.529, t=0.415, P＞0.05). In the four groups, the concentration of ＜1 year group was significantly higher than other three groups (t=5.915, t=12.657, t=8.615, P＜0.05). And the group of 1-3 years old was significantly higher than group of 4-6 years old and group of 7-15 years old (t=3.092, t=3.781, P＜0.05), respectively. While the difference of concentration between group of 4-6 years old and group of 7-15 years old was no significant (t=1.385, P＞0.05). Besides, the concentration of healthy adult was significantly lower than that of healthy children (t=13.592, P＜0.001). The normal reference interval of group of ＜1 years old, group of 1-3 years old and group of 4-15 years old were (0～58)U/L, (0～45)U/ L and (0～37)U/L, respectively. Conclusion: The concentration of CK-MB in healthy children of Baoan district is not correlative with gender while it is correlative with age. Besides, the concentration of CK-MB is decreased with the increasing of age. To establish the normal reference range of serum CK-MB for children in different age stage can provide science reference for the diagnosis of myocardial injury in children.

Healthy children; Creatine kinase isoenzyme MB (CK - MB); Immune suppression method; Reference interval; Myocardial injury.

Department of Clinical Laboratory, Baoan District Fuyong People's Hospital of Shenzhen, Shenzhen 518103, China.

刘晓鸽,女,(1983- ),本科学历，主管技师。深圳市宝安区福永人民医院检验科，从事临床生化检验工作。

2017-03-19

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.07.023

1672-8270(2017)07-0092-04

R446.11

A

深圳市宝安区科技局资助项目(2016cx273)“不同年龄健康儿童免疫抑制法测定肌酸激酶MB型同工酶正常参考区间的建立”

①深圳市宝安区福永人民医院检验科 广东 深圳 518103

②深圳市宝安区福永人民医院儿科 广东 深圳 518103