洗衣粉对蚕豆根尖细胞的微核诱变效应研究

冯航

摘要 根据微核诱导原理，利用蚕豆根尖细胞微核检测技术对洗衣粉的毒性状况做出客观评价。结果表明：洗衣粉会诱导微核的产生，说明洗衣粉在超过一定浓度时对生物细胞是有毒的。

关键词 蚕豆根尖细胞；洗衣粉；微核诱变效应

中图分类号 R961 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）16-0177-01

现阶段，全球生态破坏、资源浪费和短缺、环境污染等问题严重。为探明环境污染对生物机体是否有蓄积毒作用，必须从环境的一致性下手。环境的一致性指环境中物理或化学污染物对生物的致畸、致癌、致突变性。“三致”中的致畸、致癌常常是致突变的结果。

微核是真核生物细胞经各种理化因子作用后引起染色体畸变，在间期细胞中的一种变现形式。微核是常用的遗传毒理指标之一，指示染色体或纺锤体的损伤。由于这种损伤会与细胞受到的外界因子的剂量呈正比，因此可用微核出现的频率来评价环境诱发因子[1]。

蚕豆根尖细胞微核试验（MCNT）技术是以染色体断裂及纺锤体损伤为测试终点的植物微核监测方法。它灵敏度高、操作技术简单，用于监测环境致突变的诱变活性对人体和其他生物体遗传物质产生危害的技术。本试验以蚕豆作试验材料，采用MCNT技术，来检测洗衣粉。

1 材料与方法

1.1 试验材料

蚕豆（根尖细胞的染色体大，DNA含量高，对诱变因子反应敏感）、奇强洗衣粉。95%乙醇、盐酸、吉姆萨染液。显微镜、试管、蚕豆培养盆、纱布、烧杯、培养皿、载玻片、凹面载玻片、小刀、恒温水浴锅、镊子、血细胞计数板。

1.2 试验方法

1.2.1 浸种胚芽。将试验用蚕豆按需要放入盛水烧杯中，在25 ℃下浸泡24 h。在此期间至少换2次水，所换水应25 ℃预温。种子吸胀后用毛巾松散包裹置洗脸盆中，保持温度，催芽12～24 h，待初生根长2～3 mm，再取发芽良好的种子，放入铺满滤纸的洗脸盆中，25 ℃继续催芽，经36～48 h，大部分初生根长至1～2 cm，根发育良好，此时可用来进行试验[2]。

1.2.2 检测因子处理根尖。选取初生根生长良好、根长一致的种子，放入盛有被测液的培养皿中，被测液浸没根尖即可。

1.2.3 根尖细胞恢复培养。处理后的种子用自来水浸洗3次，每次2～3 min。洗净后再置入有湿润滤纸的瓷盘中，25 ℃下再恢复培养24 h。

1.2.4 制片。从根尖顶端切下1 cm长的幼根，用卡诺固定液固定24 h，用蒸馏水浸洗固定好的幼根，60 ℃水浴盐酸酸解15 min。取适量根尖用吉姆萨染液染色15 min，压片。

1.2.5 镜检。细胞核呈紫红色，背景基本为无色，然后在视野内统计微核数目。

2 结果与分析

根据《全国生物技术监测规范—蚕豆根尖微核技术》规定的污染指数划分标准，参考陈光荣等的试验方法，利用污染指数（PI）值来划分污染程度。洗衣粉对蚕豆根尖微核率百分比和污染指数的统计结果见表1。可以看出，3个试验组的微核率分别为4.62%、5.37%、5.06%，远远超过了对照组的1.94%的微核率。由此表明，各试验组的洗衣粉均具有一定的污染性，且污染程度随着微核率的上升而加重。污染指数（PI）为试验组的微核百分率与对照组的微核百分率的比值，PI≤1.5时，洗衣粉几乎没有污染；1.53.5时，洗衣粉为重度污染。由表1可知，试验组的PI值都在2.0～3.5的范围内。由此表明，洗衣粉的污染指数为中度污染，表明洗衣粉具有一定的毒性[3-4]。

3 结论与讨论

前人研究结果表明，不同长度的蚕豆根尖对于微核率有较大的影响，虽然在选材时选用了颗粒饱满、体积重量相近的蚕豆，但在同样时间的成长中却不可避免地造成根尖生长程度不可能绝对相同，因此对于微核率有相对的影响。

由不同的洗衣粉的微核率可得，不同洗衣粉的浓度对人们的伤害是不同的，因此应该减少洗衣粉的用量。洗衣粉是人们生活中洗衣服的必需品，它的作用就是帮助人们花更少的精力洗净衣服上的污渍。但洗衣服使用过多对人体是有损伤的，人们选择洗衣粉的时候应根据自身的实际情况选择低浓度的洗衣粉。

该试验结果表明，日常洗漱用品可能具有一定的毒性，作用于蚕豆根尖后引起染色体畸变，由此可推断对人体也有可能致癌、致畸、致突变，提醒人们选择安全的洗漱用品，减少使用含有害化学物质的日常用品。

4 参考文献

[1] 蚕豆根尖微核试验的应用与发展[J].癌变·畸变·突变，1999，11（3）：337.

[2] 王玉鹏.微核试验方法及在環境监测中应用的发展趋势[J].环境与健康杂志1999，16（6）：378-379.

[3] 胡振东，蚕豆微核测定技术及其应用[J].淮北煤师院学报，2000，21（4）：65-67.

[4] 邓冰，穆龙，周银行.采用蚕豆根尖细胞微核技术检测核设施周围水域的遗传毒性[J].癌变·畸变·突变，2016，28（2）：141-144.