红花黄色素对大鼠血栓闭塞性脉管炎模型的影响

2017-07-12王志江梁丽丽魏国栋王瑜山东中医药高等专科学校山东烟台264100

化工管理 2017年11期

王志江梁丽丽魏国栋王瑜（山东中医药高等专科学校，山东烟台 264100）

王志江梁丽丽魏国栋王瑜（山东中医药高等专科学校，山东烟台 264100）

[目的]探究红花黄色素对大鼠血栓闭塞性脉管炎的影响。[方法]采用不同浓度的红花黄色素供试液，以生理盐水、阿司匹林组为对照，腹主动脉取血，检测血流变学并进行血液分析。[结果]红花黄色素各剂量组血小板计数、平均血小板体积、血小板积和血浆粘度呈现剂量依赖性降低。[结论]红花黄色素对血栓闭塞性脉管炎的防治作用很可能与抗血小板和降低血浆粘度有关。

红花黄色素；血栓闭塞性脉管炎；血小板；血浆

红花黄色素(Safflower yellow，SY)具有化瘀止痛、活血通经之功效，对血管栓塞性疾病、冠心病、高血压、糖尿病并发症等均有疗效，且具有镇痛作用和抗炎作用[1]。血栓闭塞性脉管炎表现为患肢缺血、疼痛、间歇性跛行、足背动脉搏动减弱或消失和游走性表浅静脉炎，严重者有肢端溃疡和坏死[2]，其病因和发病机制尚未明确。鉴于红花黄色素具有化瘀止痛、活血通经之功效，本实验通过建立大鼠血栓闭塞性脉管炎模型，考察其对血栓闭塞性脉管炎的防治作用，为临床研究提供实验依据。

1 材料

1.1 动物

SD大鼠60只，体重215±3.5g，雌雄不限，购于山东省实验动物中心，生产合格证号：SCXK(鲁)20100015。

1.2 药品与试剂

红花由山东中医药高等专科学校刘波教授鉴定为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。阿司匹林肠溶片，神威药业集团有限公司，国药准字H13023716；规格：肠溶包衣片，每片重25mg；月桂酸钠，Sigma公司，批号L9715；水合氯醛，国药集团化学试剂有限公司，批号30037517。

1.3 主要仪器

ARCHITECT C16000 System全自动生化分析仪（Abbott Laboratories公司），LG-R80A血液流变仪（北京中勤世帝科学仪器有限公司），MEK-7222K全自动血细胞分析仪（日本光电），Olympus光学显微镜，酶标仪（Labsystems Multiskan MS 352型，芬兰）。

2 方法

2.1 供试品溶液的制备

取红花Carthamus tinctorius L.的干燥花50g，精密称定，用12倍量水浸泡30min，60℃下动态提取2次，每次1h，加入95%乙醇使含醇量达到80%，醇沉24h，过滤，滤液即为红花黄色素粗提液，含红花黄色素80%以上。用微孔滤膜（0.45μm）滤过，定容至50mL，作为供试品溶液（每mL溶液中含药材1g）。

2.2 分2组与给药

健康SD大鼠60只，随机分为正常组、模型组、阿司匹林肠溶片组（19.2mg/kg）和红花黄色素高、中、低剂量组（0.6mL/kg、1.2mL/kg、2.4mL/kg），灌胃相应药物连续2周后复制血栓闭塞性脉管炎模型。

2.2 模型复制

按照文献方法，对模型组和各给药组大鼠腹腔注射10%水合氯醛3mL/kg麻醉后仰卧位固定，于左侧腹股沟部位剪毛，常规碘伏和酒精消毒，在腹股沟中点处纵行切开皮肤约1.5cm，游离股动脉，用动脉夹夹闭股动脉阻断血流，于动脉夹下方0.3 cm处向远心端注入7 g·L-1月桂酸钠溶液0.1 mL，注射时股动脉远端发白表示造模成功，于注射后15 min松开并移除动脉夹，观察有无出血现象，必要时用灭菌干棉球压迫止血，缝合肌肉、皮下组织和皮肤。术前0.5h和术后24h分别腹腔注射青霉素3万U预防感染，造模后继续给药1周。

2.3 标本采集

各组大鼠于造模给药后7d，腹腔注射10%水合氯醛0.3ml/ 100g体重麻醉后，腹主动脉取血至真空采血管，迅速送滨州医学院烟台附属医院检测血流变学和血液分析，剩余的血浆和血清-80℃冻存备测。

2.4 统计学处理

数据以均数±标准差(±S)表示，利用SPSS13.0统计软件处理。方差齐性时两两比较采用LSD-t检验，多组间比较采用one-way ANOVA法方差分析，方差不齐时采用Dunnett’c方法作多重比较，P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 大鼠血小板的变化

模型组大鼠血小板计数、平均血小板体积、血小板比积均增加，与正常对照组比较有显著性差异，P＜0.01或P＜0.05；红花黄色素各剂量组血小板计数、平均血小板体积、血小板比积均减少，其中高剂量组与模型组比较有显著性差异，P＜0.05，见表1。

3.2 大鼠血流变学的变化

模型组全血粘度和血浆粘度均有所升高，其中血浆粘度与正常对照组比较有显著性差异，P＜0.05；红花黄色素高剂量组全血粘度无明显变化，与模型组比较无显著性差异，P＞0.05，血浆粘度和红细胞聚集指数有所降低，其中血浆粘度与模型组比较均有显著性差异，P＜0.01；红花黄色素中、低剂量组全血粘度和红细胞聚集指数有所升高，其中低剂量组与模型组比较有显著性差异，P＜0.01或P＜0.05，但血浆粘度降低，与模型组比较有显著性差异，P＜0.05。见表2。