清热润燥口服液的定性鉴别研究

袁小淋 余晓玲 魏丹霞* 李月亭.昆明市中医医院，云南 昆明 6500；.云南中医学院，云南 昆明 65000



清热润燥口服液的定性鉴别研究

袁小淋1余晓玲1魏丹霞1*李月亭2
1.昆明市中医医院，云南 昆明 650011；2.云南中医学院，云南 昆明 650200

目的：建立清热润燥口服液的定性鉴别方法。方法：采用薄层色谱法对处方桑叶、陈皮、浙贝母、麦冬、茯苓进行定性鉴别。结果：薄层鉴别色谱斑点清晰、专属性强，阴性对照无干扰。结论：该方法专属性强、稳定性好、操作简便，可用于清热润燥口服液的定性鉴别。

清热润燥口服液；薄层鉴别；桑叶；陈皮；浙贝母；麦冬；茯苓

清热润燥口服液是昆明市中医医院依据云南省荣誉名中医陆家龙主任医师多年临床经验研制而成，处方由桑叶、芦根、陈皮、苦杏仁、麦冬、沙参、茯苓等13味中药组成，具有较好的清热养阴、润燥止咳的作用，临床疗效较好[1]。为更好地控制该制剂质量，笔者采用薄层色谱法，建立了清热润燥口服液中的桑叶、陈皮、浙贝母、麦冬、茯苓的薄层鉴别方法，为清热润燥口服液的质量标准的完善充实提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 超声波清洗仪(200W，40kHz)昆山市超声仪器有限公司)；FB124自动内校电子分析天平 (上海舜宇恒平科学仪器有限公司)；双槽展开缸(20cm×10cm)。

1.2 材料 硅胶G高效板、硅胶GF254高效板(青岛海洋化工厂)；清热润燥口服(批号150616,150713,150716，昆明市中医医院)药材购于云南白药集团股份有限公司中药饮片分公司；橙皮苷(批号：111538-200403)、浙贝母(批号：120972-201405)、陈皮(批号：120969-200808)、桑叶(批号：121123-200904)、茯苓(批号：121117-201308)、麦冬对照药材(批号：121013-201310)、贝母素甲(批号：110750-200608)、贝母素乙(批号：110751-200608)等对照品及对照药材均购自中国药品生物制品检定所，所有试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 桑叶[2]定性鉴别 取本品30mL，加石油醚30mL，加热回流30min，弃去石油醚液，药渣挥干，残渣加乙醇30mL，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL，置于60℃水浴锅上搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL作为供试品溶液。再取桑叶对照药材2g，同法制成对照药材溶液。取缺桑叶药材阴性样品溶液按供试品溶液方法制成阴性样品溶液；按照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取对照药材溶液5μL、供试品溶液阴性样品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品无此斑点。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺桑叶的阴性样品溶液无相应斑点。色谱图见图1。

2.2 陈皮[3]定性鉴别 本品20mL，用乙醚振摇提取2次，每次20mL，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30mL，合并乙酸乙酯提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。再取陈皮对照药材2g，加水70mL，煮沸15min，过滤，滤液加乙酸乙酯50mL振摇提取，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为对照药材溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。取缺陈皮药材阴性样品溶液按供试品溶液方法制成阴性样品溶液；照《薄层色谱法检验标准操作程序》(附录ⅥB)试验，吸取上述4种溶液各5μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100:17:13)为展开剂，置于展开缸内预饱和20min，展开至5cm处，取出，晾干，再以苯-乙酸乙酯-甲酸-水(20:10:1:1)的上层溶液为展开剂，展开至约8cm处。取出，晾干，喷以三氯化铝试液，晾干后置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱对应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点，而阴性对照液无此斑点。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无此斑点。色谱图见图2。

2.3 浙贝母[4]定性鉴别 取本品30mL，用10%NaOH调节pH至12以上，用氯仿50mL分2次振摇提取，合并氯仿提取液，蒸干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。取浙贝母甲素、浙贝母乙素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg溶液，作为对照品溶液。另取浙贝母对照药材2g，加氨水2mL使润湿，加氯仿20mL，超声15min，过滤，滤液蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，作为对照药材溶液。取缺浙贝母药材阴性样品溶液按供试品溶液方法制成阴性样品溶液；照《薄层色谱法检验标准操作程序》(附录ⅥB)试验，吸取上述4种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-浓氨(8.5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同的淡红色斑点，阴性样品无此斑点。色谱图见图3。

2.4 麦冬[5]定性鉴别 取本品30mL，加三氯甲烷-甲醇(7∶3)混合溶液20mL，静置3h，超声30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1mL使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材2g，同法制成对照药材溶液。取缺麦冬药材阴性样品溶液按供试品溶液方法制成阴性样品溶液；照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述溶液各10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲醇-甲苯-冰乙酸(5∶80∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的紫色斑点，阴性样品无此斑点。色谱图见图4。

2.5 茯苓[6]定性鉴别 取本品20mL，加乙醚振摇提取3次，每次20mL，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。取茯苓对照药材2g，加乙醚50mL，超声10min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL，作为对照药材溶液。另取缺茯苓药材阴性样品溶液按供试品溶液方法制成阴性样品溶液；照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点，阴性样品无此斑点。色谱图见图5。

2.6 不同温度、湿度下薄层鉴别系统考察 照中国药典薄层色谱法(附录ⅥB)试验，按上述2.1～2.5项下方法，分别在不同温度和湿度条件下对三批清热润燥口服液中的桑叶、陈皮、浙贝母、麦冬、茯苓进行鉴别，结果显示上述鉴别方法中陈皮鉴别方法在温度较低时分离较差，其余方法专属性强、稳定性良好。结果见表1。

表1 不同温度、湿度条件下薄层鉴别系统考察

续表

表1 不同温度、湿度条件下薄层鉴别系统考察

3 讨论

清热润燥口服液由13味药组成，成分复杂，定性鉴别时相互之间存在一定干扰。为能准确鉴别处方药材，本文采用了对照药材鉴别，部分药味增加了成分鉴别，如陈皮、浙贝母。陈皮的薄层鉴别方法有多种，如以橙皮苷为对照品，采用羧甲基纤维素钠为黏合剂的0. 5%氢氧化钠的硅胶G薄层板进行鉴别[7]，或是采用对照药材，采用聚酰胺薄膜，以丙酮-水(1：1)为展开剂进行鉴别[8]。同时以橙皮苷和陈皮对照药材为参考，进行了鉴别方法考察，所得方法适用于以橙皮苷和陈皮对照药材任意一种为对照品进行鉴别。另外，在实验中发现麦冬和茯苓采用药典方法鉴别时，供试品的斑点不够清晰，本实验进行了进一步改进，以香草醛硫酸溶液显色，斑点更清晰。浙贝母采用药典方法时，斑点有拖尾，本实验对展开剂进行改进，去除了甲醇，效果良好。桑叶的鉴别采用了药典方法，供试品斑点清晰，阴性未见干扰。

综上，该方法专属性强、稳定性好、操作简便，为清热润燥口服液质量标准的完善提供了良好的实验依据。

[1]魏丹霞,施兴黔,陆家龙.陆家龙导师辨证治疗昆明地区感冒后咳嗽的特色[J]. 云南中医中药杂志,2010,31(4):1-3.

[2]江丰,冯丽华,曾丽萍.伤风止咳糖浆的薄层色谱鉴别[J].实用临床医学,2005,6(10):18-20.

[3]刘斌,王晓光,陈玮.康赛德止痛液中陈皮、白术和党参的薄层鉴别[J].时珍国药研究,1997,8(2):61-62.

[4]张义生,梁惟俊,范彦博,等.调脂康口服液的薄层色谱鉴别[J].中国医院药学杂志,2012,32(7):556-558.

[5]吴秀玉,王志国,佟连生.健儿消食口服液中白术和麦冬的薄层色谱鉴别[J].时珍国医国药,2003,14(2):87.

[6]高剑锋,任敏,路伟,等.加味酸枣仁合剂的薄层色谱鉴别研究[J].中国现代应用药学,2009,26(6):455-457.

[7]刘薇.益气固摄浓缩丸中黄芪及陈皮的薄层色谱法定性鉴别[J].湖北医学院学报,2014,33(2):163-164.

[8]杨璐维,陈蕾.平胃散加减方中黄芩、连翘、陈皮的薄层鉴别[J].临床医学工程,2012,19(5):821-822.

Study on Qualitative Identification of Qingrerunzao Oral Liquid

YUAN Xiaolin1YU Xiaoling1WEI Danxia1*LI Yueting2

1.Kunming Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650011,China; 2.Yunnan College of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650200,China

Objective To establish qualitative identification method of Qingrerunzao oral liquid. Methods TLC were used for identification of folium mori,pericarpium citri reticulatae,bulbus fritiuariae thunbergii,radix ophiopagonis and poria.Results TLC had the diagnostic characteristic for the distinct spot which illustrated the specificity, the negative control had no a interference. Conclusion This method is specific, stable and easy to operate, could be applied to qualitatively identify Qingrerunzao oral liquid.

Qingre Runzao Oral Liquid; TLC; Folium Mori; Pericarpium Citri Reticulatae; Thunberg Fritillary Bulb; Radix Ophiopogonis; Poria

云南省财政厅、云南省卫生厅资助项目(云卫发 [2009]1134 号)

袁小淋(1985-)，女，硕士研究生，药师，研究方向为医院制剂开发与应用。E-mail:178739725@@qq.com

魏丹霞(1970-)，女，硕士生导师，主任医师，研究方向为中医临床研究。E-mail:1216508769@qq.com

R284.1

A

1007-8517(2017)12-0018-04

2017-04-11 编辑：梁志庆)