HPLC法测定清心沉香八味散中沉香四醇的含量

那顺白乙拉 孟 和 .内蒙古自治区通辽市传染病医院，内蒙古 通辽 028000；2.内蒙古自治区通辽市食品药品检验所，内蒙古 通辽 028000



HPLC法测定清心沉香八味散中沉香四醇的含量

那顺白乙拉1孟 和2*
1.内蒙古自治区通辽市传染病医院，内蒙古 通辽 028000；2.内蒙古自治区通辽市食品药品检验所，内蒙古 通辽 028000

目的：测定清心沉香八味散中沉香四醇的含量。方法：采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，0.1%甲酸溶液为流动相B，柱温为30℃；流速1.0mL/min；检测波长为252nm。结果：沉香四醇进样量在0.004985～0.074775μg范围之内与两个峰面积之和具有良好的线性关系(r=0.9999)；平均加样回收率为98.3%，RSD值0.9%(n=6)。结论：该方法稳定、准确，可用于清心沉香八味散的质量控制。

清心沉香八味散；沉香四醇；高效液相色谱法

清心沉香八味散为《国家中成药标准汇编》内科肺系(二)分册[1]收载的品种，是地标升国标的品种，由沉香、广枣、檀香、紫檀香、红花、肉豆蔻、天竺黄和北沙参八味药材组成。具有清心肺、理气、镇静安神的功效，主要用于心肺火盛，胸闷不舒，胸肋闷痛，心慌气短。沉香是沉香八味散的主要成分，具有行气止痛、温中止呕、纳气平喘的功效，可以改善和治疗气逆喘息、呕吐呃逆、脘腹胀痛等症。现代研究表明，沉香对于改善血液循环、调节血压及呼吸等有不错的作用。沉香的醇提取物具有抗组胺、平喘作用[2]，用于治疗胸闷气短，喘息气逆等。沉香四醇在沉香药材中含量较高，稳定性较好[3]。根据2015年版《中国药典》一部[4]建立沉香药材中沉香四醇的含量测定方法，采用高效液相色谱法测定制剂中沉香四醇的含量，使其制剂的质量可控。

1 仪器与材料

1.1 仪器 赛默飞世尔 U3000DGLC超高效液相色谱仪；Precisa92SM-202A型电子天平。

1.2 材料 沉香四醇对照品(批号：111980-201602，含量98.3%，中国食品药品检定研究院)。清心沉香八味散(批号：1507027、1511038、1512059，内蒙古蒙药股份有限公司；)。乙腈为色谱纯，水为高纯水。

2 方法和结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil Cl8(以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 4.6mm×250mm， 5μm)。流动相：乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按2015年版《中国药典》一部沉香药材含量测定项下规定进行梯度洗脱；流速为1.0mL/min；柱温为30℃；检测波长为252 nm；进样量：10μL。理论板数按沉香四醇峰计算应不低于6000。沉香四醇峰保留时间为24.56min。阴性对照色谱在沉香四醇峰保留时间处无干扰。见图1。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取沉香四醇对照品，加甲醇制成每1mL含0.09820mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取清心沉香八味散1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，称定重量，浸泡0.5h，超声处理(功率250W，频率40 kHz)1h，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液，即得。

2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例并以相同工艺制备缺沉香的阴性样品，并按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

2.5 线性关系考察 精密称取沉香四醇对照品0.00982g，置100mL容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀。作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液1、2、5、10、15、20μL注入仪器中，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，以对照品的进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y= 32.61943632X+ 0.11866363(r=0.999 9)结果表明沉香四醇在0.0982～1.964μg范围之内呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验 取同一批号(1512059)清心沉香八味散供试品溶液，连续进样6次，测定沉香四醇色谱峰面积，平均面积为34.0453，RSD为0.7%。表明仪器的精密度良好。

2.7 重复性试验 取同一批号(1512059)清心沉香八味散供试品溶液6份，进行含量测定，结果沉香四醇的平均含量为2.55mg/g，RSD为0.9%。表明本试验的重复性良好。

2.8 稳定性试验 取已知含量的供试品(批号：1512059)溶液，分别于0、2、5、10、15、24h进样测定，记录峰面积，结果峰面积的RSD为1.3%，表明供试品溶液在24h内稳定。

2.9 回收率试验 取已知含量的样品(批号：1512059，含量：2.55mg/g)6份，每份约0.5g，精密称定，分别精密加入沉香四醇对照品适量，按供试品溶液制备方法测定含量，并计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

2.10 样品测定 精密吸取对照品溶液和供试品溶液个10μL，注入高效液相色谱-质谱测定仪，测定，结果见表2

表2 沉香四醇含量测定结果

3 讨论

提取方法的考察中，先后考察了供试品粉末加乙醇超声处理30min、浸泡30min超声处理30min提取和浸泡30min超声处理1h提取结果，结果表明前两种提取方法提取效果不完全，浸泡30min超声处理1h的提取方法效果较好。

实验采用HPLC法测定清心沉香八味散中沉香四醇的含量，经方法学研究表明此方法具有样品预处理简单、回收率高、重复性好、专属性强等特点，可作为清心沉香八味散的质量标准检验方法，能够更有效地控制样品的质量。

[1]国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局国家药品标准[S].WS-10948(ZD-0948)-2002-2012Z.

[2]李红念，梅全喜，林焕泽，等.沉香的化学成分、药理作用和临床应用研究进展[J].中国药房，2011，22(35)：3349-3351.

[3]顾宇凡，张倩，霍会霞，等.HPLC-DAD测定沉香药材中沉香四醇的含量[J].世界科学技术-中医药现代化， 2014(12)：2643-2646.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S]. 北京：中国医药科技出版社，2015.

[5]南京中医药大学编.中药大辞典[M].上海：上海科技出版社，2006.

[6]常新全，丁丽霞.中药活性成分分析手册[M].北京：学苑出版社，2002.

[7]吴泽青，熊礼燕，帅欧，等. 3种不同方法形成的沉香药材色酮含量测定[J].中药新药与临床药理，2015(3)：356-360.

[8]郅景梅.沉香药材中两种活性成分的含量测定研究[J].健康必读(下旬刊)，2013(1)：301-302.

Determination of the Content of agarotetrol in Qingxinchenxiangbawei Powder by HPLC

Nashunbaiyila1MENG He2*

1.Tongliao Infectious Disease Hospital,Tongliao 028000,Chian;2.Tongliao City Institute of Food and Drugs,Tongliao 028000,China

Obiective The content of agarotetrol in Qingxinchenxiangbawei Powder was determined. Methods The HPLC analysis was performed on a column packed with octadecylsilane bonded silica gel as filler in the temperature of 30℃，eluted with acetonitrile as mobile phase A and 0.1% formic acid solution as the mobile phase B, with the flow rate of 1.0 ml/min. The detection wavelength was set at 252 nm. Results There was a good linear relationship between 0.004985 and 0.074775μg in the injection volume of agarotetrol(r=0.99999)， with the average recoveries were 98.3% and theRSDwas 0.9% (n=6). Conclusion The method is stable and accurate, and can be used for quality control of Qingxinchenxiangbawei Powder.

Qingxinchenxiangbawei Powder；Agarotetrol；HPLC

那顺白乙拉(1968-),男，蒙古族，本科，副主任药师，研究方向为中蒙药。E-mail:13947516201@163.com

孟和(1970-)，男，蒙古族，本科，副主任药师，研究方向为中蒙药。E-mail:13500638181@139.com

R284.1

A

1007-8517(2017)12-0011-03

2017-04-11 编辑：梁志庆)